摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-24页 |
1.1 鱼类出血性败血症的研究概述 | 第10-13页 |
1.1.1 维氏气单胞菌的研究进展 | 第10-11页 |
1.1.2 气单胞菌的生物学特性及致病性和耐药情况 | 第11-12页 |
1.1.3 维氏气单胞菌致出血性败血症的发病因子 | 第12-13页 |
1.2 鱼类免疫系统的研究概括 | 第13-18页 |
1.2.1 鱼类的免疫器官 | 第14-15页 |
1.2.2 鱼类细胞免疫 | 第15-16页 |
1.2.3 鱼类免疫因子 | 第16-18页 |
1.2.4 鱼类非特异性免疫评价指标 | 第18页 |
1.3 益生菌在水产养殖业中的研究现状 | 第18-21页 |
1.3.1 益生菌在水产养殖中的研究现状 | 第18-19页 |
1.3.2 益生菌作用机制的研究 | 第19-21页 |
1.3.3 益生菌对水产动物免疫系统的影响 | 第21页 |
1.4 本实验的研究目的和意义 | 第21-24页 |
第二章 草鱼出血病病原菌的分离纯化 | 第24-34页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.1.1 实验动物 | 第24页 |
2.1.2 实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.3 实验试剂 | 第25页 |
2.1.4 引物 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-27页 |
2.2.1 培养基的配置 | 第25页 |
2.2.2 致草鱼出血性败血症病原菌的分离纯化 | 第25-26页 |
2.2.3 16 SrDNA序列测定与分析 | 第26页 |
2.2.4 回归感染 | 第26页 |
2.2.5 维氏气单胞菌浓度曲线的绘制 | 第26-27页 |
2.2.6 毒力基因的检测 | 第27页 |
2.2.7 不同浓度供试菌对健康草鱼的攻毒感染实验 | 第27页 |
2.3 实验结果分析 | 第27-31页 |
2.3.1 菌株的形态学鉴定结果 | 第27-28页 |
2.3.2 分子生物学鉴定和系统发育树的构建 | 第28-29页 |
2.3.3 维氏气单胞菌的浓度曲线 | 第29页 |
2.3.4 毒力基因的检测结果 | 第29-30页 |
2.3.5 维氏气单胞菌对健康草鱼的急性毒性实验 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-32页 |
2.5 结论 | 第32-34页 |
第三章 维氏气单胞菌对草鱼免疫指标的影响 | 第34-48页 |
3.1 实验材料 | 第34-36页 |
3.1.1 主要仪器 | 第34-35页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第35页 |
3.1.3 引物 | 第35-36页 |
3.2 实验方法 | 第36-38页 |
3.2.1 实验动物处理 | 第36页 |
3.2.2 血清和肝组织分离 | 第36页 |
3.2.3 总RNA提取及反转录 | 第36-37页 |
3.2.4 q-RTPCR | 第37页 |
3.2.5 草鱼血清和肝组织生理生化指标检测 | 第37-38页 |
3.3 结果 | 第38-44页 |
3.3.1 总RNA提取 | 第38页 |
3.3.2 基因表达分析 | 第38-44页 |
3.4 讨论 | 第44-45页 |
3.5 结论 | 第45-48页 |
第四章 益生菌对草鱼免疫指标的影响 | 第48-58页 |
4.1 实验材料 | 第48-50页 |
4.1.1 菌株 | 第48页 |
4.1.2 饲料的制作 | 第48-50页 |
4.2 实验方法 | 第50页 |
4.2.1 实验动物处理 | 第50页 |
4.2.2 血清和肝组织分离 | 第50页 |
4.2.3 总RNA提取及反转录 | 第50页 |
4.2.4 q-RTPCR | 第50页 |
4.3 结果 | 第50-53页 |
4.3.1 益生菌对感染草鱼mRNA水平IL-8和TNF-α相关基因表达的影响 | 第50-52页 |
4.3.2 益生菌对草鱼血清中免疫指标的影响 | 第52页 |
4.3.3 益生菌对感染草鱼死亡率的影响 | 第52-53页 |
4.4 讨论 | 第53-54页 |
4.5 结论 | 第54-55页 |
4.6 展望 | 第55-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68-70页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第70-72页 |