中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
符号说明 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-23页 |
第一章 破骨细胞与骨骼 | 第11-16页 |
1 骨骼的代谢 | 第11页 |
2 破骨细胞的形态 | 第11-12页 |
3 破骨细胞的骨吸收结构 | 第12-14页 |
4 破骨细胞的其他功能 | 第14-16页 |
4.1 调节骨形成 | 第14-15页 |
4.2 决定生物内稳态 | 第15-16页 |
第二章 OPG与破骨细胞 | 第16-18页 |
1 OPG的结构 | 第16页 |
2 OPG在骨代谢中的作用 | 第16-17页 |
3 OPG对免疫系统的影响 | 第17页 |
4 OPG对心血管系统的影响 | 第17-18页 |
第三章 Rho信号通路 | 第18-23页 |
1 Rho GTPases家族 | 第18-19页 |
1.1 Rho GTPases家族成员 | 第18页 |
1.2 Rho GTPases家族蛋白的功能 | 第18-19页 |
2 Rho GTPases家族下游效应物PAKs | 第19-21页 |
2.1 PAKs的结构 | 第19页 |
2.2 PAK家族蛋白与细胞骨架 | 第19-21页 |
3 Rho GTPases与疾病 | 第21-22页 |
4 本研究的目的意义 | 第22-23页 |
第二部分 试验研究 | 第23-48页 |
第一章 OPG对破骨细胞分化的影响 | 第23-36页 |
1 材料和方法 | 第23-27页 |
1.1 细胞株 | 第23页 |
1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
1.3 主要仪器 | 第24页 |
1.4 RAW264.7细胞培养 | 第24页 |
1.5 破骨细胞诱导 | 第24页 |
1.6 破骨细胞处理 | 第24-25页 |
1.7 TRAP染色鉴定破骨细胞 | 第25页 |
1.8 牛皮质骨片吸收陷窝的检测 | 第25页 |
1.9 QRT-PCR检测破骨细胞分化过程中标志性基因的表达 | 第25-26页 |
1.10 Western blot检测破骨细胞分化过程中标志性蛋白的表达 | 第26-27页 |
1.11 统计分析 | 第27页 |
2 结果 | 第27-33页 |
2.1 破骨细胞分化过程细胞形态的变化 | 第27-28页 |
2.2 破骨细胞分化过程中标志性蛋白TRAP、Cathepsin K的表达 | 第28-29页 |
2.3 OPG对TRAP阳性细胞数目的影响 | 第29-31页 |
2.4 OPG对破骨细胞骨吸收活性的影响 | 第31-32页 |
2.5 OPG对破骨细胞分化过程中标志性基因TRAP和Cathepsin K表达的影响 | 第32页 |
2.6 OPG对破骨细胞分化过程中标志性蛋白TRAP和Cathepsin K表达的影响 | 第32-33页 |
3 讨论 | 第33-36页 |
第二章 OPG抑制破骨细胞分化的Rho信号转导机制 | 第36-48页 |
1 材料和方法 | 第36-38页 |
1.1 细胞株 | 第36页 |
1.2 主要试剂 | 第36页 |
1.3 主要仪器 | 第36-37页 |
1.4 破骨细胞处理 | 第37页 |
1.5 破骨细胞伪足小体F-actin染色及胞核DAPI染色 | 第37页 |
1.6 扫描电镜检测破骨细胞伪足 | 第37页 |
1.7 QRT-PCR检测OPG对Rho家族基因表达的影响 | 第37页 |
1.8 Western blot检测相关蛋白 | 第37页 |
1.9 统计分析 | 第37-38页 |
2 结果 | 第38-46页 |
2.1 OPG对破骨细胞分化过程中伪足小体的影响 | 第38-39页 |
2.2 扫描电镜观察破骨细胞伪足的变化 | 第39-41页 |
2.3 OPG对Rho家族主要基因(Cdc42V1、Cdc42V2、Rac1、Rac2、Rac3)表达的影响 | 第41-42页 |
2.4 OPG对Rho下游PAK激酶表达的影响 | 第42-44页 |
2.5 OPG对PAK下游LIMK和cofilin表达的影响 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-61页 |
全文结论 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第63-64页 |