中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
符号说明 | 第9-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-20页 |
第一章 缝隙连接研究进展 | 第12-16页 |
1 缝隙连接简介 | 第12-14页 |
1.1 缝隙连接的结构 | 第12-13页 |
1.2 缝隙连接的功能和调节机制 | 第13-14页 |
2 缝隙连接和凋亡 | 第14-16页 |
第二章 镉毒性研究进展 | 第16-19页 |
1 镉分布及其危害 | 第16-17页 |
2 镉与细胞凋亡 | 第17页 |
3 镉与MAPK信号转导途径 | 第17-18页 |
4 镉与缝隙连接 | 第18-19页 |
本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
第二部分 试验研究 | 第20-40页 |
第一章 镉对BRL 3A细胞缝隙连接通讯功能的影响 | 第20-28页 |
1 材料与方法 | 第20-23页 |
1.1 实验细胞系 | 第20页 |
1.2 主要试剂 | 第20页 |
1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
1.4 主要溶液的配制 | 第21页 |
1.5 细胞培养 | 第21页 |
1.6 xCELLigence实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI) | 第21页 |
1.7 细胞染毒后的形态学观察 | 第21页 |
1.8 划痕染料标记示踪技术(SL/DT)测定GJIC | 第21-22页 |
1.9 激光共聚焦观察细胞Cx43分布 | 第22页 |
1.10 免疫印迹检测细胞Cx32、Cx43蛋白表达及其磷酸化水平 | 第22-23页 |
1.11 统计学分析 | 第23页 |
2 结果 | 第23-26页 |
2.1 镉对BRL 3A细胞指数的影响 | 第23-24页 |
2.2 镉对BRL 3A细胞形态的影响 | 第24页 |
2.3 镉对BRL 3A细胞间GJIC的影响 | 第24-25页 |
2.4 镉对BRL 3A细胞Cx43分布的影响 | 第25-26页 |
2.5 镉对BRL 3A细胞Cx32、Cx43和p-Cx43蛋白表达影响 | 第26页 |
3 讨论 | 第26-28页 |
第二章 缝隙连接参与调控镉诱导的BRL 3A细胞凋亡 | 第28-40页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
1.1 实验细胞系 | 第28页 |
1.2 主要化学试剂 | 第28页 |
1.3 主要仪器 | 第28页 |
1.4 xCELLigence实时分析技术(RTCA)检测细胞指数(CI) | 第28-29页 |
1.5 划痕染料标记示踪技术(SL/DT)测定GJIC | 第29页 |
1.6 免疫印迹检测细胞Cx32、Cx43、p-Cx43、Bax、Bcl-2、caspase-3 JNK、p-JNK、ERK、p-ERK、p38和p-p38蛋白表达 | 第29页 |
1.7 流式细胞仪检测胞内游离钙离子浓度([Ca~(2+)]_i) | 第29页 |
1.8 Hoechst 33258染色观察细胞核形态的变化 | 第29页 |
1.9 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第29页 |
1.10 统计学分析 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-38页 |
2.1 RTCA检测BRL 3A细胞指数(CI) | 第30-31页 |
2.2 SL/DT法检测BRL 3A细胞间GJIC | 第31页 |
2.3 Western blot检测Cx32、Cx43和p-Cx43蛋白表达 | 第31-33页 |
2.4 流式细胞术检测胞内钙离子浓度 | 第33页 |
2.5 Hoechst 33258染色观察BRL 3A细胞核形态 | 第33-34页 |
2.6 流式细胞术检测BRL 3A细胞凋亡率 | 第34-35页 |
2.7 Western blot检测BRL 3A细胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达 | 第35-37页 |
2.8 Western blot检测BRL 3A细胞MAPK蛋白表达 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-40页 |
全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第53-54页 |