中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-23页 |
1 核盘菌 | 第11-16页 |
1.1 核盘菌分类地位 | 第11页 |
1.2 核盘菌生长发育 | 第11-13页 |
1.3 核盘菌致病关键因子 | 第13-15页 |
1.4 菌核病发生与防控研究 | 第15-16页 |
2 GATA转录因子研究进展 | 第16-18页 |
2.1 GATA转录因子简介 | 第16-17页 |
2.2 GATA转录因子的生物学功能 | 第17页 |
2.3 GATA转录因子Ams2研究进展 | 第17-18页 |
3 组蛋白及其相关研究 | 第18-19页 |
4 基因功能研究技术 | 第19-21页 |
4.1 RNA干扰技术 | 第19-20页 |
4.2 基因敲除技术 | 第20页 |
4.3 CRISPR/Cas9技术 | 第20-21页 |
4.4 T-DNA插入 | 第21页 |
5 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 SsAms2基因克隆、载体构建及其遗传转化 | 第23-39页 |
1 实验材料 | 第23-25页 |
1.1 菌株、载体及引物 | 第23页 |
1.2 主要仪器 | 第23页 |
1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
1.4 培养基及试剂配制 | 第24-25页 |
2 实验方法 | 第25-34页 |
2.1 SsAms2基因克隆 | 第25-27页 |
2.2 SsAms2RNAi载体构建 | 第27-31页 |
2.3 核盘菌遗传转化及SsAms2沉默转化子的筛选 | 第31-33页 |
2.4 SsAms2沉默转化子的验证 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-38页 |
3.1 SsAms2生物信息学分析 | 第34-36页 |
3.2 PCR验证沉默转化子 | 第36-38页 |
4 小结 | 第38-39页 |
第三章 转录因子SsAMS2的功能验证 | 第39-59页 |
1 实验材料 | 第39-40页 |
1.1 菌株、载体及引物 | 第39页 |
1.2 主要仪器 | 第39页 |
1.3 主要试剂 | 第39页 |
1.4 培养基及试剂配制 | 第39-40页 |
2 实验方法 | 第40-44页 |
2.1 沉默转化子菌落形态观察 | 第40页 |
2.2 沉默转化子生长速率测定 | 第40页 |
2.3 沉默转化子菌丝形态及分枝观察 | 第40页 |
2.4 沉默转化子侵染垫形成观察 | 第40-41页 |
2.5 沉默转化子草酸分泌测定 | 第41页 |
2.6 沉默转化子的致病力测定 | 第41-42页 |
2.7 沉默转化子抗活性氧及高盐测定 | 第42页 |
2.8 沉默转化子菌丝细胞核测定 | 第42-43页 |
2.9 组蛋白基因及细胞分裂相关基因表达量分析 | 第43-44页 |
3 结果与分析 | 第44-57页 |
3.1 沉默转化子菌落形态 | 第44页 |
3.2 沉默转化子菌核形成 | 第44-46页 |
3.3 菌丝生长速率测定 | 第46页 |
3.4 沉默转化子菌丝形态及分枝观察 | 第46-47页 |
3.5 沉默转化子的侵染垫形成观察 | 第47-48页 |
3.6 沉默转化子的草酸产生 | 第48-50页 |
3.7 沉默转化子致病力测定 | 第50-51页 |
3.8 沉默转化子抗活性氧及高盐测定 | 第51-52页 |
3.9 沉默转化子细胞核数量测定 | 第52-55页 |
3.10 沉默转化子组蛋白基因及细胞分裂相关基因表达量分析 | 第55-57页 |
4 小结 | 第57-59页 |
结论 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-75页 |
致谢 | 第75页 |