摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 绪论 | 第12-25页 |
1.1 捻转血矛线虫概述 | 第12-16页 |
1.1.1 捻转血矛线虫及其生活史 | 第12-13页 |
1.1.2 捻转血矛线虫病及其研究现状 | 第13-14页 |
1.1.3 捻转血矛线虫感染及宿主免疫应答 | 第14页 |
1.1.4 辐照致弱捻转血矛线虫及其诱导免疫保护作用机制 | 第14-15页 |
1.1.5 辐照与正常捻转血矛线虫L3幼虫的研究现状 | 第15-16页 |
1.2 排泄分泌蛋白的免疫生物学概述 | 第16-18页 |
1.2.1 排泄分泌蛋白 | 第16页 |
1.2.2 排泄分泌蛋白与宿主免疫调节 | 第16-17页 |
1.2.3 蛋白质组学在排泄分泌蛋白中的应用 | 第17-18页 |
1.3 细胞凋亡与坏死 | 第18-21页 |
1.3.1 细胞凋亡与坏死 | 第18页 |
1.3.2 细胞凋亡通路 | 第18-21页 |
1.4 等重同位素多标签相对和绝对定量蛋白质组学(iTRAQ) | 第21-23页 |
1.4.1 iTRAQ实验原理 | 第21-22页 |
1.4.2 iTRAQ技术优势 | 第22-23页 |
1.5 Transwell介绍 | 第23-25页 |
第二章 辐照与正常捻转血矛线虫幼虫ESPs的iTRAQ分析 | 第25-46页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 实验动物 | 第25页 |
2.1.2 实验主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-34页 |
2.2.1 体外培养不同时期L3幼虫ESPs的收集 | 第26-28页 |
2.2.2 蛋白质质量检测 | 第28页 |
2.2.3 SDS-PAGE电泳 | 第28页 |
2.2.4 酶解和肽段定量 | 第28页 |
2.2.5 肽段标记 | 第28-29页 |
2.2.6 SCX分级 | 第29页 |
2.2.7 毛细管高效液相色谱 | 第29-30页 |
2.2.8 质谱鉴定 | 第30页 |
2.2.9 质谱数据分析 | 第30-31页 |
2.2.10 RT-PCR验证 | 第31-34页 |
2.3 实验结果 | 第34-43页 |
2.3.1 SDS-PADE电泳鉴定结果 | 第34-35页 |
2.3.2 蛋白质鉴定统计 | 第35页 |
2.3.3 鉴定蛋白的分子量和覆盖率统计 | 第35-36页 |
2.3.4 鉴定肽段长度分布 | 第36页 |
2.3.5 显著性差异表达蛋白数量统计 | 第36-38页 |
2.3.6 差异表达蛋白GO富集分析 | 第38-39页 |
2.3.7 差异表达蛋白COG分析 | 第39-40页 |
2.3.8 差异表达蛋白Pathway富集分析 | 第40-41页 |
2.3.9 捻转血矛线虫L3幼虫凋亡坏死相关蛋白分析 | 第41-42页 |
2.3.10 捻转血矛线虫L3幼虫凋亡坏死相关蛋白RT-PCR验证 | 第42-43页 |
2.4 讨论 | 第43-46页 |
第三章 辐照与正常捻转血矛线虫幼虫ESPs免疫学功能的比较研究 | 第46-56页 |
3.1 实验材料 | 第46-47页 |
3.1.1 实验动物 | 第46页 |
3.1.2 实验主要试剂和仪器 | 第46-47页 |
3.1.3 主要溶液配制 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47-51页 |
3.2.1 山羊PBMC的分离 | 第47页 |
3.2.2 捻转血矛线虫L3幼虫的收集 | 第47页 |
3.2.3 辐照与正常捻转血矛线虫L3幼虫与PBMC共培养 | 第47-48页 |
3.2.4 RT-PCR法检测PBMC细胞因子mRNA水平的表达 | 第48-50页 |
3.2.5 Griess法检测L3幼虫ESPs刺激PBMC后NO分泌情况 | 第50页 |
3.2.6 L3幼虫ESPs对PMBC细胞迁移 | 第50-51页 |
3.3 实验结果 | 第51-54页 |
3.3.1 辐照与正常捻转血矛线虫L3幼虫与PBMC共培养 | 第51页 |
3.3.2 L3幼虫ESPs对PBMC细胞因子mRNA水平表达的影响 | 第51-53页 |
3.3.3 L3幼虫ESPs刺激PBMC后NO分泌情况 | 第53页 |
3.3.4 L3幼虫ESPs对PMBC细胞迁移的影响 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
第四章 全文总结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |