摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第1章 引言 | 第7-11页 |
第2章 材料 | 第11-15页 |
2.1 细胞株 | 第11页 |
2.2 主要试剂 | 第11-12页 |
2.3 配制试剂 | 第12-13页 |
2.4 主要仪器设备 | 第13-15页 |
第3章 方法 | 第15-23页 |
3.1 细胞培养 | 第15-17页 |
3.1.1 细胞传代 | 第15-16页 |
3.1.2 细胞冻存 | 第16页 |
3.1.3 细胞复苏 | 第16-17页 |
3.2 Hoechst 33342 双染色法观测胃癌细胞的形态变化 | 第17页 |
3.3 MTT 法检测 FTI-277 对胃癌细胞株增殖的影响 | 第17-18页 |
3.4 流式细胞仪检测胃癌细胞凋亡情况 | 第18页 |
3.5 实时荧光定量 PCR 检测 Nrf-2、Ras 的 mRNA 表达水平 | 第18-21页 |
3.5.1 RNA 提取(-70℃保存) | 第18-19页 |
3.5.2 逆转录(cDNA:一周内-20℃保存,长期-70℃保存) | 第19页 |
3.5.3 使用 PCR 方法筛选最佳退火温度 | 第19-20页 |
3.5.4 凝胶电泳 | 第20页 |
3.5.5 实时定量 PCR 方法分别检测 Nrf-2、Ras mRNA 的表达水平 | 第20-21页 |
3.6 western blot 方法分别检测 Nrf-2 与 Ras 蛋白的表达情况 | 第21-22页 |
3.6.1 制胶 | 第21-22页 |
3.6.2 转膜 | 第22页 |
3.6.3 封闭 | 第22页 |
3.6.4 化学发光显影定影 | 第22页 |
3.7 统计学分析 | 第22-23页 |
第4章 结果 | 第23-27页 |
4.1 MTT 法测定 FTI-277 对胃癌细胞株增殖影响的结果 | 第23-24页 |
4.2 FTI-277 处理胃癌细胞株引起的细胞凋亡变化 | 第24页 |
4.3 加入 FTI-277 组与空白对照组胃癌细胞的凋亡率 | 第24-25页 |
4.4 RT-PCR 方法检测 Nrf-2、Ras mRNA 表达水平的结果 | 第25页 |
4.5 western blot 法检测 Nrf-2、Ras 蛋白的表达结果 | 第25-27页 |
第5章 讨论 | 第27-31页 |
第6章 结论 | 第31-32页 |
致谢 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-36页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第36-37页 |
综述 | 第37-44页 |
参考文献 | 第43-44页 |