| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 第一部分 长链非编码RNALnc-PVT1在胃癌中的表达及预后 | 第19-27页 |
| 1 前言 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-23页 |
| 2.1 研究对象：TCGA数据库 | 第21页 |
| 2.2 基因表达数据的获取 | 第21页 |
| 2.3 统计方法 | 第21-23页 |
| 3 结果 | 第23-25页 |
| 3.1 TCGA胃癌数据验证 | 第23页 |
| 3.2 胃癌细胞中1ncRNAPVT1表达水平检测 | 第23-24页 |
| 3.3 lncRNAPVT1表达水平与胃癌患者临床病理特征关系 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-27页 |
| 4.1 TCGA数据库讨论 | 第25页 |
| 4.2 PVT1胃癌中表达结果及意义 | 第25-26页 |
| 4.3 PVT1在其他肿瘤中的表达 | 第26-27页 |
| 第二部分 长链非编码RNALnc-PVT1作为癌基因促进胃癌增值侵袭 | 第27-44页 |
| 1 前言 | 第27-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-37页 |
| 2.1 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2.3 细胞培养 | 第31页 |
| 2.3.1 细胞复苏 | 第31页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第31页 |
| 2.3.3 细胞传代 | 第31页 |
| 2.4 细胞转染 | 第31-32页 |
| 2.5 实时定量PCR | 第32-33页 |
| 2.5.1 去除基因组DNA反应 | 第32页 |
| 2.5.2 反转录反应 | 第32-33页 |
| 2.5.3 Real-TimePCR | 第33页 |
| 2.6 细胞增殖 | 第33-34页 |
| 2.7 细胞克隆形成 | 第34页 |
| 2.8 细胞侵袭实验 | 第34-36页 |
| 2.8.1 铺MatrixGel | 第34-35页 |
| 2.8.2 铺细胞悬液 | 第35页 |
| 2.8.3 Transwell染色 | 第35-36页 |
| 2.9 数据分析 | 第36-37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| 3.1 LncRNAPVT1过表达效率鉴定 | 第37页 |
| 3.2 LncRNAPVT1敲除效率鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3 LncRNAPVT1对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第38-40页 |
| 3.4 LncRNAPVT1对胃癌细胞迁移侵袭能力的影响 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三部分 长链非编码RNAPVT1参与调控胃癌自噬机制研究 | 第44-64页 |
| 1 前言 | 第44-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-52页 |
| 2.1 蛋白印迹 | 第46-48页 |
| 2.1.1 蛋白提取: | 第46页 |
| 2.1.2 蛋白定量：BCA法 | 第46-47页 |
| 2.1.3 Westernblot实验 | 第47-48页 |
| 2.2 细胞免疫荧光检测 | 第48-49页 |
| 2.3 透射电子显微镜检测 | 第49页 |
| 2.4 免疫组化染色 | 第49-51页 |
| 2.4.1 脱蜡水化 | 第50页 |
| 2.4.2 抗原修复 | 第50页 |
| 2.4.3 免疫组化染色 | 第50页 |
| 2.4.4 评分 | 第50-51页 |
| 2.5 统计分析 | 第51-52页 |
| 3 结果 | 第52-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 4.1 自噬与肿瘤转移 | 第61-63页 |
| 4.1.1 ECM降解 | 第61-62页 |
| 4.1.2 EMT | 第62页 |
| 4.1.3 肿瘤血管生成 | 第62-63页 |
| 4.1.4 肿瘤微环境 | 第63页 |
| 4.2 自噬相关蛋白与胃癌 | 第63-64页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 综述 | 第73-89页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 个人简介 | 第91页 |
