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孕中期七氟醚暴露介导过度自噬在子代大鼠神经毒性中的作用及其机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-16页
第一部分 :孕中期大鼠吸入不同浓度七氟醚对胎鼠脑内神经干细胞自噬水平的影响第16-31页
    1 前言第16-17页
    2 材料和方法第17-23页
        2.1 主要试剂和仪器第17-19页
            2.1.1 主要试剂第17-18页
            2.1.2 主要仪器第18-19页
        2.2 实验动物模型第19-20页
            2.2.1 实验动物第19页
            2.2.2 动物合笼第19页
            2.2.3 实验分组第19页
            2.2.4 麻醉处理第19-20页
        2.3 Westernblot蛋白分析第20-22页
            2.3.1 蛋白提取第20页
            2.3.2 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性第20页
            2.3.3 配胶及电泳第20-21页
            2.3.4 转膜、封闭及一抗孵育第21页
            2.3.5 二抗孵育及显影第21-22页
        2.4 免疫荧光第22页
            2.4.1 组织固定、包埋及切片第22页
            2.4.2 免疫荧光第22页
        2.5 电镜第22页
        2.6 统计学处理第22-23页
    3 结果第23-27页
        3.1 孕中期2小时3.5%七氟醚暴露升高胎鼠脑组织自噬体形成相关蛋白的表达第23-24页
        3.2 孕中期2小时3.5%七氟醚暴露降低胎鼠脑组织p62表达第24-25页
        3.3 孕中期2小时3.5%七氟醚暴露引起胎鼠脑组织中神经干细胞自噬激活第25-27页
    4 讨论第27-30页
    5 结论第30-31页
第二部分 :孕中期大鼠吸入2小时3.5%七氟醚引起的胎鼠脑组织神经干细胞自噬激活与凋亡、增殖的关系第31-46页
    6 前言第31-32页
    7 材料和方法第32-35页
        7.1 主要试剂和仪器第32页
            7.1.1 主要试剂第32页
            7.1.2 主要仪器第32页
        7.2 实验动物模型第32-33页
            7.2.1 实验动物第32页
            7.2.2 动物合笼第32-33页
            7.2.3 实验分组第33页
            7.2.4 麻醉处理第33页
        7.3 Westernblot蛋白分析第33页
            7.3.1 蛋白提取第33页
            7.3.2 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性第33页
            7.3.3 配胶及电泳第33页
            7.3.4 转膜、封闭及一抗孵育第33页
            7.3.5 二抗孵育及显影第33页
        7.4 免疫荧光第33-34页
            7.4.1 组织固定、包埋及切片第33-34页
            7.4.2 免疫荧光第34页
        7.5 TUNEL、免疫荧光双染第34页
            7.5.1 组织固定、包埋及切片第34页
            7.5.2 TUNEL、免疫荧光双染第34页
        7.6 免疫组化第34-35页
            7.6.1 组织固定、包埋及切片第34页
            7.6.2 免疫组化染色第34-35页
        7.7 统计学处理第35页
    8 结果第35-43页
        8.1 3-MA抑制孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的胎鼠脑组织自噬体形成相关蛋白表达的增高第35-36页
        8.2 3 -MA减少孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的胎鼠脑组织内神经干细胞的凋亡第36-39页
        8.3 3-MA减轻孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的胎鼠脑组织内神经干细胞增殖的抑制第39-43页
    9 讨论第43-45页
    10 结论第45-46页
第三部分 :孕中期大鼠吸入不同浓度七氟醚对胎鼠脑组织神经干细胞自噬水平影响的机制探讨第46-62页
    1.1 前言第46-47页
    1.2 材料和方法第47-52页
        1.2.1 主要试剂和仪器第47-48页
            1.2.1.1 主要试剂第47页
            1.2.1.2 主要仪器第47-48页
        1.2.2 实验动物模型第48-49页
            1.2.2.1 实验动物第48页
            1.2.2.2 动物合笼及子代饲养第48页
            1.2.2.3 实验分组第48页
            1.2.2.4 麻醉处理第48-49页
        1.2.3 Westernblot蛋白分析第49页
            1.2.3.1 蛋白提取第49页
            1.2.3.2 BCA法测定蛋白浓度及蛋白变性第49页
            1.2.3.3 配胶及电泳第49页
            1.2.3.4 转膜、封闭及一抗孵育第49页
            1.2.3.5 二抗孵育及显影第49页
        1.2.4 免疫荧光第49页
            1.2.4.1 组织固定、包埋及切片第49页
            1.2.4.2 免疫荧光第49页
        1.2.5 TUNEL、免疫荧光双染第49-50页
            1.2.5.1 组织固定、包埋及切片第49-50页
            1.2.5.2 TUNEL、免疫荧光双染第50页
        1.2.6 免疫组化第50页
            1.2.6.1 组织固定、包埋及切片第50页
            1.2.6.2 免疫组化染色第50页
        1.2.7 水迷宫第50-51页
            1.2.7.1 水迷宫组成第50页
            1.2.7.2 定位航行测试第50-51页
            1.2.7.3 空间探索测试第51页
        1.2.8 统计学处理第51-52页
    1.3 结果第52-59页
        1.3.1 孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉通过PTEN/Akt/mTOR信号通路介导胎鼠脑组织自噬水平的升高第52-53页
        1.3.2 PTEN抑制剂减轻孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的胎鼠脑组织中神经干细胞自噬激活第53-55页
        1.3.3 PTEN抑制剂减少孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的胎鼠脑组织中神经干细胞凋亡第55-56页
        1.3.4 PTEN抑制剂减轻孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的孕中期胎鼠脑组织中神经干细胞增殖抑制第56-58页
        1.3.5 PTEN和自噬抑制剂减轻孕中期2小时3.5%七氟醚麻醉引起的子代大鼠学习记忆功能损伤及海马CA1区神经元的减少第58-59页
    1.4 讨论第59-61页
    1.5 结论第61-62页
本论文创新性的自我评价第62-63页
参考文献第63-71页
综述第71-82页
    参考文献第77-82页
攻读学位期间取得的研究成果第82-83页
致谢第83-84页
个人简历第84页

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