目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
第一章 绪论 | 第11-36页 |
·CRP蛋白研究概况 | 第11-24页 |
·CRP概述 | 第11-12页 |
·CRP与cAMP的相互作用 | 第12-14页 |
·CRP中的对称性 | 第14-15页 |
·CRP与启动子的相互作用 | 第15-16页 |
·CRP与RNA聚合酶的相互作用 | 第16-19页 |
·CRP结合cAMP前后二级结构比较 | 第19页 |
·cAMP诱导的CRP构象变化 | 第19-23页 |
·CRP研究中待解决的问题 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-25页 |
参考文献 | 第25-36页 |
第二章 CRP变体蛋白D138L的表达、纯化及结晶 | 第36-47页 |
·引言 | 第36-38页 |
·克隆和表达载体 | 第36-37页 |
·蛋白质表达 | 第37页 |
·蛋白质纯化 | 第37页 |
·蛋白质结晶 | 第37页 |
·晶体的收获和储存 | 第37-38页 |
·衍射数据的收集 | 第38页 |
·试剂和仪器 | 第38-39页 |
·质粒、菌种 | 第38页 |
·实验试剂 | 第38页 |
·实验仪器 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-42页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第39页 |
·D138L CRP蛋白质粒的转化 | 第39页 |
·D138L CRP蛋白的预表达 | 第39-40页 |
·D138L CRP蛋白的大量表达 | 第40页 |
·D138L CRP蛋白的纯化 | 第40-41页 |
·D138L CRP蛋白的结晶 | 第41-42页 |
·D138L CRP品体衍射数据的收集 | 第42页 |
·实验结果 | 第42-46页 |
·D138L CRP蛋白的预表达 | 第42-43页 |
·D138L CRP蛋白的纯化 | 第43-44页 |
·D138L CRP蛋白的结晶 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-47页 |
第三章 D138L CRP蛋白的结构解析 | 第47-62页 |
·引言 | 第47页 |
·试剂和仪器 | 第47页 |
·实验试剂 | 第47页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·D138L CRP蛋白结构解析 | 第47-48页 |
·D138L CRP蛋白酶水解 | 第48页 |
·D138L CRP蛋白氢交换反应 | 第48-49页 |
·实验结果 | 第49-56页 |
·D138L CRP蛋白的晶体结构 | 第49-51页 |
·D138L CRP蛋白中cAMP结合位点 | 第51页 |
·D138L CRP蛋白结合cAMP前后结构比较 | 第51-52页 |
·D138L CRP蛋白与WT CRP结构比较 | 第52-54页 |
·D138L CRP蛋白对水解酶的灵敏性 | 第54页 |
·D138L CRP蛋白H-D交换率 | 第54-56页 |
·讨论 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-62页 |
第四章 CRP中loop3和loop4的功能研究 | 第62-78页 |
·引言 | 第62-64页 |
·loop3和loop4功能研究现状 | 第62-64页 |
·等温滴定量热法 | 第64页 |
·试剂和仪器 | 第64-65页 |
·实验试剂 | 第64-65页 |
·实验仪器 | 第65页 |
·实验方法 | 第65-67页 |
·CRP及其变体蛋白样品的准备 | 第65页 |
·CRP及其变体蛋白的圆二色谱 | 第65页 |
·CRP及其变体蛋白的FT-IR光谱 | 第65页 |
·CRP及其变体蛋白与DNA的亲和力的测定 | 第65-66页 |
·CRP及其变体蛋白与cAMP亲和力的测定 | 第66-67页 |
·实验结果 | 第67-73页 |
·CRP及其变体蛋白的二级结构比较 | 第67-68页 |
·CRP及其变体蛋白与DNA亲和力的比较 | 第68-70页 |
·CRP及其变体蛋白与cAMP亲和力的比较 | 第70-73页 |
·讨论 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |
第五章 研究结果总结和下一步工作建议 | 第78-80页 |
·研究结果总结 | 第78页 |
·下一步工作建议 | 第78-80页 |
论文发表情况 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |