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环磷酸腺苷受体蛋白D138L突变体和cAMP复合物的结构表征及构象变化机理研究

目录第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-11页
第一章 绪论第11-36页
   ·CRP蛋白研究概况第11-24页
     ·CRP概述第11-12页
     ·CRP与cAMP的相互作用第12-14页
     ·CRP中的对称性第14-15页
     ·CRP与启动子的相互作用第15-16页
     ·CRP与RNA聚合酶的相互作用第16-19页
     ·CRP结合cAMP前后二级结构比较第19页
     ·cAMP诱导的CRP构象变化第19-23页
     ·CRP研究中待解决的问题第23-24页
   ·本研究的目的及意义第24-25页
 参考文献第25-36页
第二章 CRP变体蛋白D138L的表达、纯化及结晶第36-47页
   ·引言第36-38页
     ·克隆和表达载体第36-37页
     ·蛋白质表达第37页
     ·蛋白质纯化第37页
     ·蛋白质结晶第37页
     ·晶体的收获和储存第37-38页
     ·衍射数据的收集第38页
   ·试剂和仪器第38-39页
     ·质粒、菌种第38页
     ·实验试剂第38页
     ·实验仪器第38-39页
   ·实验方法第39-42页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl_2法)第39页
     ·D138L CRP蛋白质粒的转化第39页
     ·D138L CRP蛋白的预表达第39-40页
     ·D138L CRP蛋白的大量表达第40页
     ·D138L CRP蛋白的纯化第40-41页
     ·D138L CRP蛋白的结晶第41-42页
     ·D138L CRP品体衍射数据的收集第42页
   ·实验结果第42-46页
     ·D138L CRP蛋白的预表达第42-43页
     ·D138L CRP蛋白的纯化第43-44页
     ·D138L CRP蛋白的结晶第44-46页
 参考文献第46-47页
第三章 D138L CRP蛋白的结构解析第47-62页
   ·引言第47页
   ·试剂和仪器第47页
     ·实验试剂第47页
     ·实验仪器第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·D138L CRP蛋白结构解析第47-48页
     ·D138L CRP蛋白酶水解第48页
     ·D138L CRP蛋白氢交换反应第48-49页
   ·实验结果第49-56页
     ·D138L CRP蛋白的晶体结构第49-51页
     ·D138L CRP蛋白中cAMP结合位点第51页
     ·D138L CRP蛋白结合cAMP前后结构比较第51-52页
     ·D138L CRP蛋白与WT CRP结构比较第52-54页
     ·D138L CRP蛋白对水解酶的灵敏性第54页
     ·D138L CRP蛋白H-D交换率第54-56页
   ·讨论第56-59页
 参考文献第59-62页
第四章 CRP中loop3和loop4的功能研究第62-78页
   ·引言第62-64页
     ·loop3和loop4功能研究现状第62-64页
     ·等温滴定量热法第64页
   ·试剂和仪器第64-65页
     ·实验试剂第64-65页
     ·实验仪器第65页
   ·实验方法第65-67页
     ·CRP及其变体蛋白样品的准备第65页
     ·CRP及其变体蛋白的圆二色谱第65页
     ·CRP及其变体蛋白的FT-IR光谱第65页
     ·CRP及其变体蛋白与DNA的亲和力的测定第65-66页
     ·CRP及其变体蛋白与cAMP亲和力的测定第66-67页
   ·实验结果第67-73页
     ·CRP及其变体蛋白的二级结构比较第67-68页
     ·CRP及其变体蛋白与DNA亲和力的比较第68-70页
     ·CRP及其变体蛋白与cAMP亲和力的比较第70-73页
   ·讨论第73-75页
 参考文献第75-78页
第五章 研究结果总结和下一步工作建议第78-80页
   ·研究结果总结第78页
   ·下一步工作建议第78-80页
论文发表情况第80-81页
致谢第81-82页

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