| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-52页 |
| ·磷酸化蛋白质组学概述 | 第12-18页 |
| ·蛋白质可逆磷酸化修饰 | 第13-14页 |
| ·磷酸化肽段及磷酸化位点的鉴定 | 第14-18页 |
| 1) 碰撞诱导解离 | 第14-16页 |
| 2) 电子捕获解离 | 第16-17页 |
| 3) 电子转移解离 | 第17-18页 |
| ·磷酸化蛋白质/肽段的分离与富集 | 第18-31页 |
| ·免疫沉淀法 | 第18页 |
| ·化学修饰法 | 第18-21页 |
| 1) 基于β消除反应 | 第19-20页 |
| 2) 基于EDC催化反应 | 第20-21页 |
| ·液相色谱法 | 第21-25页 |
| 1) 反相色谱 | 第21-22页 |
| 2) 强阳离子交换色谱 | 第22-23页 |
| 3) 强阴离子交换色谱 | 第23-24页 |
| 4) 亲水相互作用色谱 | 第24页 |
| 5) 静电排斥亲水相互作用色谱 | 第24-25页 |
| ·固定金属离子亲和色谱 | 第25-27页 |
| ·金属氧化物亲和色谱 | 第27-30页 |
| ·其它方法 | 第30-31页 |
| 1) 磷酸钙沉淀法 | 第30-31页 |
| 2) 聚精氨酸用于多磷酸化肽段富集 | 第31页 |
| ·糖蛋白/肽段的分离与富集 | 第31-34页 |
| ·凝集素亲和法 | 第32-33页 |
| ·硼酸法 | 第33页 |
| ·肼化学法 | 第33-34页 |
| ·亲水作用法 | 第34页 |
| ·磁性微球在蛋白质组学研究中的应用 | 第34-37页 |
| ·在固定化酶中的应用 | 第35-36页 |
| ·在磷酸化肽段或糖蛋白/肽富集中的应用 | 第36-37页 |
| ·本论文的选题意义 | 第37页 |
| ·参考文献 | 第37-52页 |
| 第二章 简便合成磷酸基团修饰磁球固定金属离子用于磷酸肽段富集 | 第52-71页 |
| ·前言 | 第52-53页 |
| ·实验部分 | 第53-58页 |
| ·原料和试剂 | 第53-54页 |
| ·合成固定Zr~(4+)离子磁球 | 第54页 |
| ·表征固定Zr~(4+)离子磁球 | 第54-55页 |
| ·样品制备 | 第55页 |
| ·固定Zr~(4+)离子磁球选择性富集磷酸化肽段 | 第55-56页 |
| ·磷酸化和非磷酸化肽段富集后的回收率 | 第56页 |
| ·MALDI-TOF MS检测 | 第56-57页 |
| ·Nano-LC-ESI MS检测与数据处理 | 第57-58页 |
| ·结果与讨论 | 第58-67页 |
| ·固定Zr~(4+)离子磁球的合成与表征 | 第58-60页 |
| ·pH值对固定Zr~(4+)离子磁球富集选择性的影响 | 第60-62页 |
| ·固定Zr~(4+)离子磁球富集磷酸化肽段 | 第62-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| ·参考文献 | 第68-71页 |
| 第三章 新型核壳结构五氧化二钽磁球用于磷酸化肽段选择性富集 | 第71-85页 |
| ·前言 | 第71-72页 |
| ·实验部分 | 第72-76页 |
| ·原料和试剂 | 第72页 |
| ·合成Fe_3O_4@C@Ta_2O_5磁球 | 第72-73页 |
| ·表征Fe_3O_4@C@Ta_2O_5磁球 | 第73页 |
| ·样品制备 | 第73-74页 |
| ·Fe_3O_4@C@Ta_2O_5磁球选择性富集磷酸化肽段 | 第74页 |
| ·MALDI-TOF MS检测 | 第74-75页 |
| ·Nano-LC-ESI MS检测与数据处理 | 第75-76页 |
| ·结果与讨论 | 第76-81页 |
| ·Fe_3O_4@C@Ta_2O_5磁球的合成与表征 | 第76-77页 |
| ·Fe_3O_4@C@Ta_2O_5磁球富集磷酸化肽段 | 第77-79页 |
| ·Ta_2O_5和TiO_2磷酸化肽段富集效果比较 | 第79-81页 |
| ·本章小结 | 第81页 |
| ·参考文献 | 第81-85页 |
| 第四章 水热合成核壳结构二氧化锡磁球并用于磷酸化肽段选择性富集 | 第85-104页 |
| ·前言 | 第85-86页 |
| ·实验部分 | 第86-90页 |
| ·原料和试剂 | 第86页 |
| ·合成Fe_3O_4@C@SnO_2磁球 | 第86-87页 |
| ·表征Fe_3O_4@C@SnO_2磁球 | 第87页 |
| ·样品制备 | 第87-88页 |
| ·Fe_3O_4@C@SnO_2磁球选择性富集磷酸化肽段 | 第88页 |
| ·MALDI-TOF MS检测 | 第88-89页 |
| ·Nano-LC-ESI MS检测与数据处理 | 第89-90页 |
| ·结果与讨论 | 第90-99页 |
| ·Fe_3O_4@C@SnO_2磁球的合成与表征 | 第90-94页 |
| ·Fe_3O_4@C@SnO_2磁球富集磷酸化肽段 | 第94-95页 |
| ·SnO_2和TiO_2磷酸化肽段富集效果比较 | 第95-99页 |
| ·本章小结 | 第99页 |
| ·参考文献 | 第99-104页 |
| 第五章 合成硼酸修饰的核壳结构磁性金球并用于糖肽选择性富集 | 第104-117页 |
| ·前言 | 第104-105页 |
| ·实验部分 | 第105-108页 |
| ·原料和试剂 | 第105-106页 |
| ·样品制备 | 第106页 |
| ·合成金纳米粒子 | 第106页 |
| ·合成硼酸修饰的Fe_3O_4@C@Au磁球 | 第106-107页 |
| ·Fe_3O_4@C@Au磁球上硼酸固定量测定 | 第107页 |
| ·表征Fe_3O_4@C@Au磁球 | 第107页 |
| ·硼酸修饰Fe_3O_4@C@Au磁球富集糖蛋白和糖肽 | 第107-108页 |
| ·结果与讨论 | 第108-112页 |
| ·硼酸修饰Fe_3O_4@C@Au磁球的合成与表征 | 第108-111页 |
| ·硼酸修饰Fe_3O_4@C@Au磁球富集糖肽和糖蛋白 | 第111-112页 |
| ·本章小结 | 第112-113页 |
| ·参考文献 | 第113-117页 |
| 附表1 固定锆(Ⅳ)离子磁球从鼠脑蛋白酶解液中富集到得磷酸化肽段 | 第117-124页 |
| 附表2 五氧化二钽磁球从鼠肝蛋白酶解液中富集到的磷酸化肽段 | 第124-128页 |
| 附表3 二氧化钛磁球从鼠肝蛋白酶解液中富集到的磷酸化肽段 | 第128-132页 |
| 附表4 二氧化锡磁球从鼠肝蛋白酶解液中富集到的磷酸化肽段 | 第132-135页 |
| 在校期间所发表论文 | 第135-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
