摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
引言 | 第7-18页 |
·抗生素及其作用原理 | 第7-12页 |
·抗生素概述 | 第7页 |
·抗生素的作用原理 | 第7-8页 |
·抗生素的滥用及抗药性 | 第8-10页 |
·诺西肽(Nosiheptide)简介 | 第10-12页 |
·诺西肽的作用机理 | 第12页 |
·NSR(Nosiheptide Resistant Methlytransferase)背景简介 | 第12-16页 |
·rRNA甲基转移酶 | 第12-13页 |
·SAM | 第13-14页 |
·NSR | 第14-15页 |
·NSR蛋白初步分析 | 第15-16页 |
·课题研究的主要内容和意义 | 第16-18页 |
二材料与方法 | 第18-29页 |
·实验材料 | 第18-22页 |
·基因、酶类及纯化用材料 | 第18页 |
·常用试剂 | 第18页 |
·菌株 | 第18-19页 |
·载体 | 第19页 |
·常用缓冲液及自备试剂 | 第19-21页 |
·主要仪器设备 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-29页 |
·构建原核表达载体 | 第22-23页 |
·小量蛋白的表达及纯化 | 第23-24页 |
·大规模发酵提取蛋白 | 第24页 |
·TEV蛋白酶切 | 第24页 |
·蛋白的离子交换层析纯化 | 第24页 |
·蛋白的分子筛层析纯化 | 第24-25页 |
·蛋白的保存 | 第25页 |
·硒代甲硫氨酸标记蛋白质的表达 | 第25页 |
·蛋白的结晶 | 第25-26页 |
·蛋白结构的解析流程 | 第26页 |
·RNA合成及纯化与蛋白体外酶活的测定 | 第26-27页 |
·突变体基因的克隆的构建 | 第27-29页 |
三 结果与讨论 | 第29-45页 |
·表达与纯化结果 | 第29-31页 |
·结晶与结构解析结果 | 第31-35页 |
·整体结构描述 | 第35-38页 |
·NSR的SAM结合位点 | 第38-40页 |
·NSR-聚体界面 | 第40-41页 |
·NSR的N端RNA结合结构域 | 第41-45页 |
四 结论 | 第45-46页 |
五 参考文献 | 第46-49页 |
六 致谢 | 第49-50页 |
已发表文章 | 第50-51页 |