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活跃链霉菌中耐抗生素的rRNA甲基转移酶NSR的表达、纯化与结构研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
引言第7-18页
   ·抗生素及其作用原理第7-12页
     ·抗生素概述第7页
     ·抗生素的作用原理第7-8页
     ·抗生素的滥用及抗药性第8-10页
     ·诺西肽(Nosiheptide)简介第10-12页
     ·诺西肽的作用机理第12页
   ·NSR(Nosiheptide Resistant Methlytransferase)背景简介第12-16页
     ·rRNA甲基转移酶第12-13页
     ·SAM第13-14页
     ·NSR第14-15页
     ·NSR蛋白初步分析第15-16页
   ·课题研究的主要内容和意义第16-18页
二材料与方法第18-29页
     ·实验材料第18-22页
     ·基因、酶类及纯化用材料第18页
     ·常用试剂第18页
     ·菌株第18-19页
     ·载体第19页
     ·常用缓冲液及自备试剂第19-21页
     ·主要仪器设备第21-22页
   ·实验方法第22-29页
     ·构建原核表达载体第22-23页
     ·小量蛋白的表达及纯化第23-24页
     ·大规模发酵提取蛋白第24页
     ·TEV蛋白酶切第24页
     ·蛋白的离子交换层析纯化第24页
     ·蛋白的分子筛层析纯化第24-25页
     ·蛋白的保存第25页
     ·硒代甲硫氨酸标记蛋白质的表达第25页
     ·蛋白的结晶第25-26页
     ·蛋白结构的解析流程第26页
     ·RNA合成及纯化与蛋白体外酶活的测定第26-27页
     ·突变体基因的克隆的构建第27-29页
三 结果与讨论第29-45页
   ·表达与纯化结果第29-31页
   ·结晶与结构解析结果第31-35页
   ·整体结构描述第35-38页
   ·NSR的SAM结合位点第38-40页
   ·NSR-聚体界面第40-41页
   ·NSR的N端RNA结合结构域第41-45页
四 结论第45-46页
五 参考文献第46-49页
六 致谢第49-50页
已发表文章第50-51页

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