摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
前言 | 第10-26页 |
1. 乙型病毒性肝炎概述 | 第10-12页 |
1.1 乙型肝炎的传播 | 第11页 |
1.2 乙型肝炎病毒相关疾病 | 第11-12页 |
2. 乙型肝炎病毒概述 | 第12-20页 |
2.1 乙型肝炎病毒的基因组 | 第13-14页 |
2.2 乙型肝炎病毒主要的功能蛋白 | 第14-17页 |
2.3 乙型肝炎病毒的复制与转录调控 | 第17-20页 |
3. 类固醇激素受体辅激活子-3(SRC-3)概述 | 第20-24页 |
3.1 SRC-3的蛋白结构 | 第21-22页 |
3.2 SRC-3的基因定位及表达 | 第22-23页 |
3.3 SRC-3的功能和相关疾病 | 第23-24页 |
4. 立题背景 | 第24-26页 |
材料与方法 | 第26-42页 |
1. 实验材料 | 第26-28页 |
1.1 主要试剂及药品 | 第26-27页 |
1.2 主要设备及器材 | 第27页 |
1.3 细胞系 | 第27页 |
1.4 菌株 | 第27页 |
1.5 实验动物 | 第27-28页 |
1.6 质粒 | 第28页 |
2. 实验方法 | 第28-42页 |
2.1 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第28-29页 |
2.2 质粒转化感受态细胞 | 第29页 |
2.3 质粒的构建 | 第29-31页 |
2.4 质粒DNA的提取 | 第31-33页 |
2.5 动物组织基因组DNA提取 | 第33-34页 |
2.6 小鼠基因型鉴定(PCR法) | 第34-35页 |
2.7 细胞培养 | 第35页 |
2.8 细胞冻存与复苏 | 第35-36页 |
2.9 细胞转染 | 第36页 |
2.10 稳定转染细胞株的建立 | 第36页 |
2.11 蛋白提取与蛋白浓度的测定 | 第36-37页 |
2.12 蛋白质印记法 | 第37-38页 |
2.13 RNA的提取 | 第38-39页 |
2.14 逆转录cDNA | 第39页 |
2.15 实时荧光定量PCR | 第39-40页 |
2.16 荧光素酶报告基因实验 | 第40页 |
2.17 流体动力学注射(Hydrodynamic Injection) | 第40页 |
2.18 HBsAg和HBeAg的ELISA检测 | 第40-42页 |
结果与分析 | 第42-50页 |
1. SRC-3抑制HBV在小鼠体内表达 | 第42-43页 |
2. SRC-3抑制HBV在HepG2细胞中表达 | 第43-45页 |
3. 未发现SRC-3与细胞抗病毒机制的相关性 | 第45页 |
4. SRC-3通过增强PI3K-Akt信号通路抑制HBV表达 | 第45-47页 |
5. SRC-3抑制HBV的Akt下游分子初探 | 第47-50页 |
讨论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60页 |