| 摘要 | 第2-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 第1章 肿瘤淋巴管生成及其调控机制的研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1 淋巴管的结构 | 第14页 |
| 1.2 促淋巴管生长因子 | 第14-16页 |
| 1.3 淋巴管内皮细胞标记物 | 第16-17页 |
| 1.4 淋巴管生成的调控机制 | 第17-18页 |
| 1.5 肿瘤淋巴管生成的靶向治疗研究 | 第18页 |
| 1.6 问题及展望 | 第18-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 第3章 材料与方法 | 第22-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第22-27页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第22页 |
| 3.1.2 试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 药品 | 第23页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第23-24页 |
| 3.1.5 试剂的配制 | 第24-26页 |
| 3.1.6 壁虎粗多肽的提取 | 第26页 |
| 3.1.7 细胞培养及处理 | 第26-27页 |
| 3.2 GCPs对HLECs体外成管能力及迁移、侵袭的影响 | 第27-33页 |
| 3.2.1 GCPs组药物浓度的选定 | 第27-28页 |
| 3.2.2 GCP对人淋巴管内皮细胞(HLECs)体外管样结构形成的影响 | 第28页 |
| 3.2.3 GCP对HepG2细胞与HLECs体外共培养系统中HLECs成管能力的影响 | 第28-29页 |
| 3.2.4 GCPs对HLECs迁移及侵袭能力的影响 | 第29-30页 |
| 3.2.5 细胞免疫组化法检测GCPs作用后HLECs内VEGFR-3蛋白表达的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.6 qPCR法检测HLECs内VEGFR-3及SDF-1mRNA表达的变化 | 第31-32页 |
| 3.2.7 Westernblot法检测GCPs对HLECs内VEGFR-3及SDF-1蛋白表达的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 GCPs对HepG2细胞的影响 | 第33-36页 |
| 3.3.1 GCPs对HepG2细胞凋亡的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 GCPs对HepG2细胞迁移及侵袭能力的影响 | 第34-35页 |
| 3.3.3 细胞免疫组化法检测GCPs作用后HepG2细胞内淋巴管生成相关蛋白表达的变化 | 第35页 |
| 3.3.4 qPCR法检测GCPs对HepG2细胞内淋巴管生成分子相关mRNA表达的影响 | 第35-36页 |
| 3.3.5 Westernblot法检测GCPs对HepG2细胞内淋巴管生成相关蛋白表达的影响 | 第36页 |
| 3.4 VEGF-C及siVEGF-C质粒对HepG2细胞的影响 | 第36-39页 |
| 3.4.1 质粒的制备 | 第36页 |
| 3.4.2 细胞转染 | 第36页 |
| 3.4.3 RNA提取及mRNA表达水平的测定 | 第36-37页 |
| 3.4.4 蛋白表达的测定 | 第37页 |
| 3.4.5 MTT法检测对HepG2细胞增殖能力的影响 | 第37页 |
| 3.4.6 Hoechst33258荧光染色检测对HepG2细胞凋亡形态学变化的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.7 流式细胞术检测对HepG2细胞凋亡的影响 | 第38页 |
| 3.4.8 划痕实验检测对HepG2细胞划痕愈合能力的影响 | 第38页 |
| 3.4.9 Transwell迁移实验检测对HepG2细胞迁移能力的影响 | 第38页 |
| 3.4.10 Transwell侵袭实验检测对HepG2细胞侵袭能力的影响 | 第38-39页 |
| 3.5 统计学处理 | 第39-40页 |
| 第4章 结果 | 第40-70页 |
| 4.1 GCPs对HLECs体外成管及迁移、侵袭能力的影响 | 第40-46页 |
| 4.1.1 GCPs抑制HLECs的增殖 | 第40页 |
| 4.1.2 GCPs抑制HLECs的体外管样结构形成 | 第40-41页 |
| 4.1.3 GCPs抑制共培养系统中HLECs体外形成淋巴管的能力 | 第41-42页 |
| 4.1.4 GCPs抑制HLECs内VEGFR-3、SDF-1蛋白及mRNA的表达 | 第42-45页 |
| 4.1.5 GCPs抑制HLECs的迁移、侵袭能力 | 第45-46页 |
| 4.2 GCPs对HepG2细胞的影响 | 第46-55页 |
| 4.2.1 GCPs抑制HepG2细胞的增殖及促进HepG2细胞的凋亡 | 第46-48页 |
| 4.2.2 GCPs对HepG2细胞内淋巴管生成相关蛋白及mRNA表达的影响 | 第48-52页 |
| 4.2.3 GCPs对HepG2细胞迁移及侵袭能力的影响 | 第52-55页 |
| 4.3 VEGF-C对HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的影响 | 第55-61页 |
| 4.3.1 VEGF-C对HepG2细胞中VEGF-CmRNA和蛋白表达的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.2 VEGF-C促进HepG2细胞的增殖及抑制HepG2细胞的凋亡 | 第56-59页 |
| 4.3.3 VEGF-C促进HepG2细胞的迁移和侵袭 | 第59-61页 |
| 4.3.4 VEGF-C对HepG2细胞MAPKs及PI3K/Akt信号通路中相关蛋白磷酸化水平的影响 | 第61页 |
| 4.4 siVEGF-C对HepG2细胞增殖、迁移及侵袭的影响 | 第61-70页 |
| 4.4.1 siVEGF-C对VEGF-CmRNA和蛋白表达的表达 | 第61-63页 |
| 4.4.2 siVEGF-C1抑制HepG2细胞的增殖 | 第63页 |
| 4.4.3 siVEGF-C1促进HepG2细胞的凋亡 | 第63-65页 |
| 4.4.4 siVEGF-C1抑制HepG2细胞的迁移与侵袭 | 第65-68页 |
| 4.4.5 siVEGF-C1对HepG2细胞MAPKs及PI3K/Akt信号通路中相关蛋白磷酸化水平的影响 | 第68-70页 |
| 第5章 讨论 | 第70-76页 |
| 问题及展望 | 第74-76页 |
| 第6章 结论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-90页 |
| 缩略语词汇表 | 第90-92页 |
| 附录 | 第92-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第100-102页 |
