| 中文摘要 | 第1-15页 |
| Abstract | 第15-19页 |
| 1 引言 | 第19-42页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第19-20页 |
| ·PRRSV 生物学特性 | 第20-26页 |
| ·PRRSV 的分类地位 | 第20页 |
| ·PRRSV 的形态结构 | 第20页 |
| ·PRRSV 的基因组结构 | 第20-26页 |
| ·PRRSV 的非结构蛋白 | 第23-24页 |
| ·PRRSV 的结构蛋白 | 第24-26页 |
| ·PRRSV 免疫学与致病机制的研究进展 | 第26-29页 |
| ·体液免疫反应 | 第26-27页 |
| ·细胞免疫反应 | 第27-28页 |
| ·PRRSV 的致病机制 | 第28-29页 |
| ·病毒的细胞受体 | 第29-33页 |
| ·病毒受体的概述 | 第29页 |
| ·病毒侵入宿主细胞的过程 | 第29-30页 |
| ·鉴定受体的方法 | 第30-33页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒受体的研究进展 | 第33-40页 |
| ·细胞上的PRRSV 受体 | 第34-40页 |
| ·研究目的和意义 | 第40-42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-72页 |
| ·实验材料 | 第42-45页 |
| ·细胞、毒株和抗体 | 第42页 |
| ·实验动物 | 第42页 |
| ·主要试剂与药品 | 第42页 |
| ·载体和菌种 | 第42-44页 |
| ·主要试剂配制 | 第44页 |
| ·主要设备及仪器 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-72页 |
| ·细胞的培养及传代 | 第45-46页 |
| ·引物设计及合成 | 第46-48页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA） | 第48-49页 |
| ·阳性猪血清/单克隆抗体检测 | 第48页 |
| ·非肌肉肌球蛋白ⅡA 与PRRSV 的检测 | 第48-49页 |
| ·蛋白结合Marc-145 细胞的检测 | 第49页 |
| ·PRRS 病毒TCID_50的测定 | 第49-50页 |
| ·小鼠血清PRRSV 阻断实验 | 第50页 |
| ·细胞的收集 | 第50-51页 |
| ·PAM 细胞的收集 | 第50-51页 |
| ·Marc-145 细胞的收集 | 第51页 |
| ·总RNA 的提取 | 第51-53页 |
| ·目的基因的胶回收 | 第53-54页 |
| ·连接反应 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(DH5α/TOP10/ Rosetta) | 第54-55页 |
| ·大肠杆菌细胞（DH5α/TOP10/ Rosetta）的转化 | 第55页 |
| ·大肠杆菌中质粒的提取 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的PCR 鉴定 | 第56页 |
| ·重组质粒的构建及鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组pcDNA3.1/V5-His A-CD163 质粒的构建及鉴定 | 第56页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-Y-（P1, P2, P3, M1, M2, M3）的构建及鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组质粒pET-28a(+)-Y-（P1, P2, P3, M1, M2, M3）的构建及鉴定 | 第57页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的序列分析鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第59页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳分析 | 第59-60页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质样品的制备 | 第59页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质电泳（参照分子克隆实验指南操作）(萨姆布鲁克,2002) | 第59-60页 |
| ·诱导条件的筛选及优化 | 第60-61页 |
| ·重组蛋白的大量表达 | 第61页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第61-62页 |
| ·重组蛋白的复性 | 第62页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第62-63页 |
| ·免疫Balb/c 小鼠 | 第63页 |
| ·间接ELISA 检测方法的建立及判定标准 | 第63页 |
| ·间接ELISA 检测小鼠免疫后的抗体水平 | 第63页 |
| ·CD163 重组质粒的纯化、转染与其介导病毒结合能力的检测 | 第63-65页 |
| ·CD163 重组质粒转染后的稳定筛选 | 第65页 |
| ·非肌肉肌球蛋白ⅡA（NMHCⅡA）的提取 | 第65-70页 |
| ·Marc-145 细胞的传代 | 第65页 |
| ·Marc-145 细胞的收集 | 第65-66页 |
| ·免疫共沉淀（IP） | 第66-67页 |
| ·SDS-PAGE 检测 | 第67-68页 |
| ·Western Blot 检测 | 第68-69页 |
| ·非肌肉肌球蛋白ⅡA（NMHCⅡA）的纯化 | 第69-70页 |
| ·ELISA 方法检测蛋白之间的相互作用 | 第70-72页 |
| ·ELISA 检测蛋白之间相互作用的方法A | 第70页 |
| ·ELISA 检测蛋白之间相互作用的方法B | 第70-72页 |
| 3 结果与分析 | 第72-109页 |
| ·PAM 中CD163 全长基因的获得 | 第72页 |
| ·MARC-145 细胞中CD163 全长基因的获得 | 第72-73页 |
| ·CD163 结构和功能域的预测 | 第73-74页 |
| ·CD163 片段中SRCR 同源性的比较 | 第74-77页 |
| ·CD163 分段基因的获得 | 第77-78页 |
| ·全长CD163 真核表达载体的构建 | 第78-80页 |
| ·CD163 片段表达载体的构建 | 第80-84页 |
| ·CD163 片段真核表达载体的构建 | 第80-82页 |
| ·CD163 片段原核表达载体的构建 | 第82-84页 |
| ·CD163 片段蛋白的诱导表达及SDS-PAGE 检测 | 第84-85页 |
| ·间接ELISA 方法检测小鼠抗体水平及其效价 | 第85-87页 |
| ·CD163 分段蛋白结合MARC-145 细胞 | 第87-88页 |
| ·小鼠血清阻断PRRSV 感染宿主细胞 | 第88-89页 |
| ·非肌肉肌球蛋白ⅡA（NMHCⅡA）的提取及检测 | 第89-91页 |
| ·CD163 片段与NMHCⅡA 的相互作用 | 第91-101页 |
| ·Western Blot 检测 | 第91-92页 |
| ·ELISA 检测CD163 片段与各蛋白的相互作用 | 第92-101页 |
| ·CD163 各片段与PRA 蛋白的作用 | 第93页 |
| ·CD163 各片段与PRB 蛋白的作用 | 第93-96页 |
| ·CD163 各片段与非肌肉肌球蛋白ⅡA 蛋白的作用 | 第96-101页 |
| ·NMHCⅡA 与PRRSV 感染的关系 | 第101-103页 |
| ·全长CD163 介导病毒的感染 | 第103-105页 |
| ·转染CD163 细胞的稳定筛选 | 第105-106页 |
| ·分段CD163 介导病毒的感染 | 第106-108页 |
| ·全长CD163 和PRA 共转染介导病毒的感染 | 第108-109页 |
| 4 讨论 | 第109-113页 |
| 5 结论 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-125页 |
| 附录 | 第125-149页 |
| 致谢 | 第149-150页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第150-151页 |
| 博士学位论文内容简介及自评 | 第151页 |
