摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
文献综述 | 第9-21页 |
第一章 脑膜炎球菌疫苗研究进展 | 第9-12页 |
·多糖疫苗研究进展 | 第9-10页 |
·蛋白疫苗研究进展 | 第10-12页 |
第二章 脑膜炎球菌蛋白保护性抗原研究进展 | 第12-21页 |
·临床试验中的蛋白疫苗 | 第12-15页 |
·TbpB(Transferrin-binding protein B) | 第12页 |
·GNA1870(Genome-Derived Neisserial Antigen 1870) | 第12-13页 |
·NspA(neisserial surface protein A) | 第13页 |
·5CVMB 成员 | 第13-15页 |
·临床前研究蛋白 | 第15-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
试验部分 | 第21-80页 |
第三章 脑膜炎球菌蛋白抗原保守性的分析 | 第21-64页 |
·材料 | 第21页 |
·模板菌株 | 第21页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第21页 |
·主要仪器和设备 | 第21页 |
·常用溶液的配制 | 第21页 |
·实验内容与方法 | 第21-23页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第22-23页 |
·PCR 产物回收 | 第23页 |
·PCR 产物序列测定 | 第23页 |
·结果与分析 | 第23-63页 |
·讨论 | 第63-64页 |
第四章 脑膜炎球菌蛋白抗原的表达及纯化 | 第64-75页 |
·材料 | 第64-67页 |
·菌株和质粒 | 第64页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第64-65页 |
·主要仪器和设备 | 第65页 |
·常用溶液配方 | 第65-67页 |
·试验内容与方法 | 第67-71页 |
·引物设计 | 第67页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第67-68页 |
·目的基因和载体的酶切、连接及转化 | 第68-69页 |
·重组质粒的提取 | 第69页 |
·重组质粒的鉴定 | 第69页 |
·重组目的蛋白小量诱导表达 | 第69-70页 |
·重组目的蛋白的大量表达 | 第70页 |
·重组目的蛋白的纯化 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-74页 |
·目的基因的扩增 | 第71页 |
·重组质粒的构建 | 第71-72页 |
·重组质粒的序列分析 | 第72页 |
·重组目的蛋白的小量表达 | 第72-73页 |
·重组目的蛋白的大量表达及纯化 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-75页 |
第五章 重组目的蛋白的鉴定及免疫原性评价 | 第75-80页 |
·试验材料 | 第75-76页 |
·主要试剂 | 第75页 |
·主要设备 | 第75页 |
·试验动物 | 第75页 |
·常用溶液配方 | 第75-76页 |
·试验步骤 | 第76-77页 |
·Western blot 鉴定重组蛋白 | 第76页 |
·重组蛋白免疫Balb/c 小鼠 | 第76页 |
·ELISA 检测免疫血清抗体滴度 | 第76-77页 |
·Western blot 鉴定免疫血清的特异性 | 第77页 |
·结果与分析 | 第77-79页 |
·免疫印迹鉴定重组目的蛋白 | 第77页 |
·ELISA 检测重组目的蛋白免疫血清抗体滴度 | 第77-78页 |
·免疫印迹鉴定重组目的蛋白免疫血清的特异性 | 第78-79页 |
·讨论 | 第79-80页 |
结论 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-88页 |
英文缩写词表 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
作者简介 | 第90页 |