| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 甲型H1N1 流感病毒研究进展 | 第11-21页 |
| ·甲型H1N1 流感的病原学特征 | 第11-21页 |
| ·甲型H1N1 流感病毒的形态与结构 | 第11-12页 |
| ·甲型H1N1 流感病毒基因及其产物 | 第12-14页 |
| ·甲型H1N1 流感病毒的流行病学 | 第14-15页 |
| ·流感的流行情况回顾 | 第15-16页 |
| ·血凝素(Hemagglutinin，HA)与甲型流感病毒致病性的关系 | 第16-19页 |
| ·本试验研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二章 甲型H1N1 流感病毒血凝素基因HA 和HA1 真核载体的构建及其蛋白初步表达 | 第21-29页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·核酸序列、质粒、菌株和细胞株 | 第21页 |
| ·工具酶、试剂和仪器 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-24页 |
| ·H1N1-HA 全基因序列的获得与氨基酸序列分析 | 第22页 |
| ·HA 基因的密码子优化 | 第22页 |
| ·真核表达质粒的构建及制备 | 第22-23页 |
| ·BHK 细胞培养 | 第23页 |
| ·G418 最佳浓度的确定 | 第23页 |
| ·FuGENE?HD 介导的真核表达质粒转染和单克隆的筛选及培养 | 第23页 |
| ·间接免疫荧光检测HA 与HA1 基因在BHK 细胞的表达 | 第23页 |
| ·Western blot 检测Mod.HA 和Mod.HA1 在BHK 细胞中的表达 | 第23-24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·14 个最新H1N1-HA 氨基酸序列的同源性比较 | 第24页 |
| ·真核表达载体的酶切鉴定 | 第24-25页 |
| ·真核表达质粒序列测定 | 第25页 |
| ·稳定表达H1N1-HA 与H1N1-HA1 细胞系的建立 | 第25-26页 |
| ·间接免疫荧光与Western blot 检测 | 第26-27页 |
| ·讨论 | 第27-28页 |
| ·小结 | 第28-29页 |
| 第三章 甲型H1N1 流感病毒血凝素基因 HA1 的腺病毒包装 | 第29-38页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·腺病毒包装系统和细胞 | 第29页 |
| ·核酸序列及质粒和菌株 | 第29页 |
| ·工具酶、试剂和仪器 | 第29页 |
| ·H1N1-HA1 基因序列的获得与氨基酸序列分析 | 第29-30页 |
| ·HA1 基因的密码子优化 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-33页 |
| ·表达载体的构建和腺病毒包装 | 第30-32页 |
| ·重组腺病毒的传代和大量扩增 | 第32页 |
| ·重组腺病毒的鉴定 | 第32-33页 |
| ·结果 | 第33-36页 |
| ·真核表达质粒pDC315- Mod.HA1 的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·真核表达质粒pDC315- Mod. HA1 序列测定 | 第34页 |
| ·重组腺病毒在293 细胞中的典型病变 | 第34页 |
| ·重组腺病毒的鉴定结果 | 第34-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简介 | 第44页 |
