小麦品种陕253α-醇溶蛋白基因的克隆、原核表达及功能鉴定
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| ·小麦品质改良的研究现状 | 第12-14页 |
| ·化学诱变育种 | 第12页 |
| ·辐射诱变育种 | 第12-13页 |
| ·体细胞无性系变异 | 第13页 |
| ·外源DNA 导入 | 第13页 |
| ·有性杂交 | 第13页 |
| ·体细胞杂交 | 第13-14页 |
| ·转基因 | 第14页 |
| ·小麦贮藏蛋白的组成和分类 | 第14-15页 |
| ·小麦醇溶蛋白的研究进展 | 第15-19页 |
| ·小麦醇溶蛋白的染色体定位 | 第15-16页 |
| ·小麦醇溶蛋白的基因克隆 | 第16页 |
| ·小麦醇溶蛋白的氨基酸组成分析 | 第16-18页 |
| ·小麦醇溶蛋白与面粉品质的关系 | 第18-19页 |
| ·小麦贮藏蛋白亚基的体外功能研究 | 第19-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 小麦α-醇溶蛋白基因的克隆及序列分析 | 第22-33页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第22页 |
| ·仪器与设备 | 第22页 |
| ·常规培养基及溶液的配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-25页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第23页 |
| ·目的基因的扩增 | 第23页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第23-24页 |
| ·pGM-T 载体与目的基因的连接 | 第24页 |
| ·转化大肠杆菌DH5α | 第24页 |
| ·筛选阳性单克隆 | 第24-25页 |
| ·目的基因序列分析 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-32页 |
| ·α-醇溶蛋白基因编码区序列的克隆 | 第25-26页 |
| ·α-醇溶蛋白基因序列分析 | 第26-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 第三章 小麦α-醇溶蛋白基因的原核表达 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·菌株、质粒 | 第33页 |
| ·主要仪器与设备 | 第33页 |
| ·溶液的配制 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-37页 |
| ·相关质粒的提取 | 第34页 |
| ·目的片段两端加酶切位点PCR 扩增 | 第34-35页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第36-37页 |
| ·结果与分析 | 第37-40页 |
| ·目的片断的获得 | 第37页 |
| ·原核表达载体的构建和重组质粒的鉴定 | 第37-38页 |
| ·目的蛋白的诱导表达和初步分离 | 第38-39页 |
| ·表达产物的Western blot 分析 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 基因表达产物的纯化与功能鉴定 | 第41-45页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·植物材料 | 第41页 |
| ·菌株 | 第41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第41页 |
| ·溶液的配制 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-42页 |
| ·目的蛋白的大量制备和分离纯化 | 第41-42页 |
| ·配粉与粉质测定 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·目的蛋白的可溶性分析与纯化 | 第42-43页 |
| ·目的蛋白的功能鉴定 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第五章 讨论与结论 | 第45-49页 |
| ·α-醇溶蛋白基因的克隆与序列分析 | 第45页 |
| ·α-醇溶蛋白基因的原核表达及产物鉴定 | 第45-46页 |
| ·基因表达产物的体外功能鉴定 | 第46-47页 |
| ·结论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 缩略语 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
