| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 无脊椎动物先天免疫概述 | 第12-24页 |
| 一. 细胞免疫和体液免疫 | 第12-14页 |
| 1. 吞噬作用 | 第12页 |
| 2. 包囊与结节的形成 | 第12页 |
| 3. 胞吐作用 | 第12-13页 |
| 4. 酚氧化酶级联反应 | 第13页 |
| 5. 抗菌肽的表达 | 第13页 |
| 6. 凝集素 | 第13-14页 |
| 7. 免疫相关信号的激活 | 第14页 |
| 二、泛素化修饰与免疫应答 | 第14-17页 |
| 1. 泛素化过程 | 第14-15页 |
| 2. 泛素化在免疫中的功能 | 第15-17页 |
| 2.1. 泛素化修饰在Toll信号通路中的调控 | 第16页 |
| 2.2. 泛素化修饰在IMD信号通路中的调控 | 第16页 |
| 2.3. 泛素化修饰与抗病毒免疫 | 第16-17页 |
| 三、泛素连接酶Parkin的研究进展 | 第17-22页 |
| 1. E3的种类 | 第17页 |
| 2. Parkin的结构 | 第17-18页 |
| 3. Parkin的功能 | 第18-22页 |
| 3.1. Parkin与线粒体自噬 | 第18-19页 |
| 3.2. Parkin在神经性疾病保护方面的功能 | 第19-20页 |
| 3.3. Parkin介导其有害底物通过蛋白酶体途径的降解 | 第20页 |
| 3.4. Parkin介导的非降解信号转导 | 第20-21页 |
| 3.5. Parkin参与的自噬性免疫 | 第21-22页 |
| 四、本论文研究的目的与技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 泛素连接酶Parkin通过蛋白酶体和异体自噬途径介导对虾的抗病毒免疫反应 | 第24-48页 |
| 一、引言 | 第24-26页 |
| 二、材料与方法 | 第26-32页 |
| 1. 菌株,载体,试剂,仪器 | 第26页 |
| 2. 实验材料和免疫刺激 | 第26页 |
| 3. 基因克隆及序列分析 | 第26-27页 |
| 4. RNA的提取与cDNA的合成 | 第27页 |
| 5. 连接转化与筛选阳性克隆 | 第27页 |
| 6. 重组蛋白的表达与纯化 | 第27-28页 |
| 7. 实时定量PCR | 第28页 |
| 8. 基因组DNA的提取 | 第28-29页 |
| 9. Pull-down实验 | 第29页 |
| 10. SDS-PAGE及Western blot | 第29页 |
| 11. 免疫细胞化学 | 第29-30页 |
| 12. 体内RNA干扰及过表达实验 | 第30页 |
| 13. 免疫胶体金实验 | 第30页 |
| 14. 体外泛素化实验 | 第30-31页 |
| 15. 蛋白酶体途径与自噬途径的抑制试验 | 第31-32页 |
| 三、结果 | 第32-46页 |
| 1. sParkin的序列分析 | 第32-34页 |
| 2. sParkin的组织分布 | 第34页 |
| 3. WSSV感染对虾后sParkin会呈现出表达量上调的趋势 | 第34-35页 |
| 4. 干扰sParkin后能促进WSSV在体内的复制 | 第35-37页 |
| 5. 干扰sParkin后对虾的存活率降低而过表达sParkin后对虾存活率升高 | 第37-38页 |
| 6. rsParkin能与WSSV的囊膜蛋白VP19,VP24,VP26,VP28相结合,并主要通过rsParkin的UBQ结构域负责结合 | 第38-41页 |
| 7. rsParkin能够与WSSV病毒粒子相结合 | 第41-42页 |
| 8. sParkin能够在体外泛素化修饰VP19,VP24,VP26,VP28 | 第42-43页 |
| 9. WSSV的囊膜蛋白泛素化修饰后进入蛋白酶体降解 | 第43-44页 |
| 10. WSSV的囊膜蛋白泛素化修饰后进入自噬溶酶体途径降解 | 第44-46页 |
| 四、讨论 | 第46-48页 |
| 总结与创新点 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第57页 |
