摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 病原学特征 | 第12-13页 |
1.2 生活史 | 第13页 |
1.3 流行病学 | 第13-14页 |
1.4 牛泰勒虫病诊断方法研究进展 | 第14-18页 |
1.4.1 病原学诊断 | 第14-15页 |
1.4.2 血清学诊断 | 第15-16页 |
1.4.3 分子生物学诊断 | 第16-18页 |
1.5 研究内容与目的 | 第18-20页 |
第二章 靶基因的测序分析、引物和探针设计及质粒标准品的构建 | 第20-31页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 虫种和参考虫种信息 | 第20-21页 |
2.1.2 主要试剂 | 第21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-27页 |
2.2.1 牛泰勒虫ITS基因的序列比对及同源性分析 | 第21-22页 |
2.2.2 引物及探针的设计合成 | 第22-24页 |
2.2.3 全血基因组提取 | 第24页 |
2.2.4 质粒标准品的制备 | 第24-27页 |
2.3 结果与分析 | 第27-29页 |
2.3.1 牛泰勒虫ITS基因序列比对及进化分析 | 第27-29页 |
2.3.2 基因的扩增、克隆及测序 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-31页 |
第三章 实时荧光定量PCR方法的建立及评价 | 第31-40页 |
3.1 材料 | 第31页 |
3.2 方法 | 第31-32页 |
3.2.1 实时荧光定量PCR扩增 | 第31-32页 |
3.2.2 荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第32页 |
3.2.3 TaqMan探针荧光定量PCR方法的评价 | 第32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-38页 |
3.3.1 标准曲线的建立 | 第32-33页 |
3.3.2 特异性实验 | 第33-34页 |
3.3.3 敏感性实验 | 第34-36页 |
3.3.4 重复性实验 | 第36-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 我国部分地区牛泰勒虫荧光定量PCR检测 | 第40-45页 |
4.1 材料 | 第40页 |
4.1.1 样品来源 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第40页 |
4.2 实验方法 | 第40-41页 |
4.2.1 全血基因组提取 | 第40页 |
4.2.2 探针及引物的合成 | 第40-41页 |
4.2.3 普通PCR检测体系与程序 | 第41页 |
4.2.4 荧光定量PCR检测体系与程序 | 第41页 |
4.3 结果 | 第41-42页 |
4.3.1 牛泰勒虫普通PCR检测结果 | 第41-42页 |
4.3.2 牛泰勒虫实时荧光PCR检测结果 | 第42页 |
4.4 普通PCR结果和实时荧光PCR检测结果比较 | 第42-43页 |
4.5 讨论 | 第43-45页 |
第五章 全文结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
作者简历 | 第53页 |