摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
中英文缩写对照表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
1.1 热休克蛋白的简介 | 第13页 |
1.2 热休克蛋白70简介 | 第13-16页 |
1.3 HSP70的生物学功能 | 第16-17页 |
1.4 HSP70与分娩启动 | 第17-20页 |
1.5 HSPA1A和HSPA8的研究进展 | 第20-22页 |
1.6 PFT-μ 和LPS | 第22页 |
1.7 课题的目的与意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-43页 |
2.1 载体和菌株 | 第24页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.3 主要溶液的配制 | 第25-26页 |
2.4 PCR扩增产物的检测和回收 | 第26-27页 |
2.5 表达载体的构建及酶切回收 | 第27-31页 |
2.5.1 pMD18-T载体连接与转化 | 第27-28页 |
2.5.2 质粒的提取 | 第28-29页 |
2.5.3 重组表达质粒的构建 | 第29-30页 |
2.5.4 提取去内毒素重组表达质粒 | 第30-31页 |
2.6 细胞培养 | 第31-33页 |
2.6.1 细胞的复苏 | 第31页 |
2.6.2 细胞的常规培养 | 第31-32页 |
2.6.3 细胞冻存 | 第32-33页 |
2.7 细胞转染 | 第33页 |
2.8 细胞总RNA的提取 | 第33-34页 |
2.9 实时荧光定量分析 | 第34-37页 |
2.10 Western Blot试验步骤 | 第37-40页 |
2.10.1 蛋白提取 | 第37-38页 |
2.10.2 SDS-PAGE电泳 | 第38-39页 |
2.10.3 转膜 | 第39页 |
2.10.4 抗原抗体免疫反应 | 第39-40页 |
2.11 ELISA | 第40-41页 |
2.12 免疫组化过程 | 第41-42页 |
2.12.1 石蜡切片免疫组化试验步骤 | 第41-42页 |
2.12.2 活体试验的实施方案: | 第42页 |
2.13 主要数据库及分析软件 | 第42页 |
2.14 统计学分析 | 第42-43页 |
3 结果与分析 | 第43-52页 |
3.1 HSPA1A和HSPA8基因真核表达质粒的构建 | 第43页 |
3.2 HSPA1A和HSPA8转染WISH细胞超表达和干涉的效率 | 第43-46页 |
3.3 HSPA1A和HSPA8参与分娩启动的可能的信号通路和生物学过程 | 第46页 |
3.4 HSPA1A和HSPA8通过ERK1/2 调控雌激素受体 β(ESR2)的表达 | 第46-50页 |
3.5 HSPA1A在活体中诱导足月和早产分娩 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 HSPA1A和HSPA8刺激免疫炎症反应诱导分娩 | 第52-53页 |
4.2 HSPA1A和HSPA8增强雌激素响应诱导分娩 | 第53-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
6 本研究的创新之处 | 第57页 |
7 本研究的不足之处 | 第57页 |
8 进一步研究计划 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-69页 |
研究生在读期间发表的主要论文 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |