中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
前言 | 第15-18页 |
第一部分 乳腺癌组织中质/膜ERα与临床病理特征的关系 | 第18-35页 |
前言 | 第18页 |
材料和方法 | 第18-21页 |
一、材料 | 第18-19页 |
(一) 组织样本 | 第18-19页 |
(二) 主要试剂 | 第19页 |
(三) 主要仪器及设备 | 第19页 |
二、方法 | 第19-21页 |
(一) 免疫组化染色 | 第19-20页 |
(二) 免疫组化结果判定标准 | 第20页 |
(三) 统计学分析 | 第20-21页 |
结果 | 第21-27页 |
一、ERα免疫组化染色定位 | 第21页 |
二、质/膜ERα与临床病理特征之间的相关性 | 第21-26页 |
三、质/膜ERα与预后相关性分析 | 第26-27页 |
讨论 | 第27-30页 |
结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-35页 |
第二部分 人乳腺癌组织中ERα66、ERα36 mRNA和蛋白质表达与细胞定位的关系 | 第35-56页 |
前言 | 第35-36页 |
材料和方法 | 第36-42页 |
一、材料 | 第36-38页 |
(一) 组织样本 | 第36页 |
(二) 主要试剂 | 第36-37页 |
(三) 主要仪器及设备 | 第37-38页 |
二、方法 | 第38-42页 |
(一) q-PCR实验操作方法 | 第38-40页 |
(二) Western-blot实验操作方法 | 第40-41页 |
(三) 免疫组化染色方法 | 第41页 |
(四) 统计学分析 | 第41-42页 |
结果 | 第42-50页 |
一、ERα66和ERα36 mRNA表达 | 第42-45页 |
二、ERα66、ERα36 mRNA表达量与ERα蛋白细胞定位的关系 | 第45-47页 |
三、ERα36和ERα66蛋白表达 | 第47-50页 |
讨论 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
第三部分 人ERα36基因真核表达载体构建及ERα36在乳腺癌中作用机制的初步探讨 | 第56-77页 |
前言 | 第56-57页 |
材料和方法 | 第57-65页 |
一、材料 | 第57-59页 |
(一) 基因、载体及细胞 | 第57页 |
(二) 主要试剂 | 第57-58页 |
(三) 主要仪器及设备 | 第58-59页 |
二、方法 | 第59-65页 |
(一) pIRES2-EGFP-ERα36真核表达载体的构建 | 第59-63页 |
(二) pIRES2-EGFP-ERα36真核表达载体转染MCF-7细胞 | 第63页 |
(三) 转染后细胞收集及鉴定 | 第63-64页 |
(四) 转染后细胞蜡块制作及免疫组化染色 | 第64页 |
(五) Western-blot检测转染后细胞蛋白表达 | 第64-65页 |
结果 | 第65-71页 |
一、pIRES2-EGFP-ERα36真核表达载体的构建 | 第65-67页 |
二、pIRES2-EGFP-ERα36真核表达载体转染MCF-7细胞及鉴定 | 第67-69页 |
三、pIRES2-EGFP-ERα36转染后,免疫组化法检测细胞内蛋白表达的变化 | 第69-70页 |
四、pIRES2-EGFP-ERα36转染后,western-blot检测MCF-7细胞内HER-2及RARα蛋白表达的变化 | 第70-71页 |
讨论 | 第71-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-77页 |
展望 | 第77-78页 |
综述 | 第78-88页 |
参考文献 | 第83-88页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |