摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
·水稻白叶枯病菌致病性表达 | 第13页 |
·c-di-GMP 信号调节机制 | 第13-21页 |
·c-di-GMP 的合成和降解 | 第14-15页 |
·c-di-GMP 调控一系列表型特征 | 第15-17页 |
·c-di-GMP 信号通过与受体或效应蛋白的结合影响不同的细胞行为 | 第17-19页 |
·DGCs 和 PDEs 的感应结构域结合上游的环境信号来改变 c-di-GMP 的水平 | 第19页 |
·c-di-GMP 在细胞不同时期的分布 | 第19-20页 |
·水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 信号传导系统 | 第20-21页 |
·双组份信号传导系统 | 第21-25页 |
·TCS 的结构特征 | 第22页 |
·TCS 感应信号特征 | 第22-23页 |
·TCS 磷酸化 | 第23页 |
·TCS 与细菌的致病性紧密相关 | 第23-24页 |
·水稻白叶枯病菌中双组分系统 | 第24-25页 |
·本研究的目的意义和技术路线 | 第25-27页 |
第二章 双组份调控系统 PdeK/PdeR 调控 c-di-GMP 的代谢和水稻白叶枯病菌的毒性 | 第27-53页 |
·实验材料 | 第27-29页 |
·菌株、质粒和引物 | 第27-28页 |
·主要的试剂和仪器 | 第28页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第28-29页 |
·试验方法 | 第29-34页 |
·Xoo 基因组 DNA 的制备 | 第29页 |
·突变体及互补菌株的构建 | 第29-30页 |
·突变体表型测定 | 第30页 |
·qRT-PCR 检测 EPS 及毒性相关基因的表达 | 第30-31页 |
·酶活性检测 | 第31-33页 |
·酵母双杂交 | 第33-34页 |
·磷酸化对酶活的影响 | 第34页 |
·基因序列的生物信息学分析 | 第34页 |
·结果与分析 | 第34-51页 |
·PXO99A中 c-di-GMP 代谢相关蛋白分析 | 第34-36页 |
·PdeR 活性测定 | 第36-41页 |
·突变体及互补菌株的构建 | 第41-43页 |
·突变体及互补菌株表型检测 | 第43-46页 |
·qPCR 检测 EPS 相关基因表达 | 第46-47页 |
·qPCR 检测 T3SS 相关基因表达 | 第47-48页 |
·酵母双杂交检测 | 第48-50页 |
·PdeK 对 PdeR 酶活性的影响 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第三章 水稻白叶枯病菌 c-di-GMP 受体蛋白 PXO_00403 调控其毒性和过敏性反应 | 第53-69页 |
·实验材料 | 第53-54页 |
·菌株和质粒 | 第53页 |
·主要的生化试剂和仪器 | 第53页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第53-54页 |
·实验方法 | 第54-55页 |
·PXO_00403 突变体及互补菌株的构建 | 第54页 |
·突变体表型分析 | 第54-55页 |
·qRT-PCR 检测毒性相关基因的表达 | 第55页 |
·酶活性测定 | 第55页 |
·ITC 检测与 c-di-GMP 结合 | 第55页 |
·基因序列生物信息学分析 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-68页 |
·PXO_00403 突变体和互补菌株的构建 | 第55-58页 |
·突变体及互补菌株表型检测 | 第58-61页 |
·qPCR 检测 T3SS 相关基因表达 | 第61-62页 |
·PXO_00403 活性测定 | 第62-66页 |
·ITC 检测 PXO_00403 与 c-di-GMP 的结合 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-69页 |
第四章 水稻白叶枯病菌 GGDEF 结构域蛋白 PXO_00649 和 PXO_02615 功能鉴定 | 第69-79页 |
·实验材料 | 第69页 |
·菌株和质粒 | 第69页 |
·主要的生化试剂和仪器 | 第69页 |
·培养基和菌株培养条件 | 第69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·PXO_00649 和 PXO_02615 突变体及互补菌株的构建 | 第69-70页 |
·突变体表型分析 | 第70页 |
·qRT-PCR 检测毒性相关基因的表达 | 第70页 |
·酶活性测定 | 第70-71页 |
·基因序列生物信息学分析 | 第71页 |
·结果与分析 | 第71-78页 |
·PXO_02615 和 PXO_00649 生物信息学分析 | 第71-72页 |
·PXO_02615 和 PXO_00649 突变体和互补菌株的构建 | 第72-73页 |
·突变体及互补菌株表型检测 | 第73-76页 |
·PXO_02615 和 PXO_00649 蛋白表达 | 第76-78页 |
·讨论 | 第78-79页 |
第五章 全文结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-92页 |
附录 | 第92-103页 |
致谢 | 第103-104页 |
作者简历 | 第104页 |