| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-27页 |
| 1.1 微生物种间关系及其社会学行为特征 | 第13-19页 |
| 1.1.1 微生物的种间相互作用 | 第13-15页 |
| 1.1.2 微生物的社会学行为特征及群体感应 | 第15-19页 |
| 1.2 微生物种间相互作用及其对次级代谢产物的影响 | 第19-20页 |
| 1.3 微生物种间相互作用的研究方法——微生物共培养 | 第20-23页 |
| 1.3.1 微生物共培养 | 第20页 |
| 1.3.2 固体共培养和液体共培养 | 第20-22页 |
| 1.3.3 微生物共培养的主要问题和未来发展方向 | 第22-23页 |
| 1.4 小分子诱导物添加对微生物次级代谢产物的影响 | 第23-24页 |
| 1.5 现阶段相关研究主要存在的问题 | 第24页 |
| 1.6 本文的目的及意义及实验设计流程图 | 第24-27页 |
| 1.6.1 本文的目的及意义 | 第24-25页 |
| 1.6.2 实验设计流程图 | 第25-27页 |
| 第2章 液体共培养方法的建立及种间作用微生物的筛选 | 第27-45页 |
| 2.1 引言 | 第27页 |
| 2.2 实验材料 | 第27-31页 |
| 2.2.1 菌种和培养基 | 第27-28页 |
| 2.2.2 仪器和设备 | 第28-29页 |
| 2.2.3 试剂和耗材 | 第29-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-36页 |
| 2.3.1 辅助共培养微生物的选定 | 第31-32页 |
| 2.3.2 主要微生物及辅助微生物的活化 | 第32页 |
| 2.3.3 透析袋的准备 | 第32-33页 |
| 2.3.4 液体透析共培养 | 第33页 |
| 2.3.5 菌体粗提物的制备及薄层层析 | 第33-34页 |
| 2.3.6 埃博霉素产量测定方法 | 第34页 |
| 2.3.7 细菌的基因组DNA提取 | 第34-35页 |
| 2.3.8 DNA片段扩增及测序 | 第35-36页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第36-43页 |
| 2.4.1 液体共培养方法的建立及正效应微生物的筛选 | 第36-39页 |
| 2.4.2 正效应微生物的种属鉴定 | 第39-40页 |
| 2.4.3 粗提物的制备及对纤维堆囊菌合成埃博霉素的促进作用分析 | 第40-43页 |
| 2.5 本章小结 | 第43-45页 |
| 第3章 促进纤维堆囊菌产埃博霉素小分子诱导物的筛选 | 第45-51页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 3.2.1 菌种和培养基 | 第45页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第45页 |
| 3.2.3 试剂 | 第45-46页 |
| 3.3 实验方法 | 第46-47页 |
| 3.3.1 活化及接种发酵 | 第46页 |
| 3.3.2 埃博霉素产量测定方法 | 第46页 |
| 3.3.3 促进纤维堆囊菌产埃博霉素小分子物质的筛选 | 第46-47页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第47-49页 |
| 3.4.1 小分子物质的添加对菌体生长状态影响的表观评价 | 第47-48页 |
| 3.4.2 小分子物质的添加对埃博霉素产量的影响评价 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-51页 |
| 第4章 甲醇在埃博霉素产量提升中的效果评价 | 第51-59页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51页 |
| 4.2.1 菌种和培养基 | 第51页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第51页 |
| 4.2.3 试剂 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-52页 |
| 4.3.1 活化和发酵接种 | 第51页 |
| 4.3.2 埃博霉素产量测定 | 第51页 |
| 4.3.3 菌体干重测定方法 | 第51页 |
| 4.3.4 还原糖测定方法 | 第51-52页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第52-58页 |
| 4.4.1 甲醇最佳添加量实验 | 第52-53页 |
| 4.4.2 甲醇最佳添加时间实验 | 第53-54页 |
| 4.4.3 甲醇间歇补加诱导实验 | 第54-55页 |
| 4.4.4 甲醇添加对纤维堆囊菌生长代谢的影响及评价 | 第55-56页 |
| 4.4.5 诱导物添加对埃博霉素合成的影响 | 第56-58页 |
| 4.5 本章小结 | 第58-59页 |
| 第5章 甲醇对埃博霉素合成的体外诱导机制分析 | 第59-75页 |
| 5.1 引言 | 第59页 |
| 5.2 实验材料 | 第59页 |
| 5.2.1 菌株与培养基 | 第59页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第59页 |
| 5.2.3 试剂 | 第59页 |
| 5.2.4 试剂盒及专用材料 | 第59页 |
| 5.3 实验方法 | 第59-65页 |
| 5.3.1 活化与接种发酵 | 第59页 |
| 5.3.2 纤维堆囊菌RNA的提取 | 第59-61页 |
| 5.3.3 内参基因的引物设计及筛选 | 第61-62页 |
| 5.3.4 RT-qPCR所用基因的引物设计 | 第62-63页 |
| 5.3.5 反转录与RT-qPCR差异表达分析 | 第63-64页 |
| 5.3.6 cDNA文库的构建及RNA-seq高通量测序 | 第64-65页 |
| 5.3.7 基因表达差异分析流程 | 第65页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第65-74页 |
| 5.4.1 不同温度条件下候选内参基因的表达稳定性评价 | 第65-67页 |
| 5.4.2 反转录与代谢关键酶的RT-qPCR差异表达分析 | 第67-68页 |
| 5.4.3 空白组及添加甲醇组转录组测序比对初步分析 | 第68-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 全文总结与展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第87页 |
