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毛果杨PoptrHSFA4a基因功能验证研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 绪论第9-14页
    1.1 热激转录因子的研究背景第9-13页
        1.1.1 热激转录因子的起源第9页
        1.1.2 热激转录因子的结构及分类第9-10页
        1.1.3 热激转录因子与下游基因的相互作用第10-11页
        1.1.4 热激转录因子在非生物胁迫下的调控机理第11-13页
        1.1.5 热激转录因子的研究进展第13页
    1.2 研究目的及意义第13-14页
2 毛果杨中热激转录因子的生物信息学分析第14-29页
    2.1 实验材料第14页
        2.1.1 植物材料第14页
        2.1.2 主要试剂及试剂盒第14页
        2.1.3 溶液配制第14页
    2.2 实验方法第14-19页
        2.2.1 毛果杨、拟南芥和水稻的热激转录因子(HSFs)基因的获取及其鉴定第14-15页
        2.2.2 毛果杨、拟南芥和水稻的进化分析第15页
        2.2.3 毛果杨热激转录因子的染色体定位、内含子外显子预测和结构域预测第15页
        2.2.4 EST数字表达分析第15-17页
        2.2.5 RNA提取及qRT-PCR分析第17-19页
    2.3 结果和分析第19-28页
        2.3.1 对毛果杨的HSFs进化树分析和性能特征信息总结第19-21页
        2.3.2 毛果杨HSFs的染色体定位、基因结构示意图和保守区域的预测第21-24页
        2.3.3 HSFs的表达谱分析和毛果杨HSFs的qRT-PCR分析第24-28页
    2.4 本章小结第28-29页
3 毛果杨中HSFA4a基因的分析、克隆及表达载体构建第29-46页
    3.1 实验材料第29页
        3.1.1 菌株及载体第29页
        3.1.2 常用试剂及试剂盒第29页
        3.1.3 药品及培养基的配制第29页
    3.2 实验方法第29-31页
        3.2.1 PoptrHSFA4a基因的多重序列比对及其启动子分析第29页
        3.2.2 毛果杨DNA和RNA的提取及反转录第29-30页
        3.2.3 pBI121-PoptrHSFA4a-GFP亚细胞定位-DNA微弹的制备第30-31页
        3.2.4 构建Gateway表达载体的步骤第31页
    3.3 结果与分析第31-45页
        3.3.1 PoptrHSFA4a基因多序列比对及基因结构分析第31-34页
        3.3.2 PoptrHSFA4a启动子分析第34-37页
        3.3.3 毛果杨中HSFA4a基因的克隆第37-38页
        3.3.4 PoptrHSFA4a基因的过表达载体构建第38-41页
        3.3.5 获得PoptrHSFA4a抑制表达载体的构建第41-45页
    3.4 本章小结第45-46页
4 PoptrHSFA4过表达转拟南芥植株的获得及其功能验证第46-63页
    4.1 实验材料第46-47页
        4.1.1 植物材料第46页
        4.1.2 主要试剂第46页
        4.1.3 溶液配制第46-47页
    4.2 实验方法第47-49页
        4.2.1 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥的抗逆性分析第47页
        4.2.2 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥细胞受损情况研究第47页
        4.2.3 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥的生理指标测定第47-49页
        4.2.4 Zn胁迫下WT和转基因拟南芥Zinpyr荧光探针观察细胞吸收Zn的部位第49页
    4.3 结果与分析第49-61页
        4.3.1 转基因拟南芥的筛选与检测第49-51页
        4.3.2 高温、Zn胁迫下转基因PoptrHSFA4a拟南芥的抗逆能力分析第51-54页
        4.3.3 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥细胞受损情况研究第54-56页
        4.3.4 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥各项生理指标的研究第56-60页
        4.3.5 Zn胁迫下Zinpyr荧光探针观察细胞吸收Zn的部位第60-61页
    4.4 本章小结第61-63页
讨论第63-64页
结论第64-65页
参考文献第65-71页
附录第71-72页
攻读学位期间发表的学术论文第72-73页
致谢第73-74页

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