摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第9-14页 |
1.1 热激转录因子的研究背景 | 第9-13页 |
1.1.1 热激转录因子的起源 | 第9页 |
1.1.2 热激转录因子的结构及分类 | 第9-10页 |
1.1.3 热激转录因子与下游基因的相互作用 | 第10-11页 |
1.1.4 热激转录因子在非生物胁迫下的调控机理 | 第11-13页 |
1.1.5 热激转录因子的研究进展 | 第13页 |
1.2 研究目的及意义 | 第13-14页 |
2 毛果杨中热激转录因子的生物信息学分析 | 第14-29页 |
2.1 实验材料 | 第14页 |
2.1.1 植物材料 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第14页 |
2.1.3 溶液配制 | 第14页 |
2.2 实验方法 | 第14-19页 |
2.2.1 毛果杨、拟南芥和水稻的热激转录因子(HSFs)基因的获取及其鉴定 | 第14-15页 |
2.2.2 毛果杨、拟南芥和水稻的进化分析 | 第15页 |
2.2.3 毛果杨热激转录因子的染色体定位、内含子外显子预测和结构域预测 | 第15页 |
2.2.4 EST数字表达分析 | 第15-17页 |
2.2.5 RNA提取及qRT-PCR分析 | 第17-19页 |
2.3 结果和分析 | 第19-28页 |
2.3.1 对毛果杨的HSFs进化树分析和性能特征信息总结 | 第19-21页 |
2.3.2 毛果杨HSFs的染色体定位、基因结构示意图和保守区域的预测 | 第21-24页 |
2.3.3 HSFs的表达谱分析和毛果杨HSFs的qRT-PCR分析 | 第24-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
3 毛果杨中HSFA4a基因的分析、克隆及表达载体构建 | 第29-46页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 菌株及载体 | 第29页 |
3.1.2 常用试剂及试剂盒 | 第29页 |
3.1.3 药品及培养基的配制 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-31页 |
3.2.1 PoptrHSFA4a基因的多重序列比对及其启动子分析 | 第29页 |
3.2.2 毛果杨DNA和RNA的提取及反转录 | 第29-30页 |
3.2.3 pBI121-PoptrHSFA4a-GFP亚细胞定位-DNA微弹的制备 | 第30-31页 |
3.2.4 构建Gateway表达载体的步骤 | 第31页 |
3.3 结果与分析 | 第31-45页 |
3.3.1 PoptrHSFA4a基因多序列比对及基因结构分析 | 第31-34页 |
3.3.2 PoptrHSFA4a启动子分析 | 第34-37页 |
3.3.3 毛果杨中HSFA4a基因的克隆 | 第37-38页 |
3.3.4 PoptrHSFA4a基因的过表达载体构建 | 第38-41页 |
3.3.5 获得PoptrHSFA4a抑制表达载体的构建 | 第41-45页 |
3.4 本章小结 | 第45-46页 |
4 PoptrHSFA4过表达转拟南芥植株的获得及其功能验证 | 第46-63页 |
4.1 实验材料 | 第46-47页 |
4.1.1 植物材料 | 第46页 |
4.1.2 主要试剂 | 第46页 |
4.1.3 溶液配制 | 第46-47页 |
4.2 实验方法 | 第47-49页 |
4.2.1 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥的抗逆性分析 | 第47页 |
4.2.2 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥细胞受损情况研究 | 第47页 |
4.2.3 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥的生理指标测定 | 第47-49页 |
4.2.4 Zn胁迫下WT和转基因拟南芥Zinpyr荧光探针观察细胞吸收Zn的部位 | 第49页 |
4.3 结果与分析 | 第49-61页 |
4.3.1 转基因拟南芥的筛选与检测 | 第49-51页 |
4.3.2 高温、Zn胁迫下转基因PoptrHSFA4a拟南芥的抗逆能力分析 | 第51-54页 |
4.3.3 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥细胞受损情况研究 | 第54-56页 |
4.3.4 高温、Zn胁迫下转基因拟南芥各项生理指标的研究 | 第56-60页 |
4.3.5 Zn胁迫下Zinpyr荧光探针观察细胞吸收Zn的部位 | 第60-61页 |
4.4 本章小结 | 第61-63页 |
讨论 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
附录 | 第71-72页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第72-73页 |
致谢 | 第73-74页 |