摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
主要符号表 | 第13-14页 |
第一章 绪论 | 第14-19页 |
1.1 microRNA | 第14-15页 |
1.2 miR-21 | 第15页 |
1.3 FOXO1与糖尿病 | 第15-17页 |
1.4 研究内容 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-44页 |
2.1 材料 | 第19-26页 |
2.1.1 细胞株 | 第19页 |
2.1.2 实验动物 | 第19页 |
2.1.3 细菌菌株 | 第19页 |
2.1.4 质粒载体 | 第19-22页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第22页 |
2.1.6 主要试剂及耗材 | 第22-23页 |
2.1.7 实验中使用的引物序列 | 第23页 |
2.1.8 重组腺病毒 | 第23页 |
2.1.9 主要溶液配制 | 第23-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-44页 |
2.2.1 重组质粒的构建 | 第26-31页 |
2.2.2 双荧光素酶报告基因实验 | 第31-32页 |
2.2.3 重组腺病毒的浓缩及纯化 | 第32-34页 |
2.2.4 动物实验 | 第34-36页 |
2.2.5 Real-time PCR检测基因表达水平 | 第36-38页 |
2.2.6 TaqMan探针法检测miRNA表达水平 | 第38-40页 |
2.2.7 目标蛋白的蛋白印迹实验 | 第40-43页 |
2.2.8 实验数据处理 | 第43-44页 |
第三章 实验结果与分析 | 第44-52页 |
3.1 糖尿病小鼠和C57BL/6J对照小鼠差异表达miR-21 | 第44页 |
3.2 miR-21 在糖尿病中功能研究 | 第44-46页 |
3.2.1 腺病毒介导的过表达miR-21 改善糖尿病小鼠葡萄糖耐受 | 第44-45页 |
3.2.2 腺病毒介导的过表达miR-21 降低糖尿病小鼠饥饿血糖水平 | 第45-46页 |
3.2.3 腺病毒介导的miR-21 沉默恶化糖尿病表型 | 第46页 |
3.3 miR-21 调节血糖水平的分子机制研究 | 第46-52页 |
3.3.1 在db/db和HFD小鼠中糖异生基因的mRNA表达水平 | 第46-47页 |
3.3.2 miR-21 抑制Dex/Fsk诱导的原代肝细胞葡萄糖输出 | 第47-48页 |
3.3.3 腺病毒介导的过表达miR-21 抑制糖异生关键基因的表达 | 第48页 |
3.3.4 腺病毒介导的沉默mi R-21 促进糖异生关键基因的表达 | 第48-49页 |
3.3.5 miR-21 对胰岛素信号通路影响 | 第49-50页 |
3.3.6 miR-21 靶向FOXO1 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
附录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |