| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 前言 | 第10-14页 |
| 1 实验仪器、试剂及材料 | 第14-22页 |
| 1.1 细胞培养 | 第14页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第14-15页 |
| 1.3 主要试剂与实验材料 | 第15-17页 |
| 1.4 主要试剂配制方法 | 第17-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.1 MTT法检测细胞生存率 | 第22页 |
| 2.2 DAPI染色检测细胞核形态变化 | 第22-23页 |
| 2.3 PI染色法测定细胞的凋亡率 | 第23页 |
| 2.4 AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第23页 |
| 2.5 间接免疫荧光检测LC3的表达 | 第23-24页 |
| 2.6 吖啶橙染色检测自噬溶酶体 | 第24页 |
| 2.7 细胞转染及RNA干扰 | 第24-25页 |
| 2.8 RNA提取与RT-PCR | 第25-28页 |
| 2.9 Western-Blot检测蛋白表达量变化 | 第28-31页 |
| 2.10 统计学方法 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-48页 |
| 3.1 酒精对L02细胞生存率的影响 | 第32-33页 |
| 3.2 DAPI染色观察细胞核形态的变化 | 第33-34页 |
| 3.3 流式细胞术（Annexin V-FITC/PI双染法）检测酒精诱导L02细胞凋亡率 | 第34-35页 |
| 3.4 流式细胞术（PI单染）检测酒精对L02细胞周期及凋亡率的影响 | 第35-37页 |
| 3.5 吖啶橙染色观察酒精对L02细胞自噬溶酶体影响 | 第37-38页 |
| 3.6 吖啶橙染色流式细胞术检测酒精对L02细胞自噬溶酶体影响 | 第38-39页 |
| 3.7 间接免疫荧光法观察酒精对L02细胞LC-3 的影响 | 第39-40页 |
| 3.8 酒精对L02细胞自噬相关蛋白表达量的影响 | 第40-41页 |
| 3.9 siRNA载体的构建与表达检测 | 第41-44页 |
| 3.10 应用RNA干扰技术检测自噬在酒精诱导肝L02细胞凋亡中的作用 | 第44-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 文献综述 细胞凋亡、自噬及其与肝脏疾病关系 | 第54-77页 |
| 1 细胞凋亡 | 第54-57页 |
| 2 细胞自噬 | 第57页 |
| 3 自噬和凋亡的相关关系 | 第57-61页 |
| 4 细胞自噬和凋亡的交互作用机制 | 第61-64页 |
| 5 细胞凋亡、自噬与肝脏疾病关系 | 第64-66页 |
| 6 小结与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录 英文缩略词表 | 第77-79页 |
| 攻读学位期间科研情况 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
