| 摘要 | 第3-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 英文缩略词 | 第8-10页 |
| 第一章 引言 | 第10-20页 |
| 1.1 口蹄疫及其疫苗 | 第10-13页 |
| 1.1.1 口蹄疫概况 | 第10页 |
| 1.1.2 口蹄疫病毒 | 第10-11页 |
| 1.1.3 口蹄疫疫苗研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2 玉米及玉米转基因的研究 | 第13页 |
| 1.3 植物转基因技术研究 | 第13-16页 |
| 1.4 转基因植物疫苗存在问题及发展方向 | 第16-18页 |
| 1.5 转基因植物的生物安全问题 | 第18页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二章 口蹄疫病毒ASIA Ⅰ/HEBEI株目的基因P12A、3C的克隆及植物双元载体的构建 | 第20-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-26页 |
| 2.1.1 病毒与乳鼠 | 第20-21页 |
| 2.1.2 载体及主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 病毒增殖 | 第21页 |
| 2.1.4 病毒RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.1.5 P1-2A 3C基因(含两端非编码区)的克隆与鉴定 | 第22-24页 |
| 2.1.6 pGEM-Teasy--3C、P1-2A(编码区)质粒载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.1.7 pGEM-Teasy-P12A-3C(编码区)质粒载体的构建 | 第25页 |
| 2.1.8 pC1300-P12A-3C质粒载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.2 结果与分析 | 第26-29页 |
| 2.2.1 P1-2A、3C基因的PCR扩增与鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.2 质粒鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.3 目的基因P12A-3C的序列测序与分析 | 第28页 |
| 2.2.4 口蹄疫病毒P12A-3C基因植物表达载体的构建与分析 | 第28-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 密码子优化的口蹄疫病毒ASIA1.O型VP1植物表达双价载体的构建 | 第31-38页 |
| 3.1 材料和方法 | 第31-35页 |
| 3.1.1 质粒和菌株 | 第31-32页 |
| 3.1.2 引物和工具酶 | 第32页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第32页 |
| 3.1.5 基因改造与合成 | 第32-33页 |
| 3.1.6 pC1300-HW056-HW055质粒载体的构建 | 第33-35页 |
| 3.2 结果与分析 | 第35-36页 |
| 3.2.1 植物表达载体pC1300-HW055-HW056的构建与鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 讨论 | 第36-38页 |
| 第四章 饲草玉米亲本胚性愈伤材料的组织培养及目的基因的转化 | 第38-48页 |
| 4.1 材料和方法 | 第38-42页 |
| 4.1.1 载体 | 第38页 |
| 4.1.2 激素 | 第38-39页 |
| 4.1.3 抗生素 | 第39页 |
| 4.1.4 种子的准备和玉米田间管理 | 第39页 |
| 4.1.5 玉米胚性愈伤的培养 | 第39页 |
| 4.1.6 玉米愈伤组织的遗传转化 | 第39-41页 |
| 4.1.7 转基因植株的PCR检测 | 第41-42页 |
| 4.2 结果与分析 | 第42-46页 |
| 4.2.1 玉米愈伤组织材料的选择及培养 | 第42-44页 |
| 4.2.2 转基因植株的PCR检测 | 第44页 |
| 4.2.3 潮霉素对愈伤组织的筛选试验结果 | 第44-45页 |
| 4.2.4 矮壮素及生根粉在壮苗培养基中的使用对幼苗的影响 | 第45-46页 |
| 4.3 讨论 | 第46-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55-56页 |
| 附录1: P12A基因序及核苷酸序列比对图 | 第56-62页 |
| 附录2: 3C基因序及核苷酸序列比对图 | 第62-63页 |
