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核糖核酸酶A包含体高效复性方法的研究

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 文献综述第9-34页
    1.1 包含体蛋白质第9-13页
        1.1.1 包含体的特点第9-11页
        1.1.2 影响包含体蛋白质复性的关键因素第11-13页
    1.2 核糖核酸酶 A第13-18页
        1.2.1 核糖核酸酶 A 的结构第13-14页
        1.2.2 核糖核酸酶 A 的性质和用途第14-15页
        1.2.3 核糖核酸酶 A 复性研究的进展第15-18页
    1.3 蛋白质复性策略第18-33页
        1.3.1 基于变性剂去除的蛋白质复性策略第19-21页
        1.3.2 基于添加剂辅助的蛋白质复性策略第21-32页
        1.3.3 基于复性物理环境调控的蛋白质复性策略第32-33页
    1.4 本文的主要研究目的和内容第33-34页
第二章 新型氧化还原系统辅助核糖核酸酶 A 包含体复性第34-57页
    2.1 引言第34-35页
    2.2 实验材料和设备第35-38页
    2.3 实验方法第38-46页
        2.3.1 商品化核糖核酸酶 A 的变性第38页
        2.3.2 核糖核酸酶 A 包含体的制备第38-39页
        2.3.3 核糖核酸酶 A 包含体的溶解和变性第39页
        2.3.4 蛋白质浓度的测定(Bradford 法)第39-40页
        2.3.5 SDS-PAGE 电泳第40-41页
        2.3.6 氧化剂己酰胱胺(HCA)的制备第41-42页
        2.3.7 核糖核酸酶 A 的复性第42页
        2.3.8 重组核糖核酸酶 A 的纯化第42-43页
        2.3.9 核糖核酸酶 A 的酶活检测第43-45页
        2.3.10 核糖核酸酶 A 的酶催化动力学测定第45-46页
        2.3.11 圆二色光谱表征第46页
    2.4 结果与讨论第46-56页
        2.4.1 氧化还原系统 ArSH/HCA 的建立和优化第46-50页
        2.4.2 氧化还原系统 ArSH/HCA 的应用第50-54页
        2.4.3 核糖核酸酶 A 包含体复性产物的表征第54-56页
    2.5 本章小结第56-57页
第三章 同电荷介质辅助高浓度核糖核酸酶 A 包含体复性第57-69页
    3.1 引言第57-58页
    3.2 实验材料和设备第58-59页
    3.3 实验方法第59-61页
        3.3.1 同电荷介质的制备和表征第59-60页
        3.3.2 核糖核酸酶 A 包含体的溶解和变性第60页
        3.3.3 核糖核酸酶 A 包含体的复性第60-61页
        3.3.4 核糖核酸酶 A 的酶活检测第61页
    3.4 结果与讨论第61-67页
        3.4.1 高浓度核糖核酸酶 A 包含体的直接稀释复性第61-64页
        3.4.2 同电荷介质辅助高浓度核糖核酸酶 A 包含体复性第64-67页
    3.5 本章小结第67-69页
第四章 人工分子伴侣辅助高浓度核糖核酸酶 A 包含体复性和纯化第69-86页
    4.1 引言第69-70页
    4.2 实验材料和设备第70页
    4.3 实验方法第70-71页
        4.3.1 核糖核酸酶 A 包含体的溶解和变性第70页
        4.3.2 核糖核酸酶 A 包含体的复性第70-71页
        4.3.3 核糖核酸酶 A 复性溶液浊度的测定第71页
        4.3.4 核糖核酸酶 A 复性溶液成分的分析第71页
    4.4 结果与讨论第71-85页
        4.4.1 人工分子伴侣辅助高浓度核糖核酸酶 A 包含体复性第71-74页
        4.4.2 高脲浓度下人工分子伴侣的蛋白质纯化作用第74-81页
        4.4.3 低脲浓度下人工分子伴侣的蛋白质纯化作用第81-85页
    4.5 本章小结第85-86页
第五章 结论与展望第86-88页
    5.1 全文总结第86-87页
    5.2 创新点第87页
    5.3 对今后工作的建议与展望第87-88页
参考文献第88-103页
发表论文和科研情况说明第103-104页
附录一 实验中试剂配制方法第104-105页
附录二 Bradford 蛋白质标准曲线第105-106页
附录三 HCA 质谱鉴定结果第106-107页
附录四 核糖核酸酶 A 酶活标准曲线第107-108页
致谢第108页

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