| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语 | 第9-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 模式生物果蝇 | 第12-14页 |
| 1.2 膜泡运输 | 第14-15页 |
| 1.3 细胞自噬与线粒体动力学 | 第15-16页 |
| 1.4 SNARE蛋白参与膜泡融合 | 第16-17页 |
| 1.5 Sec22蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| 第一部分 EMS遗传筛选 | 第18-32页 |
| 2 材料 | 第18页 |
| 2.1 主要仪器与耗材 | 第18页 |
| 2.2 实验相关试剂配方 | 第18页 |
| 3 实验方法 | 第18-23页 |
| 3.1 果蝇的基本操作及诱变处理 | 第18-19页 |
| 3.2 平衡子和X染色体致死基因平衡系的建立 | 第19-20页 |
| 3.3 GAL4/UAS系统 | 第20页 |
| 3.4 FRT/FLP系统 | 第20-21页 |
| 3.5 重组嵌合体 | 第21页 |
| 3.6 MARCM技术 | 第21-22页 |
| 3.7 筛选处理过程 | 第22-23页 |
| 4 结果 | 第23-30页 |
| 4.1 影响果蝇细胞自噬基因的突变体筛选 | 第23-26页 |
| 4.2 影响果蝇细胞线粒体功能的突变体筛选 | 第26-28页 |
| 4.3 影响果蝇细胞内膜泡运输的突变体筛选 | 第28-30页 |
| 5 讨论 | 第30-31页 |
| 6 结论 | 第31-32页 |
| 第二部分 果蝇SNARE蛋白Sec22对细胞内膜泡运输的调节作用 | 第32-63页 |
| 2 材料与方法 | 第32-34页 |
| 2.1 仪器设备 | 第32页 |
| 2.2 耗材 | 第32-33页 |
| 2.3 电镜试剂 | 第33页 |
| 2.4 实验中用到的果蝇品系 | 第33-34页 |
| 3 实验方法 | 第34-44页 |
| 3.1 分子生物学实验 | 第34-39页 |
| 3.1.1 抽提果蝇基因组DNA | 第34-35页 |
| 3.1.2 多聚酶链式反应PCR | 第35-36页 |
| 3.1.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
| 3.1.4 DNA片段切胶回收 | 第37页 |
| 3.1.5 限制性内切酶切割DNA | 第37-39页 |
| 3.1.6 重组质粒转化感受态细胞 | 第39页 |
| 3.1.7 质粒DNA批量抽提 | 第39页 |
| 3.2 细胞实验 | 第39-40页 |
| 3.2.1 S2细胞培养 | 第39-40页 |
| 3.2.2 细胞传代 | 第40页 |
| 3.2.3 转染 | 第40页 |
| 3.3 生化实验 | 第40-42页 |
| 3.3.1 免疫共沉淀 | 第40-41页 |
| 3.3.2 Western blot检测 | 第41-42页 |
| 3.4 果蝇三龄幼虫脂肪体组织免疫荧光染色 | 第42页 |
| 3.5 透射电子显微镜样品制备 | 第42-44页 |
| 4 结果 | 第44-60页 |
| 4.1 EMS筛选到XEMJ143突变体的表型 | 第44-45页 |
| 4.2 XEMJ143突变品系Sec22基因发生突变 | 第45-48页 |
| 4.2.1 突变基因的定位 | 第45-47页 |
| 4.2.2 Sec22基因 | 第47-48页 |
| 4.3 Sec22突变体细胞自噬表型不明显 | 第48-50页 |
| 4.4 Sec22突变体内质网和高尔基体表型 | 第50-51页 |
| 4.5 Sec22与Syntaxin5 | 第51-53页 |
| 4.6 Sec22突变体的果蝇眼晴发育异常,细胞中内质网增生 | 第53-57页 |
| 4.7 Sec22与Syx5相互作用 | 第57-58页 |
| 4.8 在野生型中过表达Sec22基因无异常表型 | 第58-60页 |
| 5. 讨论 | 第60-62页 |
| 5.1 果蝇Sec22突变会影响生长发育 | 第60页 |
| 5.2 分泌途径中Sec22发挥重要作用 | 第60页 |
| 5.3 Sec22突变体未见明显的细胞自噬障碍 | 第60-61页 |
| 5.4 Sec22与Syx5在同一个蛋白复合体内发挥作用 | 第61-62页 |
| 6. 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 综述 | 第66-73页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 作者简历 | 第73页 |
