| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第17-36页 |
| 1 葱属植物活性物研究概况 | 第17-23页 |
| 2 藠头活性成分 | 第23页 |
| 3 藠头活性物的药理作用 | 第23-28页 |
| 3.1 抗菌消炎及杀虫作用 | 第24页 |
| 3.2 抗血小板聚集 | 第24页 |
| 3.3 抗氧化作用 | 第24-25页 |
| 3.4 降低血脂与胆固醇 | 第25页 |
| 3.5 缓解糖尿病 | 第25-26页 |
| 3.6 抗肿瘤作用 | 第26页 |
| 3.7 抑制环腺苷磷酸二酯酶活性作用 | 第26页 |
| 3.8 镇痛与耐缺氧 | 第26-27页 |
| 3.9 对心肌缺氧缺血及心肌损伤的保护作用 | 第27页 |
| 3.10 解痉平喘 | 第27页 |
| 3.11 其它作用 | 第27-28页 |
| 4 临床应用 | 第28页 |
| 5 立题依据、研究的目的与意义 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 缩略词表 | 第36-38页 |
| 第二章 藠头皂苷的提取、含量测定及提取条件优化 | 第38-54页 |
| 1 材料 | 第38-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第38页 |
| 1.2 药品与试剂 | 第38-39页 |
| 1.3 实验仪器 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-44页 |
| 2.1 ACS含量测定 | 第39-42页 |
| 2.1.1 ACS的提取流程 | 第39-40页 |
| 2.1.2 溶液的制备 | 第40-41页 |
| 2.1.3 香草醛-冰醋酸-硫酸比色法 | 第41页 |
| 2.1.4 测定波长的选择 | 第41页 |
| 2.1.5 显色稳定性 | 第41页 |
| 2.1.6 仪器精密度 | 第41页 |
| 2.1.7 线性关系测定 | 第41页 |
| 2.1.8 加样回收率 | 第41页 |
| 2.1.9 样品重复性 | 第41-42页 |
| 2.2 单因素实验 | 第42-43页 |
| 2.2.1 乙醇浓度 | 第42页 |
| 2.2.2 料液比 | 第42页 |
| 2.2.3 超声时间 | 第42页 |
| 2.2.4 提取温度 | 第42页 |
| 2.2.5 pH值 | 第42-43页 |
| 2.3 正交实验 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-50页 |
| 3.1 ACS含量的测定 | 第44-46页 |
| 3.1.1 最佳波长的确定 | 第44页 |
| 3.1.2 显色时间的影响 | 第44页 |
| 3.1.3 仪器精密度影响 | 第44-45页 |
| 3.1.4 标准曲线的绘制 | 第45页 |
| 3.1.5 加样回收率测定 | 第45-46页 |
| 3.1.6 样品重复性影响 | 第46页 |
| 3.2 单因素实验研究 | 第46-47页 |
| 3.2.1 乙醇浓度的影响 | 第46页 |
| 3.2.2 料液比的影响 | 第46-47页 |
| 3.2.3 超声时间的影响 | 第47页 |
| 3.2.4 提取温度的影响 | 第47页 |
| 3.2.5 pH值的影响 | 第47页 |
| 3.3 正交实验研究 | 第47-50页 |
| 3.3.1 正交实验设计 | 第47-50页 |
| 3.3.2 验证实验 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 第三章 藠头皂苷的分离纯化及结构鉴定 | 第54-71页 |
| 1 材料 | 第54-55页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第54-55页 |
| 1.2 实验仪器 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-57页 |
| 2.1 大孔吸附树脂纯化ACS | 第55-57页 |
| 2.1.1 大孔树脂的预处理与再生 | 第55页 |
| 2.1.2 装柱方法 | 第55-56页 |
| 2.1.3 不同型号大孔吸附树脂的静态吸附与解吸附 | 第56页 |
| 2.1.4 D_(101)大孔吸附树脂的解吸附时间 | 第56页 |
| 2.1.5 D_(101)大孔吸附树脂的动态吸附量 | 第56页 |
| 2.1.6 洗脱剂用量对树脂柱纯化ACS的研究 | 第56-57页 |
| 2.1.7 乙醇体积分数对树脂柱纯化ACS的比较 | 第57页 |
| 2.1.8 洗脱速度对树脂柱纯化ACS的研究 | 第57页 |
| 2.2 ACS的HPLC分离 | 第57页 |
| 2.3 ACS的质谱鉴定 | 第57页 |
| 3. 实验结果与分析 | 第57-69页 |
| 3.1 不同型号大孔吸附树脂的静态吸附与解吸附比较 | 第58页 |
| 3.2 解吸附时间对D_(101)大孔吸附树脂的影响 | 第58-59页 |
| 3.3 D_(101)大孔吸附树脂动态吸附量测定 | 第59页 |
| 3.4 洗脱剂用量对树脂柱纯化ACS的影响 | 第59-60页 |
| 3.5 乙醇体积分数对树脂柱纯化ACS的影响 | 第60-61页 |
| 3.6 洗脱速度对树脂柱纯化ACS的影响 | 第61页 |
| 3.7 ACS的HPLC分离检测 | 第61-62页 |
| 3.8 ACS的质谱数据分析 | 第62-69页 |
| 4 讨论 | 第69页 |
| 参考文献 | 第69-71页 |
| 第四章 藠头皂苷抗菌活性及机理研究 | 第71-84页 |
| 1 材料 | 第71-72页 |
| 1.1 实验试剂 | 第71页 |
| 1.2 实验仪器 | 第71-72页 |
| 1.3 实验菌种 | 第72页 |
| 1.4 培养基及培养基配方 | 第72页 |
| 2 实验方法 | 第72-73页 |
| 2.1 菌种的活化 | 第72页 |
| 2.2 滤纸片法测定ACS对菌的抑菌活性 | 第72页 |
| 2.3 生长曲线测定 | 第72页 |
| 2.4 ACS对不同菌最低抑菌浓度的测定 | 第72-73页 |
| 2.5 DNS法测定ACS对不同菌利用葡萄糖的差异 | 第73页 |
| 2.6 ACS对不同菌总蛋白含量影响及SDS-PAGE电泳 | 第73页 |
| 2.7 ACS对不同菌CAT酶活的影响 | 第73页 |
| 3 实验结果与分析 | 第73-78页 |
| 3.1 不同浓度的皂苷液对不同菌的抑菌活性的影响 | 第73页 |
| 3.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第73-74页 |
| 3.3 ACS对不同菌生长速率的影响 | 第74-76页 |
| 3.4 ACS对不同菌利用葡萄糖的影响 | 第76页 |
| 3.5 ACS对不同菌总蛋白含量及表达的影响 | 第76-78页 |
| 3.6 ACS对不同菌CAT酶活的抑制 | 第78页 |
| 4 讨论 | 第78-82页 |
| 参考文献 | 第82-84页 |
| 第五章 藠头皂苷抗肿瘤活性及机理研究 | 第84-134页 |
| 1 材料 | 第85-87页 |
| 1.1 药品与试剂 | 第85-86页 |
| 1.2 实验仪器 | 第86-87页 |
| 1.3 肿瘤细胞株 | 第87页 |
| 1.4 实验动物 | 第87页 |
| 1.5 瘤源动物 | 第87页 |
| 2 实验方法 | 第87-101页 |
| 2.1 ACS体外抗肿瘤实验 | 第87-100页 |
| 2.1.1 药品配制 | 第87-88页 |
| 2.1.2 细胞复苏与培养 | 第88页 |
| 2.1.3 细胞传代 | 第88-89页 |
| 2.1.4 细胞冻存 | 第89页 |
| 2.1.5 细胞计数 | 第89页 |
| 2.1.6 倒置显微镜观察肿瘤细胞凋亡 | 第89-90页 |
| 2.1.7 Gimsa染色-油镜下观察肿瘤细胞凋亡 | 第90页 |
| 2.1.8 HE染色观察肿瘤细胞凋亡 | 第90页 |
| 2.1.9 AO/EB双染色检测细胞凋亡 | 第90-91页 |
| 2.1.10 台盼兰染色测定细胞生长曲线 | 第91页 |
| 2.1.11 激光共聚焦显微镜观察ACS对细胞核的影响 | 第91-92页 |
| 2.1.12 激光共聚焦显微镜观察ACS对细胞骨架的影响 | 第92页 |
| 2.1.13 ACS对线粒体膜电位(△Ψm)变化的检测 | 第92页 |
| 2.1.14 平板集落形成法测定细胞集落形成 | 第92-93页 |
| 2.1.15 MTT法测定ACS对细胞活性的影响 | 第93页 |
| 2.1.16 划痕法测定细胞迁移能力 | 第93-94页 |
| 2.1.17 CAT活性测定 | 第94-95页 |
| 2.1.18 DNA Ladder琼脂糖凝胶电泳 | 第95-96页 |
| 2.1.19 Caspase-3的western blotting检测 | 第96-100页 |
| 2.1.20 流式细胞仪检测ACS对细胞凋亡周期的影响 | 第100页 |
| 2.2 ACS体内抗肿瘤实验 | 第100-101页 |
| 2.2.1 小鼠B16黑色素瘤模型构建 | 第100-101页 |
| 2.2.2 动物分组 | 第101页 |
| 2.2.3 给药方法 | 第101页 |
| 2.2.4 脾脏指数测定 | 第101页 |
| 2.2.5 肝脏指数测定 | 第101页 |
| 3 实验结果与分析 | 第101-129页 |
| 3.1 体内抗肿瘤实验 | 第101-125页 |
| 3.1.1 倒置显微镜观察肿瘤细胞凋亡情况 | 第102页 |
| 3.1.2 Gimsa染色-油镜下观察肿瘤细胞凋亡情况 | 第102页 |
| 3.1.4 AO/EB双染色观察肿瘤细胞凋亡情况 | 第102-106页 |
| 3.1.5 ACS对肿瘤细胞生长速率的影响 | 第106-107页 |
| 3.1.6 ACS对细胞核的影响 | 第107页 |
| 3.1.7 ACS对细胞骨架的影响 | 第107-112页 |
| 3.1.8 ACS对线粒体膜电位(△Ψm)变化的影响 | 第112页 |
| 3.1.9 ACS对细胞集落形成的抑制作用 | 第112-117页 |
| 3.1.10 ACS对细胞活性的影响 | 第117页 |
| 3.1.11 ACS对细胞迁移能力的影响 | 第117-120页 |
| 3.1.12 ACS对细胞CAT活性的抑制作用 | 第120-121页 |
| 3.1.13 ACS对细胞DNA损伤的影响 | 第121-122页 |
| 3.1.14 ACS对凋亡蛋白Caspase-3表达的影响 | 第122-123页 |
| 3.1.15 ACS对细胞凋亡周期的影响 | 第123-125页 |
| 3.2 体内抗肿瘤实验 | 第125-129页 |
| 3.2.1 ACS对小鼠体重、肿瘤指数及抑瘤率的影响 | 第125-128页 |
| 3.2.2 ACS对小鼠脾脏指数的影响 | 第128页 |
| 3.2.3 ACS对小鼠肝脏指数的影响 | 第128-129页 |
| 4 讨论 | 第129-132页 |
| 参考文献 | 第132-134页 |
| 结论 | 第134-136页 |
| 展望 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 攻读硕士学位期间撰写和发表的的相关学术论文 | 第138-139页 |
| 课题受资助的基金项目 | 第139-140页 |
