| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-29页 |
| 1 炎症 | 第15-21页 |
| 1.1 炎症简介 | 第15页 |
| 1.2 炎症介质 | 第15-17页 |
| 1.2.1 一氧化氮 | 第16页 |
| 1.2.2 细胞因子 | 第16-17页 |
| 1.3 炎症反应中的MAPK和NF-κB信号通路 | 第17-20页 |
| 1.3.1 MAPKs（Mitogen-activated protein kinase）信号转导通路 | 第17-18页 |
| 1.3.2 NF-κB（Nuclear factor kappa B）信号转导通路 | 第18-20页 |
| 1.4 炎症研究的常用模型 | 第20-21页 |
| 1.4.1 体外炎症模型 | 第20-21页 |
| 1.4.2 体内炎症模型 | 第21页 |
| 2 化橘红研究进展 | 第21-24页 |
| 2.1 化橘红简介 | 第21-22页 |
| 2.2 化橘红主要有效成分 | 第22-23页 |
| 2.2.1 黄酮类 | 第22页 |
| 2.2.2 多糖类 | 第22页 |
| 2.2.3 挥发油类 | 第22-23页 |
| 2.2.4 其他成分 | 第23页 |
| 2.3 化橘红生物活性研究进展 | 第23-24页 |
| 2.3.1 抗炎活性 | 第23页 |
| 2.3.2 抗氧化活性 | 第23-24页 |
| 2.3.3 免疫调节 | 第24页 |
| 2.3.4 其他活性 | 第24页 |
| 3 黄酮类抗炎研究进展 | 第24-27页 |
| 3.1 黄酮的研究概况 | 第24-26页 |
| 3.1.1 黄酮的提取方法 | 第25页 |
| 3.1.2 黄酮的分离纯化方法 | 第25-26页 |
| 3.2 黄酮类抗炎活性研究概况 | 第26-27页 |
| 3.2.1 黄酮类抗炎活性的体外研究 | 第26-27页 |
| 3.2.2 黄酮类抗炎活性的体内研究 | 第27页 |
| 4 课题研究的内容与意义 | 第27-29页 |
| 第二章 化橘红黄酮的提取纯化及成分分析 | 第29-43页 |
| 1 引言 | 第29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-34页 |
| 2.2.1 原材料预处理 | 第30页 |
| 2.2.2 化橘红黄酮的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.3 化橘红黄酮的纯化 | 第31页 |
| 2.2.4 分光光度法测定化橘红总黄酮 | 第31-32页 |
| 2.2.4.1 芦丁标准曲线的绘制 | 第31页 |
| 2.2.4.2 化橘红黄酮纯化前的含量测定 | 第31-32页 |
| 2.2.4.3 化橘红黄酮纯化后的含量测定 | 第32页 |
| 2.2.5 HPLC法测定化橘红柚皮苷含量 | 第32-33页 |
| 2.2.5.1 柚皮苷标准曲线的绘制 | 第32页 |
| 2.2.5.2 样品中柚皮苷的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.5.3 精密度及稳定性试验 | 第33页 |
| 2.2.5.4 重复性试验 | 第33页 |
| 2.2.6 化橘红黄酮的UPLC-Q-TOF-MS/MS分析 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.1 化橘红总黄酮含量 | 第34页 |
| 3.2 化橘红柚皮苷含量 | 第34-37页 |
| 3.2.1 柚皮苷标准曲线 | 第34-35页 |
| 3.2.2 化橘红柚皮苷含量测定 | 第35-36页 |
| 3.2.3 精密度实验 | 第36页 |
| 3.2.4 稳定性实验 | 第36-37页 |
| 3.2.5 重复性实验 | 第37页 |
| 3.3 化橘红黄酮UPLC-Q-TOF-MS/MS分析 | 第37-41页 |
| 3.3.1 化橘红黄酮UPLC测定结果 | 第37-38页 |
| 3.3.2 化橘红黄酮UPLC-Q-TOF-MS分析结果 | 第38-41页 |
| 4 讨论 | 第41-42页 |
| 5 小结 | 第42-43页 |
| 第三章 化橘红黄酮对LPS诱导的RAW264.7 细胞炎症因子的影响 | 第43-66页 |
| 1 引言 | 第43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第43-46页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第44-45页 |
| 2.1.3 主要药品和试剂配制 | 第45-46页 |
| 2.1.3.1 胎牛血清的灭活 | 第45页 |
| 2.1.3.2 RAW264.7 细胞完全培养液 | 第45页 |
| 2.1.3.3 PBS磷酸盐缓冲液 | 第45页 |
| 2.1.3.4 MTT(5mg/mL储存液) | 第45-46页 |
| 2.1.3.5 LPS(储存液) | 第46页 |
| 2.1.3.6 Griess试剂 | 第46页 |
| 2.2 实验方法 | 第46-53页 |
| 2.2.1 RAW264.7 细胞的培养 | 第46-47页 |
| 2.2.2 MTT法测定LPS及化橘红黄酮对小鼠RAW264.7 细胞存活率的影响 | 第47-48页 |
| 2.2.3 Griess法测定RAW264.7 细胞中的NO分泌量 | 第48-49页 |
| 2.2.4 光学显微镜对RAW264.7 细胞的形态观察 | 第49页 |
| 2.2.5 不同作用模式下FECG对RAW264.7 细胞NO分泌量的影响 | 第49-50页 |
| 2.2.6 不同作用时间下FECG对RAW264.7 细胞NO分泌量的影响 | 第50页 |
| 2.2.7 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞中NOS活力的影响 | 第50-51页 |
| 2.2.8 Elisa测定化橘红黄酮对RAW264.7 细胞中TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10蛋白浓度的影响 | 第51-53页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-63页 |
| 3.1 化橘红黄酮的细胞毒性评价 | 第53-54页 |
| 3.2 NO标准曲线的绘制 | 第54页 |
| 3.3 LPS作用浓度探究 | 第54-55页 |
| 3.4 RAW264.7 细胞形态的光学显微镜观察 | 第55-56页 |
| 3.5 不同作用模式下化橘红黄酮对细胞NO分泌量的影响 | 第56-57页 |
| 3.6 不同作用时间下化橘红黄酮对细胞NO分泌量的影响 | 第57-58页 |
| 3.7 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞NOS酶活力的影响 | 第58-59页 |
| 3.8 化橘红黄酮对细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 蛋白表达的影响 | 第59-63页 |
| 3.8.1 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞TNF-α蛋白浓度的影响 | 第59-60页 |
| 3.8.2 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞IL-1β蛋白浓度的影响 | 第60-61页 |
| 3.8.3 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞IL-6 蛋白浓度的影响 | 第61-62页 |
| 3.8.4 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞IL-10 蛋白浓度的影响 | 第62-63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 5 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 化橘红黄酮对MAPK、NF-kB信号通路的影响 | 第66-85页 |
| 1 引言 | 第66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-76页 |
| 2.1 实验材料 | 第66-69页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第66-68页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第68-69页 |
| 2.2 实验方法 | 第69-76页 |
| 2.2.1 qRT-PCR测定化橘红黄酮对TNF-a、IL-1β、IL-6、IL-10 mRNA转录的影响 | 第69-71页 |
| 2.2.2 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞MAPK、NF-kB蛋白表达的影响 | 第71-75页 |
| 2.2.2.1 RAW264.7 细胞药物处理 | 第71-72页 |
| 2.2.2.2 RAW264.7 细胞总蛋白的提取 | 第72页 |
| 2.2.2.3 RAW264.7 细胞蛋白浓度的测定 | 第72页 |
| 2.2.2.4 RAW264.7 细胞蛋白的电泳 | 第72-74页 |
| 2.2.2.5 细胞蛋白的免疫印迹显色（ECL显色系统） | 第74-75页 |
| 2.2.2.6 分析结果 | 第75页 |
| 2.2.3 细胞免疫荧光法观察NF-kB p65的核转移 | 第75-76页 |
| 2.2.4 统计学分析 | 第76页 |
| 3 结果与分析 | 第76-82页 |
| 3.1 化橘红黄酮对TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10 等mRNA转录的影响 | 第76-78页 |
| 3.2 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞中MAPK信号通路的影响 | 第78-80页 |
| 3.3 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞中NF-kB信号通路的影响 | 第80-81页 |
| 3.4 化橘红黄酮对RAW264.7 细胞中NF-kB p65核转移的影响 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-84页 |
| 5 小结 | 第84-85页 |
| 第五章 结论与展望 | 第85-88页 |
| 1 主要结论 | 第85-86页 |
| 2 展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-98页 |
| 附录 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
