摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
1 前言 | 第14-26页 |
1.1 研究问题由来 | 第14页 |
1.2 文献综述 | 第14-25页 |
1.2.1 猪胚胎附植和胎盘发育是影响母猪繁殖性状的重要因素 | 第14-16页 |
1.2.2 猪胚胎在附植前形态的快速变化是胚胎附植的前提 | 第16-17页 |
1.2.3 猪胚胎附植机制的研究进展 | 第17-20页 |
1.2.4 猪胎盘形成和发育机制的研究进展 | 第20-22页 |
1.2.5 胎盘滋养层细胞特异表达基因对胎盘功能的影响 | 第22-24页 |
1.2.6 PLET1基因的研究进展 | 第24-25页 |
1.3 研究的目的与意义 | 第25-26页 |
2 材料方法 | 第26-44页 |
2.1 本研究的技术路线 | 第26页 |
2.2 材料 | 第26-30页 |
2.2.1 样品 | 第26-27页 |
2.2.2 菌株和载体 | 第27-28页 |
2.2.3 试验所用细胞系及实验动物 | 第28页 |
2.2.4 主要培养基 | 第28-29页 |
2.2.5 主要仪器设备 | 第29页 |
2.2.6 主要试剂 | 第29页 |
2.2.7 主要试剂的配制 | 第29-30页 |
2.3 主要分子生物学软件和网站 | 第30页 |
2.3.1 主要分子生物学软件 | 第30页 |
2.3.2 主要生物学网站和数据库 | 第30页 |
2.4 试验方法 | 第30-44页 |
2.4.1 RNA提取及芯片杂交 | 第30页 |
2.4.2 芯片数据的处理及分析 | 第30-31页 |
2.4.3 组织总RNA提取及反转录 | 第31页 |
2.4.4 荧光定量PCR检测及数据分析 | 第31-32页 |
2.4.5 体外受精、体细胞核移植及孤雌激活胚胎的获得 | 第32页 |
2.4.6 石蜡组织切片制作 | 第32页 |
2.4.7 RNA原位杂交 | 第32-34页 |
2.4.8 HE染色 | 第34-35页 |
2.4.9 石蜡切片的免疫组织化学及免疫荧光 | 第35-36页 |
2.4.10 3′RACE及序列分析 | 第36-38页 |
2.4.11 蛋白质的提取及糖基化检测 | 第38-39页 |
2.4.12 细胞转染及双荧光素酶活性测定 | 第39-43页 |
2.4.13 Plet1敲除小鼠的构建 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-73页 |
3.1 梅山猪和大白猪附植前期球状和线状孕体中差异表达基因的筛选及分析 | 第44-50页 |
3.1.1 差异表达基因筛选及聚类分析 | 第44-45页 |
3.1.2 两个品种猪胚胎差异表达基因的表达模式分析 | 第45-46页 |
3.1.3 两个品种猪差异表达基因所涉及的功能及信号通路的比较分析 | 第46-49页 |
3.1.4 差异表达基因的验证 | 第49-50页 |
3.2 猪PLET1基因表达调控及功能的初步研究 | 第50-73页 |
3.2.1 猪PLET1的表达调控研究 | 第50-66页 |
3.2.2 利用小鼠模型检测plet1对胎盘发育的作用 | 第66-73页 |
4 讨论 | 第73-81页 |
4.1 关于猪不同形态孕体中差异表达基因及其信号通路在胚胎附植及胎盘建立和发育的作用 | 第73-76页 |
4.2 关于PLET1基因的选择及其在孕体和胎盘细胞的特异性表达 | 第76-78页 |
4.3 关于PLET1基因的转录本在不同妊娠期表达调控的机制 | 第78-79页 |
4.4 关于PLET1的糖基化修饰 | 第79-80页 |
4.5 关于Plet1基因在小鼠胎盘发育中作用的讨论 | 第80-81页 |
5 小结 | 第81-82页 |
5.1 本研究的主要结论与意义 | 第81页 |
5.2 本研究的特色与创新点 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-93页 |
致谢 | 第93-94页 |