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猪附植前期不同形状孕体差异表达基因的筛选与PLET1基因在胎盘发育中的功能初步研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略词表第13-14页
1 前言第14-26页
    1.1 研究问题由来第14页
    1.2 文献综述第14-25页
        1.2.1 猪胚胎附植和胎盘发育是影响母猪繁殖性状的重要因素第14-16页
        1.2.2 猪胚胎在附植前形态的快速变化是胚胎附植的前提第16-17页
        1.2.3 猪胚胎附植机制的研究进展第17-20页
        1.2.4 猪胎盘形成和发育机制的研究进展第20-22页
        1.2.5 胎盘滋养层细胞特异表达基因对胎盘功能的影响第22-24页
        1.2.6 PLET1基因的研究进展第24-25页
    1.3 研究的目的与意义第25-26页
2 材料方法第26-44页
    2.1 本研究的技术路线第26页
    2.2 材料第26-30页
        2.2.1 样品第26-27页
        2.2.2 菌株和载体第27-28页
        2.2.3 试验所用细胞系及实验动物第28页
        2.2.4 主要培养基第28-29页
        2.2.5 主要仪器设备第29页
        2.2.6 主要试剂第29页
        2.2.7 主要试剂的配制第29-30页
    2.3 主要分子生物学软件和网站第30页
        2.3.1 主要分子生物学软件第30页
        2.3.2 主要生物学网站和数据库第30页
    2.4 试验方法第30-44页
        2.4.1 RNA提取及芯片杂交第30页
        2.4.2 芯片数据的处理及分析第30-31页
        2.4.3 组织总RNA提取及反转录第31页
        2.4.4 荧光定量PCR检测及数据分析第31-32页
        2.4.5 体外受精、体细胞核移植及孤雌激活胚胎的获得第32页
        2.4.6 石蜡组织切片制作第32页
        2.4.7 RNA原位杂交第32-34页
        2.4.8 HE染色第34-35页
        2.4.9 石蜡切片的免疫组织化学及免疫荧光第35-36页
        2.4.10 3′RACE及序列分析第36-38页
        2.4.11 蛋白质的提取及糖基化检测第38-39页
        2.4.12 细胞转染及双荧光素酶活性测定第39-43页
        2.4.13 Plet1敲除小鼠的构建第43-44页
3 结果第44-73页
    3.1 梅山猪和大白猪附植前期球状和线状孕体中差异表达基因的筛选及分析第44-50页
        3.1.1 差异表达基因筛选及聚类分析第44-45页
        3.1.2 两个品种猪胚胎差异表达基因的表达模式分析第45-46页
        3.1.3 两个品种猪差异表达基因所涉及的功能及信号通路的比较分析第46-49页
        3.1.4 差异表达基因的验证第49-50页
    3.2 猪PLET1基因表达调控及功能的初步研究第50-73页
        3.2.1 猪PLET1的表达调控研究第50-66页
        3.2.2 利用小鼠模型检测plet1对胎盘发育的作用第66-73页
4 讨论第73-81页
    4.1 关于猪不同形态孕体中差异表达基因及其信号通路在胚胎附植及胎盘建立和发育的作用第73-76页
    4.2 关于PLET1基因的选择及其在孕体和胎盘细胞的特异性表达第76-78页
    4.3 关于PLET1基因的转录本在不同妊娠期表达调控的机制第78-79页
    4.4 关于PLET1的糖基化修饰第79-80页
    4.5 关于Plet1基因在小鼠胎盘发育中作用的讨论第80-81页
5 小结第81-82页
    5.1 本研究的主要结论与意义第81页
    5.2 本研究的特色与创新点第81-82页
参考文献第82-93页
致谢第93-94页

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