摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
缩略词表 | 第15-17页 |
第一部分 文献综述 | 第17-50页 |
第一章 鹿茸角生长、骨化相关研究进展 | 第17-50页 |
前言 | 第17-18页 |
1 塔里木马鹿简介 | 第18-21页 |
2 鹿茸角成份研究 | 第21-25页 |
2.1 氨基酸多肽类 | 第21-23页 |
2.2 脂类化合物 | 第23页 |
2.3 糖类化合物 | 第23页 |
2.4 甾体类化合物和性激素 | 第23-24页 |
2.5 含N化合物和多胺类 | 第24页 |
2.6 矿物元素 | 第24-25页 |
2.7 维生素 | 第25页 |
2.8 酶类物质 | 第25页 |
3 鹿茸角发生与再生研究 | 第25-35页 |
3.1 鹿茸角的发生与再生 | 第26-29页 |
3.1.1 鹿茸角发生和再生所依赖的组织 | 第26-27页 |
3.1.2 初角茸的组织发生 | 第27-28页 |
3.1.3 鹿茸角的再生 | 第28-29页 |
3.2 鹿茸角发育与再生的影响因素 | 第29-32页 |
3.2.1 与机体激素分泌水平有关 | 第29-30页 |
3.2.2 与气候条件有关 | 第30-31页 |
3.2.3 与饲养管理有关 | 第31页 |
3.2.4 其他因素 | 第31-32页 |
3.3 与鹿茸角生长相关基因研究 | 第32-35页 |
4 鹿茸角骨化研究进展 | 第35-45页 |
4.1 鹿茸角骨化 | 第35-38页 |
4.1.1 鹿茸角的生长阶段 | 第35-36页 |
4.1.2 鹿茸角的组织结构 | 第36-37页 |
4.1.3 鹿茸角的骨化过程 | 第37-38页 |
4.2 钙的生物学功能及吸收、代谢 | 第38页 |
4.3 鹿茸角骨化的矿物质来源 | 第38-39页 |
4.4 骨骼的形成和骨吸收 | 第39-45页 |
4.4.1 成骨细胞与骨形成密切相关 | 第40页 |
4.4.2 破骨细胞与骨吸收密切相关 | 第40页 |
4.4.3 骨形成的标志 | 第40-41页 |
4.4.4 骨形成及骨吸收的调节因子 | 第41-43页 |
4.4.5 钙敏感受体(CaSR): | 第43-45页 |
5 鹿茸角骨化的调控因子 | 第45-48页 |
5.1 激素类调控因子 | 第45-46页 |
5.2 蛋白类调控因子 | 第46-48页 |
6 鹿茸角骨化与骨骼形成的区别 | 第48-50页 |
第二部分 试验部分 | 第50-97页 |
第二章 塔里木马鹿鹿茸钙、骨钙、血钙变化规律研究 | 第50-64页 |
1 材料与方法 | 第50-54页 |
1.1 试验材料 | 第50-51页 |
1.1.1 仪器设备 | 第50-51页 |
1.1.2 试验材料 | 第51页 |
1.2 试验方法 | 第51-54页 |
1.2.1 采样前后鹿的处理 | 第51页 |
1.2.2 鹿茸角长度的测定 | 第51-52页 |
1.2.3 外周血的采集 | 第52页 |
1.2.4 骨骼样的采集 | 第52页 |
1.2.5 鹿茸角样采集 | 第52页 |
1.2.6 鹿茸角及骨骼样Ca~(2+)含量的测定(火焰原子吸收法) | 第52-53页 |
1.2.7 血钙测定 | 第53-54页 |
1.2.8 鹿茸切片制作(石蜡包埋法) | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-62页 |
2.1 采样时间及鹿茸角生长阶段划分 | 第54-55页 |
2.2 不同组鹿鹿茸角生长速度 | 第55页 |
2.3 各组塔里木马鹿上段、中段、下段鹿茸角Ca~(2+)含量的变化 | 第55-57页 |
2.4 塔里木马鹿鹿茸组织切片观察 | 第57-58页 |
2.5 塔里木马鹿外周血中Ca~(2+)含量变化 | 第58-59页 |
2.6 塔里木马鹿骨骼中Ca~(2+)含量的变化 | 第59-62页 |
2.6.1 不同组塔里木马鹿骨骼中Ca~(2+)含量的变化 | 第59-61页 |
2.6.2 骨钙下降程度分析 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-64页 |
3.1 鹿茸角生长、鹿茸角钙、血钙之间的关系 | 第62-64页 |
第三章 塔里木马鹿部分血清激素与鹿茸角骨化关系研究 | 第64-78页 |
1 材料与方法 | 第65-68页 |
1.1 试验材料 | 第65页 |
1.1.1 仪器设备 | 第65页 |
1.1.2 试验材料 | 第65页 |
1.2 试验方法 | 第65-68页 |
1.2.1 采样前后鹿的处理 | 第65页 |
1.2.2 外周血的采集 | 第65-66页 |
1.2.4 鹿血清中BALP的检测:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第66页 |
1.2.5 鹿血清中BSP的检测:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第66页 |
1.2.6 鹿血清中CT的检测:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第66页 |
1.2.7 鹿血清中BGP的检测:双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第66-67页 |
1.2.8 鹿血清中ADG的检测:双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) | 第67页 |
1.2.9 标准曲线的制备 | 第67页 |
1.2.10 数据计算 | 第67页 |
1.2.11 鹿茸角x光观察 | 第67-68页 |
2 结果与分析 | 第68-74页 |
2.1 PTH(甲状旁腺素)测定 | 第68-69页 |
2.2 BALP(特异性碱性磷酸酶)测定 | 第69页 |
2.3 BSP(骨唾液酸糖蛋白)测定 | 第69-70页 |
2.4 CT(降钙素)测定 | 第70-71页 |
2.5 BGP(骨钙素)测定 | 第71-72页 |
2.6 ADG(雄激素)测定 | 第72页 |
2.7 塔里木马鹿生茸期鹿茸角骨化程度X光观察 | 第72-73页 |
2.8 鹿茸钙沉积率分析 | 第73页 |
2.9 激素水平、血钙浓度、茸钙浓度之间的关系(以中年组马鹿为例) | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-78页 |
3.1 激素含量变化分析 | 第74-77页 |
3.2 血清激素水平、血钙浓度、茸钙浓度之间的关系分析 | 第77-78页 |
第四章 塔里木马鹿鹿茸细胞培养及相关基因表达研究 | 第78-97页 |
1 材料与方法 | 第78-87页 |
1.1 试验材料 | 第78-79页 |
1.1.1 仪器设备 | 第78-79页 |
1.1.2 试验材料 | 第79页 |
1.2 试验方法 | 第79-87页 |
1.2.1 采样前后鹿的处理 | 第79页 |
1.2.2 溶液配制 | 第79-81页 |
1.2.3 鹿茸细胞的分离培养 | 第81-82页 |
1.2.4 鹿茸细胞胞内钙离子浓度测定 | 第82页 |
1.2.5 Real-time PCR | 第82-84页 |
1.2.6 Western bloting | 第84-87页 |
1.3 统计分析 | 第87页 |
2 结果与分析 | 第87-95页 |
2.1 鹿茸角细胞生长观察 | 第87-88页 |
2.2 细胞内Ca~(2+)浓度([Ca~(2+)]i)的检测及变化 | 第88-92页 |
2.3 实时荧光定量PCR | 第92-94页 |
2.3.1 实时荧光定量PCR引物设计 | 第92页 |
2.3.2 提取的细胞RNA质量分析 | 第92-93页 |
2.3.3 实时定量扩增曲线与溶解曲线 | 第93页 |
2.3.4 BSP、CaSR、Runx2基因表达水平 | 第93-94页 |
2.4 Western Blot | 第94-95页 |
2.4.1 蛋白质浓度测定 | 第94页 |
2.4.2 蛋白质SDS-PAGE分析 | 第94-95页 |
2.4.3 Western Blot结果 | 第95页 |
3 讨论 | 第95-97页 |
3.1 不同细胞中CaSR的表达 | 第95-96页 |
3.2 不同细胞中Runx2的表达 | 第96页 |
3.3 不同细胞中BSP的表达 | 第96-97页 |
结论 | 第97-98页 |
附录 | 第98-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-117页 |