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cPL双抗体夹心ELISA检测犬急性胰腺炎方法的建立与应用

目录第1-8页
摘要第8-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语第11-12页
前言第12-13页
第一部份 文献综述第13-44页
 第一章 犬急性胰腺炎病因及病理发生第13-29页
  1 犬胰腺解剖结构第13页
  2 犬胰腺的生理功能第13-16页
   ·分泌消化酶第14页
   ·防止自体消化第14-15页
   ·胰腺分泌的调节第15-16页
  3 胰腺炎第16-29页
   ·犬急性胰腺炎的病因第16-20页
     ·营养,高脂蛋白血症,遗传因素第18-19页
     ·药物,毒素,高钙血症第19页
     ·导管堵塞第19-20页
     ·十二指肠反流,胰腺创伤和胰腺局部缺血第20页
     ·其他第20页
   ·犬急性胰腺炎的发病机制第20-27页
     ·"共同通道"学说与胰酶的异常激活第21-23页
     ·细胞因子的"瀑布效应"和全身炎症反应第23-25页
     ·胰腺微循环障碍第25-26页
     ·胰腺细胞凋亡第26页
     ·肠道细菌移位第26-27页
   ·急性胰腺炎时的病理改变第27-29页
     ·局部变化第27页
     ·全身变化第27-29页
 第二章 犬胰腺炎诊断概述第29-38页
  1 病史和临床症状第29页
  2 影像学检查第29-30页
  3 胰腺活检第30页
  4 实验室诊断第30-38页
   ·血液学检查第30页
   ·血液生化指标测定第30-38页
     ·淀粉酶(AMYLASE,AMY)第32-33页
     ·脂肪酶(LIPASE,LP)第33页
     ·犬胰脂肪酶免疫反应性(CANINE PANCREATIC LIPASE IMMUNOREACTIVITY,CPLI)第33-35页
     ·胰石蛋白(PANCREATIC STONE PROTEIN,PSP)第35页
     ·白细胞介素(INTERLEUKIN,IL)第35页
     ·肿瘤坏死因子(TUMOR NECROSIS FACTOR,TNF-A)第35-36页
     ·急性时相性蛋白(ACUTE PHASE PROTEIN,APP)第36页
     ·多形核粒细胞弹性蛋白酶(POLYMORPHONUCLEAR LEUKOCYTE ELASTASE,PMN-E)第36页
     ·胰蛋白酶原激活肽(TRYPSINOGEN ACTIVATION PEPTIDE,TAP)第36-37页
     ·磷脂酶A2(PHOSPHOLIPASE A2,PLA2)第37-38页
 参考文献第38-44页
第二部分 试验研究第44-77页
 第三章 CPL双抗体夹心ELISA检测板的建立与检测第44-57页
  1 材料与方法第45-49页
   ·材料第45-46页
     ·试验动物第45页
     ·试验样品第45页
     ·重组犬胰脂肪酶(RECOMBINANT CPL,RE-CPL)第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·主要仪器第46页
   ·方法第46-49页
     ·纯化犬胰脂肪酶(CANINE PANCREATIC LIPASE,CPL)第46页
     ·制备犬胰脂肪酶(CPL)标准浓度溶液第46页
     ·空白对照液第46页
     ·制作和纯化抗新西兰白兔的抗犬胰脂肪酶抗体(CPL-AB-N)第46-47页
     ·制作和生物素化抗美国白兔的抗犬胰脂肪酶抗体(CPL-AB-A)第47-48页
     ·建立测量犬胰脂肪酶免疫活性的ELISA方法第48-49页
  2 结果与分析第49-52页
   ·CPL的标准溶液第49-50页
   ·CPL-AB-N和CPL-AB-A第50页
   ·建立CPL双抗体夹心ELISA检测板第50页
   ·CPL双抗体夹心ELISA检测板的检测第50-52页
  3 讨论第52-57页
   ·纯化CPL制备犬胰脂肪酶标准浓度溶液第52页
   ·制作和纯化CPL-AB-N及生物素化CPL-AB-A第52-53页
   ·制作和验证ELISA检测板第53-54页
     ·制作双抗体夹心ELISA检测板第53页
     ·测定双抗体夹心ELISA检测板的反应条件第53页
     ·使用CPL的标准溶液检测双抗体夹心ELISA检测板第53-54页
   ·用ELISA检测犬血清中的CPL的优点第54-57页
     ·CPL的敏感度、特异度和准确度高第54页
     ·ELISA检测板检测CPL的特异性高第54-57页
 第四章 健康犬CPL双抗体夹心ELISA检测板的检测研究第57-65页
  1 材料与方法第57-58页
   ·材料第57-58页
     ·试验动物第57页
     ·主要试剂第57页
     ·主要仪器第57页
     ·阳性对照组和空白对照组第57-58页
     ·生物素化的抗犬胰脂肪酶抗体(CPL-AB-A)第58页
   ·方法第58页
     ·制备犬血清第58页
     ·使用双抗体夹心ELISA检测板进行检测第58页
  2 结果与分析第58-61页
  3 讨论第61-65页
   ·制备CPL溶液第61页
   ·建立犬胰脂肪酶抗体(CPL)的参考范围第61-62页
   ·CPL对诊断犬急性胰腺炎的诊断意义第62-65页
     ·双抗体夹心ELISA检测板的特异性第62页
     ·双抗体夹心ELISA检测板的方法简单易行第62-65页
 第五章 CPL双抗体夹心ELISA检测板的诊断研究第65-73页
  1 材料与方法第65-66页
   ·材料第65-66页
     ·试验样本第65页
     ·主要试剂第65页
     ·主要仪器第65页
     ·阳性对照组和空白对照组第65-66页
     ·生物素化的抗犬胰脂肪酶抗体(CPL-AB-A)的抗抗体第66页
   ·方法第66页
     ·制备犬血清第66页
     ·使用双抗体夹心ELISA检测板进行检测第66页
  2 结果与分析第66-69页
   ·检测样本、阳性对照组及空白对照组的检测结果第67-69页
  3 讨论第69-73页
   ·制备犬血清和CPL溶液第69页
   ·使用血清中CPL的浓度诊断急性胰腺炎第69页
   ·CPL双抗体夹心ELISA检测板的优点第69-73页
     ·CPL的敏感度、特异度和准确度高第69-70页
     ·ELISA检测板检测CPL的特异性高第70-73页
 参考文献第73-77页
全文总结第77-78页
创新之处第78-79页
致谢第79-80页
在读硕士期间发表文章和参加学术活动第80-81页

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