摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 果蝇雄性生殖系统相关研究 | 第11-13页 |
1.1.1 果蝇精子发生相关基因的研究 | 第12-13页 |
1.1.2 果蝇雄附腺相关基因的研究 | 第13页 |
1.2 Wolbachia研究概况 | 第13-17页 |
1.2.1 Wolbachia引起的CI | 第14-15页 |
1.2.2 Wolbachia与宿主共同进化 | 第15-16页 |
1.2.3 Wolbachia在生物防治上的应用 | 第16-17页 |
1.3 UAS-Ga14系统在果蝇转基因中的原理及应用 | 第17-18页 |
1.4 CG7194等基因的概况 | 第18-19页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-35页 |
2.1 实验材料 | 第21页 |
2.2 实验常用引物与试剂 | 第21-23页 |
2.3 主要仪器设备 | 第23页 |
2.4 实验方法 | 第23-35页 |
2.4.1 普通果蝇培养基的配制 | 第23-24页 |
2.4.2 果蝇胚胎收集盘的配制 | 第24页 |
2.4.3 提取果蝇基因组DNA | 第24页 |
2.4.4 检测果蝇体内的Wolbachia | 第24-25页 |
2.4.5 果蝇RNA的提取、消化及cDNA的合成 | 第25-26页 |
2.4.6 qRT-PCR(实时荧光定量PCR)检测基因的表达 | 第26-28页 |
2.4.7 CG7194时程表达分析 | 第28页 |
2.4.8 注射用质粒的构建 | 第28-32页 |
2.4.9 质粒的高纯度提取 | 第32-33页 |
2.4.10 果蝇胚胎的显微注射 | 第33-35页 |
3 结果 | 第35-45页 |
3.1 检测果蝇体内感染Wolbachia情况 | 第35页 |
3.2 qRT-PCR对基因芯片结果的验证 | 第35-39页 |
3.2.1 cDNA质量检测 | 第35-36页 |
3.2.2 基因芯片结果验证 | 第36-37页 |
3.2.3 CG7194在黑腹果蝇各发育时期的表达 | 第37-39页 |
3.3 在精巢和雄附腺中对候选基因的检测 | 第39-42页 |
3.4 转基因果蝇品系的构建 | 第42-45页 |
3.4.1 基因全长的扩增 | 第42-43页 |
3.4.2 显微注射果蝇胚胎 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
4.1 雄性生殖系统部分基因的检测 | 第45-46页 |
4.2 果蝇显微注射 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-56页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |