| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 中英文缩略词表 | 第6-10页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 LCN-2 基因概述 | 第10页 |
| 1.2 LCN-2 基因结构 | 第10-11页 |
| 1.3 LCN-2 蛋白空间结构 | 第11页 |
| 1.4 LCN-2 基因分布 | 第11-13页 |
| 1.5 LCN-2 基因的生物功能 | 第13-15页 |
| 1.6 雄性生殖 | 第15-18页 |
| 1.6.1 雄性生殖器官 | 第15-16页 |
| 1.6.2 精子发生 | 第16页 |
| 1.6.3 精子发生过程 | 第16-17页 |
| 1.6.4 精子发生的调控机制 | 第17页 |
| 1.6.5 精子的成熟与获能 | 第17-18页 |
| 1.7 目的和意义 | 第18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-38页 |
| 2.1 实验动物 | 第18-19页 |
| 2.2 动物模型构建与取材 | 第19页 |
| 2.2.1 发育性表达模型 | 第19页 |
| 2.2.2 白消安模型 | 第19页 |
| 2.2.3 隐睾模型 | 第19页 |
| 2.2.4 取材 | 第19页 |
| 2.3 动物形态学分析 | 第19-21页 |
| 2.3.1 睾丸大小 | 第19-20页 |
| 2.3.2 病理切片制作和HE染色观察 | 第20-21页 |
| 2.4 原位杂交探针制备和序列分析 | 第21-28页 |
| 2.4.1 PCR引物设计 | 第21页 |
| 2.4.2 组织总RNA的提取 | 第21-23页 |
| 2.4.3 反转录合成c DNA | 第23页 |
| 2.4.4 PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.4.5 PCR产物回收 | 第24-25页 |
| 2.4.6 PCR产物与载体的连接 | 第25页 |
| 2.4.7 感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| 2.4.8 转化重组质粒以及重组质粒的初步鉴定 | 第26-27页 |
| 2.4.9 目的基因片段回收待标探针 | 第27页 |
| 2.4.10 地高辛标记c RNA探针 | 第27-28页 |
| 2.5 原位杂交 | 第28-30页 |
| 2.5.1 冰冻切片的制备 | 第28-29页 |
| 2.5.2 原位杂交相关试剂的配制 | 第29页 |
| 2.5.3 原位杂交操作流程 | 第29-30页 |
| 2.6 实时荧光定量PCR | 第30-32页 |
| 2.6.1 q PCR引物设计 | 第30-31页 |
| 2.6.2 Real-time PCR步骤 | 第31-32页 |
| 2.7 Western Blot | 第32-38页 |
| 2.7.1 试剂配制 | 第32-35页 |
| 2.7.2 组织蛋白样品制备 | 第35页 |
| 2.7.3 蛋白浓度的测定 | 第35-36页 |
| 2.7.4 蛋白变性 | 第36页 |
| 2.7.5 实验步骤 | 第36-38页 |
| 3 结果 | 第38-45页 |
| 3.1 LCN-2 在小鼠不同发育阶段中m RNA的表达 | 第38-39页 |
| 3.2 白消安处理对小鼠睾丸中LCN-2 表达的影响 | 第39-42页 |
| 3.2.1 白消安模型中小鼠睾丸形态学结构变化 | 第39-40页 |
| 3.2.2 白消安模型小鼠睾丸中m RNA的表达 | 第40-41页 |
| 3.2.3 白消安模型中Real-time PCR结果 | 第41页 |
| 3.2.4 白消安模型中LCN-2 蛋白水平的表达 | 第41-42页 |
| 3.3 隐睾模型对小鼠睾丸中LCN-2 表达的影响 | 第42-45页 |
| 3.3.1 隐睾模型中小鼠睾丸形态学结构变化 | 第42页 |
| 3.3.2 隐睾模型小鼠睾丸中 mRNA 的表达 | 第42-43页 |
| 3.3.3 隐睾模型中Real-time PCR结果 | 第43页 |
| 3.3.4 隐睾模型中LCN-2 蛋白水平的表达 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 附录 | 第58页 |
