摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
1.前言 | 第9-16页 |
1.1 结晶与细胞粘附的影响因素 | 第10-11页 |
1.1.1 结晶与细胞粘附的作用模式 | 第10页 |
1.1.2 肾小管上皮细胞损伤对结晶细胞粘附的影响 | 第10-11页 |
1.1.3 前列腺素对细胞结晶粘附的影响 | 第11页 |
1.1.4 基质对细胞结晶粘附的影响 | 第11页 |
1.2 细胞膜损伤诱导草酸钙结石的形成机制 | 第11-12页 |
1.2.1 细胞膜磷脂失去不对称性 | 第11-12页 |
1.2.2 引起肾小管细胞表面表达透明质酸 | 第12页 |
1.3 细胞损伤诱导草酸钙结晶粘附实验 | 第12-14页 |
1.3.1 细胞损伤后的结果 | 第12-13页 |
1.3.2 线粒体介导细胞凋亡 | 第13页 |
1.3.3 尿激酶抑制结石的机理 | 第13-14页 |
1.4 肾小管上皮细胞氧化损伤模型的建立 | 第14页 |
1.4.1 HKC氧化损伤模型的建立 | 第14页 |
1.4.2 Vero氧化损伤模型的建立 | 第14页 |
1.5 草酸和草酸钙造成MDCK的损伤 | 第14-16页 |
1.5.1 MDCK细胞系介绍 | 第14-15页 |
1.5.2 不同浓度草酸和草酸钙对MDCK的损伤差异 | 第15页 |
1.5.3 草酸钙结晶在MDCK上聚积及对肾脏的影响 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-26页 |
2.1 细胞株 | 第16页 |
2.2 试验药物、试剂及仪器 | 第16-17页 |
2.2.1 试验药物及主要试剂 | 第16页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第16页 |
2.2.3 主要试验仪器与器材 | 第16-17页 |
2.3 细胞培养 | 第17-18页 |
2.3.1 MDCK细胞的复苏 | 第17页 |
2.3.2 MDCK细胞的传代 | 第17-18页 |
2.3.3 细胞计数 | 第18页 |
2.4 试验分组 | 第18-19页 |
2.4.1 细胞活性检测试验 | 第18页 |
2.4.2 细胞损伤检测试验 | 第18-19页 |
2.5 不同浓度草酸钙和不同作用时间对细胞活力的影响 | 第19-20页 |
2.5.1 CCK-8 法原理 | 第19页 |
2.5.2 细胞生长曲线的测定 | 第19页 |
2.5.3 细胞活力的测定 | 第19-20页 |
2.6 不同浓度草酸钙和不同作用时间对细胞损伤的影响 | 第20-26页 |
2.6.1 草酸钙刺激细胞 | 第20页 |
2.6.2 显微镜下观察细胞变化 | 第20页 |
2.6.3 细胞样本前处理 | 第20-21页 |
2.6.4 细胞蛋白定量测定(TP) | 第21页 |
2.6.5 细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 | 第21-22页 |
2.6.6 细胞微量丙二醛(MDA)测定 | 第22-23页 |
2.6.7 细胞过氧化氢(H_2O_2)的测定 | 第23-24页 |
2.6.8 细胞乳酸脱氢酶(LDH)含量测定 | 第24-25页 |
2.6.9 细胞 γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT/GGT)活力的测定 | 第25-26页 |
2.7 数据处理 | 第26页 |
3.结果 | 第26-47页 |
3.1 不同浓度草酸钙和不同作用时间对细胞形态学的影响 | 第26-40页 |
3.1.1 草酸钙对MDCK细胞生长状态的影响 | 第26-33页 |
3.1.2 草酸钙在细胞表面附着和聚积情况 | 第33-40页 |
3.2 不同浓度草酸钙和不同作用时间影响MDCK细胞活力的测定结果 | 第40-42页 |
3.2.1 MDCK细胞生长曲线 | 第40-41页 |
3.2.2 草酸钙对 MDCK 细胞活力的影响 | 第41-42页 |
3.3 不同浓度草酸钙和不同作用时间细胞损伤的测定 | 第42-47页 |
3.3.1 草酸钙对细胞蛋白含量的影响 | 第42-43页 |
3.3.2 草酸钙对细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响 | 第43-44页 |
3.3.3 草酸钙对细胞中丙二醛(MDA)含量的影响 | 第44-45页 |
3.3.4 草酸钙对细胞中过氧化氢(H_2O_2)含量的影响 | 第45-46页 |
3.3.5 草酸钙对细胞中乳酸脱氢酶(LDH)含量的影响 | 第46-47页 |
3.3.6 草酸钙对细胞中 γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT/GGT)活力的影响 | 第47页 |
4 分析与讨论 | 第47-54页 |
4.1 草酸钙对细胞的毒性 | 第47-49页 |
4.2 草酸钙对MDCK细胞活力的影响 | 第49-51页 |
4.3 草酸钙在MDCK细胞内外的聚集 | 第51-52页 |
4.4 草酸钙对MDCK细胞造成的氧化损伤 | 第52-54页 |
全文结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |