摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 前言 | 第13-20页 |
1.1 研究背景 | 第13-16页 |
1.1.1 金钱鱼生物学研究背景 | 第13-14页 |
1.1.2 雌激素及其所在HPG轴的研究 | 第14-16页 |
1.2 雌激素受体基因的研究进展 | 第16-17页 |
1.2.1 雌激素受体受体类型 | 第16页 |
1.2.2 雌激素受体的表达研究 | 第16页 |
1.2.3 雌激素受体在硬骨鱼中的研究 | 第16-17页 |
1.3 主要研究目标和技术路线 | 第17-20页 |
第二章 材料和方法 | 第20-40页 |
2.1 实验材料 | 第20-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 主要实验试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 常用缓冲液以及主要试剂配制 | 第21-23页 |
2.1.4 主要实验仪器 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-40页 |
2.2.1 组织总RNA提取 | 第24-26页 |
2.2.2 cDNA模板制备 | 第26-27页 |
2.2.3 引物设计 | 第27-28页 |
2.2.4 基因全长cDNA克隆 | 第28-31页 |
2.2.5 基因序列分析 | 第31页 |
2.2.6 半定量检测金钱鱼雌激素受体组织分布特征 | 第31页 |
2.2.7 荧光定量检测 | 第31-32页 |
2.2.8 原位杂交实验检测组织中基因表达位置 | 第32-40页 |
第三章 实验结果 | 第40-66页 |
3.1 总RNA提取结果 | 第40页 |
3.2 中间片段扩增结果 | 第40-41页 |
3.3 RACE扩增结果 | 第41-43页 |
3.4 基因序列特征分析 | 第43-56页 |
3.4.1 ERα 序列分析 | 第43-48页 |
3.4.2 ERβ1 基因序列分析 | 第48-51页 |
3.4.3 ERβ2 核酸序列分析 | 第51-56页 |
3.5 金钱鱼ER在雌雄成鱼中全组织表达分析 | 第56-57页 |
3.6 ER在金钱鱼雌雄不同性腺发育时期的表达 | 第57-61页 |
3.6.1 ERα 不同性腺发育时期的表达 | 第58页 |
3.6.2 ERβ1 不同性腺发育时期的表达 | 第58-59页 |
3.6.3 ERβ2 不同性腺发育时期的表达 | 第59-61页 |
3.7 ER在金钱鱼性腺中表达定位研究 | 第61-66页 |
3.7.1 ERβ1 基因在配子发生中的表达定位 | 第61-63页 |
3.7.2 ERβ2 基因在配子发生中的表达定位 | 第63-66页 |
第四章 讨论 | 第66-74页 |
4.1 金钱鱼雌激素受体基因结构与进化分析 | 第66-71页 |
4.2 金钱鱼三种雌激素受体在雌雄鱼全组织表达模式 | 第71-72页 |
4.3 金钱鱼三种雌激素受体在性腺发育周期中的表达 | 第72-73页 |
4.4 金钱鱼雌激素受体ERβs在配子产生过程中的表达定位 | 第73-74页 |
小结与展望 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
致谢 | 第81页 |