摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
1.中国对虾概况 | 第13-14页 |
2.对虾养殖中的主要病害及白斑综合征病毒概述 | 第14-15页 |
3 免疫致敏的研究进展 | 第15-18页 |
3.1 传统无脊椎动物免疫学理论 | 第15-16页 |
3.2 免疫致敏的发现 | 第16页 |
3.3 免疫致敏的广泛性和特异性 | 第16-17页 |
3.4 免疫致敏反应的长效性 | 第17页 |
3.5 免疫致敏的传代性 | 第17-18页 |
4 进化学理论阐明免疫致敏存在的合理性 | 第18-19页 |
5.免疫致敏的分子机制 | 第19-22页 |
5.1 模式识别受体 | 第19页 |
5.2 类免疫球蛋白的发现 | 第19-20页 |
5.3 唐氏综合征细胞粘附分子( down syndrome cellular adhesionmolecule,Dscam) | 第20-22页 |
6 对虾等甲壳类“疫苗” | 第22-24页 |
7. 本研究的意义 | 第24-26页 |
第二章 热灭活WSSV诱导的中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)在不同温度下的免疫致敏反应 | 第26-38页 |
1 材料与方法 | 第27-30页 |
1.1 实验材料 | 第27-28页 |
1.2 口饲感染毒饵的制备 | 第28页 |
1.3 热灭活WSSV饵料的制备 | 第28页 |
1.4 实验分组及管理 | 第28页 |
1.5 热灭活饵料的饲喂及二次感染 | 第28页 |
1.6 样品采集及处理 | 第28-29页 |
1.7 DNA提取及实时荧光定量PCR | 第29页 |
1.8 数据处理及分析 | 第29-30页 |
2. 结果 | 第30-35页 |
2.1 二次感染前死亡率及病毒载量变化 | 第30-31页 |
2.2 不同条件下中国对虾二次感染WSSV后存活时间的差异 | 第31页 |
2.3 不同条件对中国对虾二次感染WSSV后存活率、累积死亡率的影响 | 第31-33页 |
2.4 二次感染后各实验组取样及存活个体病毒载量 | 第33-35页 |
3. 讨论 | 第35-38页 |
3.1 免疫致敏现象对中国对虾的保护 | 第35-36页 |
3.2 不同温度对白斑综合征病毒增殖的影响 | 第36-38页 |
第三章 中国对虾Dscam基因的克隆及其在免疫致敏诱导过程中的表达分析 | 第38-52页 |
1. 材料与方法 | 第38-42页 |
1.1 实验材料 | 第38-39页 |
1.2 实验试剂 | 第39页 |
1.3 中国对虾总RNA提取及cDNA的合成 | 第39页 |
1.4 中国对虾Dscam基因cDNA全长克隆 | 第39页 |
1.5 中国对虾Dscam基因生物信息学分析 | 第39-40页 |
1.6 热灭活WSSV肌肉及毒饵的制作 | 第40页 |
1.7 热灭活WSSV诱导及人工二次感染 | 第40页 |
1.8 FcDscam基因的表达分析 | 第40-42页 |
2 结果与分析 | 第42-50页 |
2.1 中国对虾Dscam基因的克隆及序列分析 | 第42页 |
2.2 结构域分析 | 第42页 |
2.3 蛋白质结构预测 | 第42页 |
2.4 中国对虾Dscam基因同源性分析和系统进化树构建 | 第42-49页 |
2.5 中国对虾Dscam基因免疫致敏诱导及二次感染后表达量变化 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
3.1 Dscam基因的可变剪切 | 第50页 |
3.2 Dscam基因的结构域 | 第50-51页 |
3.3 Dscam基因时空表达规律 | 第51-52页 |
第四章 ~(60)Co γ 辐照和双乙烯亚胺(Binary Ethyleneimine)灭活白斑综合症病毒及免疫致敏反应的诱导 | 第52-66页 |
1 材料与方法 | 第53-56页 |
1.1 试剂及仪器 | 第53页 |
1.2 中国对虾饲喂和注射感染WSSV的半致死剂量 | 第53-55页 |
1.3. 不同灭活方式诱导中国对虾产生免疫致敏(类免疫)反应 | 第55-56页 |
2 结果与讨论 | 第56-63页 |
2.1 注射半致死剂量 | 第56-57页 |
2.2 免疫诱导阶段各实验组死亡统计 | 第57-58页 |
2.3 二次感染WSSV后各组平均存活时间 | 第58-59页 |
2.4 二次感染WSSV后各组累积死亡率和免疫保护率比较 | 第59-60页 |
2.5 免疫致敏反应诱导前后血淋巴中Dscam基因表达量变化 | 第60-62页 |
2.6 免疫致敏反应诱导前后Dscam基因组织表达分布 | 第62-63页 |
3.讨论 | 第63-66页 |
3.1 γ-射线和BEI灭活的原理和应用 | 第63-64页 |
3.2 免疫致敏反应与病原体数量和感染方式之间的关系 | 第64页 |
3.3 Dscam基因表达的时空和组织分布 | 第64-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-78页 |
致谢 | 第78页 |