| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 对虾免疫系统的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 对虾的先天免疫应答 | 第12页 |
| 1.1.2 对虾体液免疫的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.3 对虾细胞免疫的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2 对虾抗病毒研究 | 第16-18页 |
| 1.2.1 RNAi途径 | 第16-17页 |
| 1.2.2 RNAi途径在对虾抗病毒的研究 | 第17-18页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺免疫指标的影响 | 第19-27页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 菌株 | 第19页 |
| 2.1.2 实验药品 | 第19页 |
| 2.1.3 试剂配制 | 第19页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.5 实验用虾 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 溶藻弧菌肽聚糖的提取和鉴定实验 | 第20-21页 |
| 2.2.2 肽聚糖溶液配制 | 第21页 |
| 2.2.3 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾作用的实验 | 第21页 |
| 2.2.4 肝胰腺的粗酶液摄取及浓度测定 | 第21页 |
| 2.2.5 酸性磷酸酶（ACP）和碱性磷酸酶（AKP）的活力测定 | 第21-22页 |
| 2.2.6 超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合成酶（NOS）的活力测定 | 第22页 |
| 2.3 结果 | 第22-26页 |
| 2.3.1 溶藻弧菌肽聚糖得率 | 第22页 |
| 2.3.2 溶菌酶消化实验结果 | 第22页 |
| 2.3.3 总糖含量的测定实验 | 第22-23页 |
| 2.3.4 溶藻弧菌肽聚糖红外光谱图 | 第23页 |
| 2.3.5 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺ACP活力的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.6 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺AKP活力的影响 | 第24页 |
| 2.3.7 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺SOD活力的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.8 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺NOS活力的影响 | 第25-26页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第26-27页 |
| 3 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾抗WSSV的影响 | 第27-37页 |
| 3.1 材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 肽聚糖溶液 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第27-28页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 3.1.4 引物设计 | 第28页 |
| 3.1.5 实验用虾 | 第28页 |
| 3.1.6 病毒粗提液 | 第28页 |
| 3.2 方法 | 第28-31页 |
| 3.2.1 WSSV粗提液提取 | 第28-29页 |
| 3.2.2 WSSV毒性检测实验 | 第29页 |
| 3.2.3 WSSV攻毒最佳浓度确定实验 | 第29页 |
| 3.2.4 不同浓度肽聚糖对凡纳滨对虾抗WSSV感染实验 | 第29-30页 |
| 3.2.5 免疫指标测定 | 第30页 |
| 3.2.6 数据处理 | 第30-31页 |
| 3.3 结果 | 第31-36页 |
| 3.3.1 WSSV粗提液的提取、毒性检测及最佳攻毒浓度确定 | 第31-32页 |
| 3.3.2 不同浓度溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾感染WSSV后存活率的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.3 注射不同浓度溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾血清中PO活力的影响 | 第33页 |
| 3.3.4 注射不同浓度溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺中ACP和AKP活力的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.5 注射不同浓度溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺中SOD活力的影响 | 第35页 |
| 3.3.6 注射不同浓度溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾肝胰腺中NOS活力的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论与分析 | 第36-37页 |
| 3.4.1 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾非特异性指标的影响 | 第36页 |
| 3.4.2 溶藻弧菌肽聚糖对凡纳滨对虾免疫保护率的影响 | 第36-37页 |
| 4 肽聚糖和siRNA对凡纳滨对虾抗WSSV的影响 | 第37-45页 |
| 4.1 材料 | 第37页 |
| 4.1.1 实验用虾 | 第37页 |
| 4.1.2 实验试剂与药品 | 第37页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第37页 |
| 4.1.4 肽聚糖提取和溶液配制 | 第37页 |
| 4.1.5 病毒粗提液 | 第37页 |
| 4.2 方法 | 第37-39页 |
| 4.2.1 病毒粗提液提取 | 第37页 |
| 4.2.2 siRNA选择与合成 | 第37-38页 |
| 4.2.3 荧光定量引物设计 | 第38页 |
| 4.2.4 标准曲线的绘制 | 第38页 |
| 4.2.5 siRNA最佳浓度确定实验 | 第38页 |
| 4.2.6 注射 0.1μg/μL siRNA对凡纳滨对虾的抗WSSV实验 | 第38页 |
| 4.2.7 注射 0.1μg/mL PG和vp28-siRNA对凡纳滨对虾抗WSSV的实验 | 第38-39页 |
| 4.3 结果 | 第39-43页 |
| 4.3.1 绝对定量标准曲线绘制 | 第39-40页 |
| 4.3.2 siRNA最佳浓度确定 | 第40-41页 |
| 4.3.3 注射 0.1μg/μL vp28-siRNA对凡纳滨对虾的抗WSSV存活率及WSSV携带情况 | 第41-42页 |
| 4.3.4 注射 0.1μg/mL肽聚糖和vp28-siRNA对凡纳滨对虾感染WSSV存活率的影响 | 第42-43页 |
| 4.4 讨论与分析 | 第43-45页 |
| 5 溶藻弧菌肽聚糖和vp28-siRNA对凡纳滨对虾抗WSSV的肝胰腺转录组分析 | 第45-66页 |
| 5.1 材料 | 第45页 |
| 5.1.1 实验用虾 | 第45页 |
| 5.1.2 实验试剂与药品 | 第45页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第45页 |
| 5.1.4 肽聚糖溶液 | 第45页 |
| 5.1.5 siRNA溶液 | 第45页 |
| 5.1.6 病毒粗提液 | 第45页 |
| 5.2 方法 | 第45-47页 |
| 5.2.1 实验分组 | 第45-46页 |
| 5.2.2 总RNA质量检测 | 第46页 |
| 5.2.3 凡纳滨对虾肝胰脏转录组文库的构建及生物信息学分析流程 | 第46页 |
| 5.2.4 产量统计 | 第46页 |
| 5.2.5 组装结果分析 | 第46-47页 |
| 5.2.6 Unigene功能注释及GO分类 | 第47页 |
| 5.2.7 Unigene表达差异分析 | 第47页 |
| 5.3 结果 | 第47-64页 |
| 5.3.1 肝胰腺总RNA质量检测 | 第47-48页 |
| 5.3.2 凡纳滨对虾肝胰脏转录组组装结果 | 第48-51页 |
| 5.3.3 Unigene功能注释 | 第51-55页 |
| 5.3.4 Unigene差异表达 | 第55-56页 |
| 5.3.5 差异表达基因的通路富集分析 | 第56-64页 |
| 5.4 讨论与分析 | 第64-66页 |
| 6 结论 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简介 | 第78-79页 |
| 导师简介 | 第79-80页 |
