摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 抵抗素研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 抵抗素概况 | 第11-12页 |
1.1.2 人类抵抗素与二型糖尿病的关联 | 第12页 |
1.1.3 抵抗素受体及信号途径的研究现状 | 第12-13页 |
1.2 血管内皮细胞转运葡萄糖和胰岛素的机制 | 第13-15页 |
1.2.1 血管内皮细胞转运葡萄糖的机制 | 第13-14页 |
1.2.2 血管内皮细胞转运胰岛素的机制 | 第14-15页 |
1.3 GLUT1 的功能作用 | 第15-16页 |
1.4 PPARγ 的结构和功能 | 第16-19页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第19-22页 |
2 材料与方法 | 第22-43页 |
2.1 实验材料 | 第22-25页 |
2.1.1 实验细胞 | 第22页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第22页 |
2.1.4 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.5 主要溶液配制 | 第23-25页 |
2.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.3 分子生物学软件及相关网站 | 第26页 |
2.4 实验方法 | 第26-42页 |
2.4.1 细胞培养及转染 | 第26-27页 |
2.4.2 总RNA的提取及反转录 | 第27-28页 |
2.4.3 目的片段的扩增、纯化与载体构建 | 第28-36页 |
2.4.4 实时定量PCR | 第36-37页 |
2.4.5 细胞通透实验 | 第37页 |
2.4.6 双荧光素酶报告系统检测 | 第37-38页 |
2.4.7 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第38-39页 |
2.4.8 Western Bolt | 第39-42页 |
2.4.9 细胞免疫荧光实验 | 第42页 |
2.5 数据统计与分析 | 第42-43页 |
3. 结果与分析 | 第43-55页 |
3.1 抵抗素调控血管内皮细胞对葡萄糖和胰岛素的转运 | 第43-47页 |
3.1.1 抵抗素减少血管内皮细胞中GLUT1、INSR的mRNA水平 | 第43-44页 |
3.1.2 抵抗素减少血管内皮细胞中GLUT1、INSR的蛋白水平 | 第44-46页 |
3.1.3 GLUT1 回复抵抗素对葡萄糖的通透性的影响 | 第46-47页 |
3.2 抵抗素影响GLUT1 转录调控 | 第47-53页 |
3.2.1 GLUT1 启动子的克隆及顺式元件的分析 | 第47-49页 |
3.2.2 抵抗素降低GLUT1 启动子的转录活性 | 第49页 |
3.2.3 抵抗素通过PPARγ 调控GLUT1 启动子的转录活性 | 第49-52页 |
3.2.4 PPARγ 与GLUT1 启动子特异性结合 | 第52-53页 |
3.3 抵抗素通过PPARγ 下调GLUT1 表达 | 第53-55页 |
3.3.1 PPARγ 回复抵抗素引起的GLUT1 表达的下调 | 第53-54页 |
3.3.2 PPARγ 的抑制剂和激活剂可调控GLUT1 的表达 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-58页 |
5. 结论与创新点 | 第58-59页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 创新点 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-66页 |
致谢 | 第66页 |