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抵抗素调控血管内皮细胞对葡萄糖和胰岛素转运的研究

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
英文缩略词表第10-11页
1 前言第11-22页
    1.1 抵抗素研究进展第11-13页
        1.1.1 抵抗素概况第11-12页
        1.1.2 人类抵抗素与二型糖尿病的关联第12页
        1.1.3 抵抗素受体及信号途径的研究现状第12-13页
    1.2 血管内皮细胞转运葡萄糖和胰岛素的机制第13-15页
        1.2.1 血管内皮细胞转运葡萄糖的机制第13-14页
        1.2.2 血管内皮细胞转运胰岛素的机制第14-15页
    1.3 GLUT1 的功能作用第15-16页
    1.4 PPARγ 的结构和功能第16-19页
    1.5 研究的目的与意义第19-22页
2 材料与方法第22-43页
    2.1 实验材料第22-25页
        2.1.1 实验细胞第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22页
        2.1.4 主要试剂第22-23页
        2.1.5 主要溶液配制第23-25页
    2.2 主要仪器第25-26页
    2.3 分子生物学软件及相关网站第26页
    2.4 实验方法第26-42页
        2.4.1 细胞培养及转染第26-27页
        2.4.2 总RNA的提取及反转录第27-28页
        2.4.3 目的片段的扩增、纯化与载体构建第28-36页
        2.4.4 实时定量PCR第36-37页
        2.4.5 细胞通透实验第37页
        2.4.6 双荧光素酶报告系统检测第37-38页
        2.4.7 染色质免疫共沉淀(ChIP)第38-39页
        2.4.8 Western Bolt第39-42页
        2.4.9 细胞免疫荧光实验第42页
    2.5 数据统计与分析第42-43页
3. 结果与分析第43-55页
    3.1 抵抗素调控血管内皮细胞对葡萄糖和胰岛素的转运第43-47页
        3.1.1 抵抗素减少血管内皮细胞中GLUT1、INSR的mRNA水平第43-44页
        3.1.2 抵抗素减少血管内皮细胞中GLUT1、INSR的蛋白水平第44-46页
        3.1.3 GLUT1 回复抵抗素对葡萄糖的通透性的影响第46-47页
    3.2 抵抗素影响GLUT1 转录调控第47-53页
        3.2.1 GLUT1 启动子的克隆及顺式元件的分析第47-49页
        3.2.2 抵抗素降低GLUT1 启动子的转录活性第49页
        3.2.3 抵抗素通过PPARγ 调控GLUT1 启动子的转录活性第49-52页
        3.2.4 PPARγ 与GLUT1 启动子特异性结合第52-53页
    3.3 抵抗素通过PPARγ 下调GLUT1 表达第53-55页
        3.3.1 PPARγ 回复抵抗素引起的GLUT1 表达的下调第53-54页
        3.3.2 PPARγ 的抑制剂和激活剂可调控GLUT1 的表达第54-55页
4 讨论第55-58页
5. 结论与创新点第58-59页
    5.1 结论第58页
    5.2 创新点第58-59页
参考文献第59-66页
致谢第66页

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