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聚合抗虫基因和cry2A*和cry1C*早粳稻分子检测和抗虫性评价

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 引言第11-30页
    1.1 抗虫基因的来源及其作用机制第11-16页
        1.1.1 Bt基因第12-14页
        1.1.2 高等植物抗虫基因第14-16页
    1.2 转Bt基因水稻研究进展第16-19页
        1.2.1 转基因作物研究概况第16-18页
        1.2.2 转Bt基因水稻培育第18-19页
    1.3 转Bt基因作物抗性产生管理策略第19-22页
        1.3.1 低剂量接合生物天敌策略第19页
        1.3.2 转基因植物Bt毒素的组织或时空特异性表达第19-20页
        1.3.3 基因聚合策略第20-21页
        1.3.4 高剂量-庇护所策略第21-22页
    1.4 转基因检测技术研究进展第22-26页
        1.4.1 PCR检测技术第22-25页
        1.4.2 蛋白质检测方法第25-26页
    1.5 转基因植物T-DNA插入位点侧翼序列扩增方法第26-28页
        1.5.1 反向PCR第26-27页
        1.5.2 质粒拯救第27页
        1.5.3 PCR步移第27-28页
        1.5.4 热不对称交错PCR第28页
    1.6 研究目的与意义第28-30页
第2章 材料与方法第30-45页
    2.1 实验材料第30-32页
        2.1.1 供试植物材料第30-31页
        2.1.2 植物表达载体第31页
        2.1.3 实验昆虫第31-32页
        2.1.4 实验试剂第32页
        2.1.5 实验仪器第32页
    2.2 实验方法第32-45页
        2.2.1 Basta抗感性筛选第32-33页
        2.2.2 PCR检测第33-34页
        2.2.3 实时荧光定量PCR检测第34-35页
        2.2.4 水稻Bt蛋白测定第35-38页
        2.2.5 Southern blot检测第38-42页
        2.2.6 室内抗虫性鉴定第42-43页
        2.2.7 外源基因插入位点分析第43-45页
第3章 结果与分析第45-59页
    3.1 转cry2A*/cry1C*基因水稻筛选第45-47页
        3.1.1 Basta抗感性检测第45页
        3.1.2 胶体金免疫层析及PCR检测第45-47页
    3.2 转cry2A*/cry1C*水稻目的基因表达量第47-55页
        3.2.1 mRNA表达量测定第47-51页
        3.2.2 Bt蛋白表达量测定第51-55页
    3.3 转cry2A*/cry1C*水稻目的基因拷贝数第55-56页
    3.4 转cry2A*/cry1C*基因水稻室内抗虫性鉴定第56-57页
    3.5 cry2A*基因插入位点第57-59页
第4章 讨论第59-62页
    4.1 目的基因的筛选第59页
    4.2 Bt蛋白与水稻抗虫性分析第59-60页
    4.3 寒区超级早粳稻的培育第60-62页
第5章 结论第62-63页
参考文献第63-76页
附录第76-81页
    附录1 碱法小量制备质粒DNA第76页
    附录2 CTAB大量法提取DNA第76-77页
    附录3 质粒提取相关试剂配方第77-78页
    附录4 水稻DNA提取相关试剂配方第78-79页
    附录5 Southern blot相关试剂配方第79-80页
    附录6 Bt蛋白相关试剂配方第80页
    附录7 其他相关试剂配方第80-81页
致谢第81页

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