| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩写符号对照表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-21页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 多氯联苯 | 第15-16页 |
| 1.2.1 多氯联苯的理化性质 | 第15页 |
| 1.2.2 多氯联苯的代谢 | 第15-16页 |
| 1.2.3 多氯联苯的毒性 | 第16页 |
| 1.3 活性氧 | 第16页 |
| 1.4 细胞自噬 | 第16-18页 |
| 1.4.1 细胞自噬概念及其意义 | 第16-17页 |
| 1.4.2 细胞自噬诱导阶段 | 第17页 |
| 1.4.3 自噬膜泡成核阶段 | 第17页 |
| 1.4.4 自噬体形成阶段 | 第17-18页 |
| 1.4.5 成熟降解阶段 | 第18页 |
| 1.5 细胞凋亡 | 第18页 |
| 1.6 p53/HMGB1信号在细胞自噬与细胞凋亡间的调控 | 第18-19页 |
| 1.6.1 p53诱导细胞自噬与细胞凋亡的调控 | 第18-19页 |
| 1.6.2 HMGB1诱导细胞自噬与细胞凋亡的调控 | 第19页 |
| 1.7 立题依据及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 PCB29-pQ通过抑制mTOR/p70S6k信号激活自噬的机制分析 | 第21-43页 |
| 2.1 引言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 常用试剂制备方法 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第24页 |
| 2.3.2 细胞存活率实验 | 第24-25页 |
| 2.3.3 透射电镜观察细胞超微结构 | 第25页 |
| 2.3.4 吖啶橙（AO）染色法 | 第25页 |
| 2.3.5 丹(磺)酰戊二胺（MDC）染色法 | 第25页 |
| 2.3.6 细胞全蛋白的提取 | 第25页 |
| 2.3.7 Western Blot实验 | 第25-26页 |
| 2.3.8 荧光定量PCR实验 | 第26-28页 |
| 2.3.9 质粒扩增与提取 | 第28-29页 |
| 2.3.10 细胞质粒转染 | 第29页 |
| 2.3.11 免疫荧光实验 | 第29-30页 |
| 2.3.12 流式细胞仪检测凋亡 | 第30页 |
| 2.3.13 统计分析 | 第30页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第30-43页 |
| 2.4.1 PCB29-pQ对MDA-MB-231 细胞存活率分析 | 第30-31页 |
| 2.4.2 PCB29-pQ诱导HepG2和MDA-MB-231 细胞自噬的发生 | 第31-33页 |
| 2.4.3 PCB29-pQ通 过抑制mTOR和p70S6k信 号激活Hep G2和MDA-MB-231 细胞自噬诱导阶段 | 第33-34页 |
| 2.4.4 PCB29-pQ诱导自噬相关蛋白的表达激活HepG2和MDA-MB-231 细胞自噬形成延伸阶段 | 第34-35页 |
| 2.4.5 PCB29-pQ增强HepG2和MDA-MB-231 细胞自噬流水平 | 第35-36页 |
| 2.4.6 PCB29-pQ促 进自噬体与溶酶体的共定位激活HepG2和MDA-MB-231 细胞自噬溶酶体融合阶段 | 第36-38页 |
| 2.4.7 抑制自噬增强了PCB29-pQ对HepG2和MDA-MB-231 细胞的毒性作用 | 第38-39页 |
| 2.4.8 考察ROS水平对PCB29-pQ诱导HepG2和MDA-MB-231 细胞自噬的影响 | 第39-40页 |
| 2.4.9 讨论 | 第40-43页 |
| 第三章 PCB29-pQ诱导HepG2细胞自噬与细胞凋亡机制初探 | 第43-51页 |
| 3.1 引言 | 第43页 |
| 3.2 实验材料 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-46页 |
| 3.3.1 线粒体膜电位（JC-1）检测 | 第43-44页 |
| 3.3.2 Western Blot实验 | 第44页 |
| 3.3.3 免疫荧光实验 | 第44页 |
| 3.3.4 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第44-45页 |
| 3.3.5 细胞内钙离子浓度检测 | 第45页 |
| 3.3.6 钙蛋白酶活性分析 | 第45页 |
| 3.3.7 线粒体蛋白质的提取 | 第45-46页 |
| 3.3.8 统计分析 | 第46页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第46-51页 |
| 3.4.1 PCB29-pQ低浓度诱导细胞自噬，高浓度诱导细胞凋亡 | 第46-47页 |
| 3.4.2 PCB29-pQ对细胞内钙离子水平与钙蛋白酶活性的影响 | 第47-49页 |
| 3.4.3 PCB29-pQ对钙蛋白酶介导的ATG5/Beclin1的切割无移位至线粒体 | 第49页 |
| 3.4.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 PCB29-pQ通过p53和HMGB1蛋白介导细胞自噬与细胞凋亡间的调控 | 第51-63页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 Western Blot实验 | 第51-52页 |
| 4.3.2 免疫荧光双染实验 | 第52页 |
| 4.3.3 细胞核/细胞质蛋白的提取 | 第52页 |
| 4.3.4 免疫共沉淀（Co-IP） | 第52-53页 |
| 4.3.5 细胞siRNA瞬时转染 | 第53页 |
| 4.3.6 统计分析 | 第53页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第53-63页 |
| 4.4.1 PCB29-pQ诱导HepG2细胞p53/HMGB1易位到细胞质 | 第53-55页 |
| 4.4.2 PCB29-pQ诱导HepG2细胞p53与HMGB1的结合 | 第55页 |
| 4.4.3 PCB29-pQ诱导p53与HMGB1表达作为转录因子调控下游靶基因表达 | 第55-56页 |
| 4.4.4 p53 si RNA促进PCB29-pQ诱导的HMGB1进一步转移至细胞质，促进自噬，抑制凋亡 | 第56-58页 |
| 4.4.5 HMGB1 siRNA促进PCB29-pQ诱导的p53进一步转移至细胞质，抑制自噬，促进凋亡 | 第58-60页 |
| 4.4.6 讨论 | 第60-63页 |
| 全文总结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 作者攻读硕士学位期间已发表科研成果 | 第75-76页 |
