摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第13-14页 |
第一章 猪细小病毒的研究进展 | 第14-19页 |
1.1 PPV的病原学 | 第14-16页 |
1.1.1 PPV的形态及理化特性 | 第14-15页 |
1.1.2 PPV的体外培养特性 | 第15页 |
1.1.3 PPV的组织嗜性及致病性 | 第15-16页 |
1.2 PPV的流行病学 | 第16-17页 |
1.2.1 PPV的发病史及流行现状 | 第16页 |
1.2.2 PPV的传染源、传播途径及易感动物 | 第16-17页 |
1.3 PPV的致病机理 | 第17页 |
1.4 PPV的临床症状及病理变化 | 第17-18页 |
1.5 PPV的诊断与防治 | 第18-19页 |
第二章 动物病毒诱导细胞凋亡的研究 | 第19-24页 |
2.1 细胞凋亡的概述 | 第19-20页 |
2.1.1 细胞凋亡和坏死的区别 | 第19页 |
2.1.2 细胞凋亡的生理意义 | 第19页 |
2.1.3 细胞凋亡的检测方法 | 第19-20页 |
2.2 细胞凋亡相关的调控因子 | 第20-22页 |
2.2.1 Caspase家族 | 第20-21页 |
2.2.2 Bcl-2 家族 | 第21页 |
2.2.3 ROS | 第21-22页 |
2.3 细胞凋亡的信号通路 | 第22-23页 |
2.3.1 线粒体通路 | 第22页 |
2.3.2 死亡受体通路 | 第22页 |
2.3.3 内质网通路 | 第22-23页 |
2.4 病毒感染与细胞凋亡的联系 | 第23页 |
2.5 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第三章 猪细小病毒诱导ST细胞凋亡 | 第24-31页 |
3.1 材料 | 第24-25页 |
3.1.1 毒株和细胞株 | 第24页 |
3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
3.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
3.1.4 试验所用溶液的配制 | 第25页 |
3.2 方法 | 第25-27页 |
3.2.1 细胞培养 | 第25-26页 |
3.2.2 病毒的增殖 | 第26页 |
3.2.3 MTT 法检测细胞活性 | 第26页 |
3.2.4 AO/EB荧光染色 | 第26页 |
3.2.5 DNA片断化分析 | 第26-27页 |
3.2.6 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第27页 |
3.2.7 统计学分析 | 第27页 |
3.3 结果与分析 | 第27-29页 |
3.3.1 PPV感染对ST细胞活性影响的检测 | 第27-28页 |
3.3.2 PPV诱导ST细胞凋亡的形态学变化 | 第28页 |
3.3.3 DNA片段化分析 | 第28-29页 |
3.3.4 流式细胞术检测PPV感染对ST细胞凋亡率的影响 | 第29页 |
3.4 讨论 | 第29-30页 |
3.5 小结 | 第30-31页 |
第四章 猪细小病毒诱导ST细胞凋亡的信号通路 | 第31-39页 |
4.1 材料 | 第31-32页 |
4.1.1 主要试剂 | 第31页 |
4.1.2 主要仪器 | 第31页 |
4.1.3 试验所用溶液的配制 | 第31-32页 |
4.2 方法 | 第32-33页 |
4.2.1 Caspase活性检测 | 第32页 |
4.2.2 线粒体膜电位的测定 | 第32页 |
4.2.3 Western blot检测凋亡相关因子的变化 | 第32-33页 |
4.2.4 统计学分析 | 第33页 |
4.3 结果与分析 | 第33-37页 |
4.3.1 PPV感染对ST细胞内Caspase活性的影响 | 第33-34页 |
4.3.2 PPV感染ST细胞对Fas与FasL表达的影响 | 第34-35页 |
4.3.3 PPV感染促进Caspase-3 的底物PARP的切割 | 第35页 |
4.3.4 PPV感染ST细胞对Bax与Bcl-2 蛋白表达水平的影响 | 第35页 |
4.3.5 PPV感染对ST细胞对线粒体膜电位变化的影响 | 第35-36页 |
4.3.6 PPV感染ST细胞对Bax与Cyt c转位的影响 | 第36-37页 |
4.4 讨论 | 第37-38页 |
4.5 小结 | 第38-39页 |
第五章 PPV诱导ROS的活化 | 第39-47页 |
5.1 材料 | 第39页 |
5.1.1 主要试剂 | 第39页 |
5.1.2 试验所用溶液的配制 | 第39页 |
5.1.3 主要仪器 | 第39页 |
5.2 方法 | 第39-40页 |
5.2.1 ROS水平检测 | 第39-40页 |
5.2.2 抑制试验 | 第40页 |
5.2.3 线粒体膜电位及Western blot检测 | 第40页 |
5.2.4 Caspase-3 活性及细胞凋亡率检测 | 第40页 |
5.2.5 统计学分析 | 第40页 |
5.3 结果与分析 | 第40-45页 |
5.3.1 PPV感染引起ROS积累 | 第40-41页 |
5.3.2 ROS调控线粒体膜电位的变化 | 第41-42页 |
5.3.3 ROS清除剂对细胞凋亡调控蛋白的影响 | 第42-43页 |
5.3.4 ROS清除剂对细胞内Caspase-3 活性的影响 | 第43-44页 |
5.3.5 ROS清除剂对细胞凋亡率的影响 | 第44-45页 |
5.4 讨论 | 第45页 |
5.5 小结 | 第45-47页 |
结论与创新点 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
缩略词 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
作者简介 | 第55页 |