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氟虫腈和顺式硝基新烟碱化合物的细胞毒性及作用机理研究

摘要第5-6页
Abstract第6页
第1章 文献综述第10-26页
    1.1 杀虫剂的活性筛选第10-11页
        1.1.1 活体筛选第10页
        1.1.2 离体筛选第10-11页
    1.2 细胞凋亡第11-21页
        1.2.1 细胞凋亡与细胞坏死第11-13页
        1.2.2 细胞凋亡的概述第13页
        1.2.3 细胞凋亡的特征第13-14页
        1.2.4 细胞凋亡作用机制第14-18页
            1.2.4.1 死亡受体通路第14页
            1.2.4.2 内质网信号通路第14-15页
            1.2.4.3 线粒体通路第15-18页
        1.2.5 果蝇细胞凋亡第18-20页
        1.2.6 细胞凋亡的检测第20-21页
            1.2.6.1 细胞形态观察第20页
            1.2.6.2 DNA碎片分析第20页
            1.2.6.3 细胞质膜变化第20页
            1.2.6.4 线粒体分析第20-21页
            1.2.6.5 caspases检测第21页
            1.2.6.6 组织中的凋亡检测第21页
    1.3 氟虫腈简介第21-22页
    1.4 新烟碱杀虫剂简介第22-23页
    1.5 本文的研究内容、目的及意义第23-26页
第2章 氟虫腈通过caspase依赖的线粒体通路诱导果蝇S2细胞凋亡第26-45页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 实验材料第27-28页
        2.2.1 供试化合物第27页
        2.2.2 细胞系第27-28页
        2.2.3 实验所用仪器第28页
    2.3 研究方法第28-33页
        2.3.1 细胞增殖抑制实验第28页
        2.3.2 细胞凋亡分析第28-29页
        2.3.3 线粒体膜电位分析第29页
        2.3.4 细胞内活性氧(ROS)分析第29-30页
        2.3.5 Western blotting第30-32页
            2.3.5.1 溶液配制第30-31页
            2.3.5.2 细胞裂解和蛋白含量测定第31页
            2.3.5.3 SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳第31-32页
            2.3.5.4 Western blotting第32页
        2.3.6 caspase-3和caspase-9活性分析第32-33页
        2.3.7 数据统计与分析第33页
    2.4 结果与分析第33-40页
        2.4.0 不同杀虫剂的细胞增殖抑制作用第33-34页
        2.4.1 氟虫腈对果蝇S2细胞增殖抑制的影响第34-35页
        2.4.2 氟虫腈对果蝇S2细胞凋亡的影响第35-36页
        2.4.3 氟虫腈诱导果蝇S2细胞线粒体去极化第36-37页
        2.4.4 氟虫腈对果蝇S2细胞凋亡相关蛋白的影响第37-40页
        2.4.5 氟虫腈增加果蝇S2细胞内的活性氧(ROS)含量第40页
    2.5 讨论第40-45页
第3章 顺式硝基新烟碱化合物对美洲大蠊DUM神经元细胞膜电位的影响第45-55页
    3.1 引言第45-46页
    3.2 实验材料第46页
        3.2.1 供试昆虫第46页
        3.2.2 供试化合物第46页
        3.2.3 实验所用仪器第46页
    3.3 研究方法第46-48页
        3.3.1 毒性测定第46-47页
        3.3.2 美洲大蠊DUM神经元的原代培养第47页
        3.3.3 神经元细胞膜电位的测定第47页
        3.3.4 Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+-)Mg~(2+)-ATPase活性测定第47-48页
            3.3.4.1 酶源制备第47-48页
            3.3.4.2 蛋白含量测定第48页
            3.3.4.3 Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性测定第48页
        3.3.5 数据统计与分析第48页
    3.4 结果与分析第48-53页
        3.4.1 顺式硝基新烟碱杀虫剂对美洲大蠊的毒力测定第48-49页
        3.4.2 美洲大蠊DUM神经元细胞形态学鉴定第49-50页
        3.4.3 新烟碱杀虫剂对美洲大蠊DUM神经元细胞膜电位的影响第50-52页
        3.4.4 新烟碱杀虫剂对美洲大蠊Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性的影响第52-53页
    3.5 讨论第53-55页
第4章 全文总结第55-57页
参考文献第57-68页
致谢第68-69页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第69页

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