摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第1章 文献综述 | 第10-22页 |
1.1 蛋白的纯化及固定化技术 | 第10-16页 |
1.1.1 生物催化简介 | 第10-11页 |
1.1.2 蛋白纯化 | 第11-13页 |
1.1.3 蛋白固定化 | 第13-16页 |
1.2 仿生粘附材料 | 第16-21页 |
1.2.1 粘附材料简介 | 第16-18页 |
1.2.2 粘附材料的应用 | 第18-21页 |
1.3 本课题的研究意义及内容 | 第21-22页 |
第2章 GST标签蛋白的分离纯化 | 第22-36页 |
2.1 前言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-25页 |
2.2.1 实验试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 实验仪器 | 第23-24页 |
2.2.3 质粒和菌株 | 第24页 |
2.2.4 培养基、缓冲液及电泳 | 第24-25页 |
2.3 实验方法 | 第25-28页 |
2.3.1 GST-GFP融合蛋白的构建与表达 | 第25-27页 |
2.3.2 材料GSH-PD-IONPs合成与表征 | 第27-28页 |
2.3.3 材料GSH-PD-IONPs分离纯化融合蛋白GST-GFP | 第28页 |
2.4 结果与讨论 | 第28-34页 |
2.4.1 GST-GFP融合蛋白的构建与表达 | 第28-30页 |
2.4.2 材料GSH-PD-IONPs的合成与表征 | 第30-32页 |
2.4.3 材料GSH-PD-IONPs的特异性鉴定 | 第32-34页 |
2.5 本章小结 | 第34-36页 |
第3章 His标签蛋白的分离纯化及固定化 | 第36-51页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 实验材料 | 第36-38页 |
3.2.1 实验试剂 | 第36-37页 |
3.2.2 实验仪器 | 第37-38页 |
3.2.3 质粒和菌株 | 第38页 |
3.2.4 培养基、缓冲液 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-41页 |
3.3.1 His-RFP标签融合蛋白的构建与表达 | 第38页 |
3.3.2 His标签融合的ω-转氨酶的构建与表达 | 第38-39页 |
3.3.3 材料Ni~(2+)PD-MNPs合成与表征 | 第39页 |
3.3.4 材料Ni~(2+)-PD-MNPs分离纯化融合蛋白His-RFP | 第39-40页 |
3.3.5 材料Ni~(2+)-PD-MNPs选择性固定化ω-转氨酶BJ110 | 第40页 |
3.3.6 固定化酶的活性评价、稳定性、及重复使用性 | 第40-41页 |
3.4 结果与讨论 | 第41-49页 |
3.4.1 组氨酸融合蛋白的构建与表达 | 第41页 |
3.4.2 材料Ni~(2+)-PD-MNPs合成与表征 | 第41-45页 |
3.4.3 材料Ni~(2+)PD-MNPs分离纯化His-RFP | 第45-46页 |
3.4.4 材料Ni~(2+)-PD-MNPs选择性固定化ω-转氨酶BJ110 | 第46-48页 |
3.4.5 固定化酶的温度稳定性、pH稳定性及重复使用性 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-51页 |
第4章 葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶共固定研究 | 第51-65页 |
4.1 前言 | 第51页 |
4.2 实验材料 | 第51-52页 |
4.2.1 实验试剂 | 第51-52页 |
4.2.2 实验仪器 | 第52页 |
4.2.3 缓冲液 | 第52页 |
4.3 实验方法 | 第52-54页 |
4.3.1 材料CCS-IONPs合成与表征 | 第52-53页 |
4.3.2 葡萄糖氧化酶(GOD)的酶活测定 | 第53-54页 |
4.3.3 葡萄糖氧化酶(GOD)与过氧化氢酶(CAT)混合液的定量分析 | 第54页 |
4.3.4 葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶的固定化 | 第54页 |
4.3.5 葡萄糖氧化酶与过氧化氢酶的共固定 | 第54页 |
4.3.6 固定化酶的稳定性 | 第54页 |
4.4 结果与讨论 | 第54-63页 |
4.4.1 材料CCS-IONPs的表征 | 第54-57页 |
4.4.2 材料CCS-IONPs对GOD的固定化 | 第57-59页 |
4.4.3 材料CCS-IONPs对GOD及CAT的固定化 | 第59-63页 |
4.5 本章小结 | 第63-65页 |
第5章 总结与展望 | 第65-67页 |
5.1 总结 | 第65页 |
5.2 展望 | 第65-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
致谢 | 第73页 |