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内蒙古地区2015年牛羊蓝舌病流行病学调查及病毒的初步分离鉴定

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 引言第11-22页
    1.1 蓝舌病概述第11页
    1.2 BT流行情况第11-12页
        1.2.1 国外疫情第11-12页
        1.2.2 国内疫情第12页
    1.3 BT的传播以及流行特性第12页
    1.4 BTV病原学特性第12-15页
    1.5 BTV的致病机理第15-16页
    1.6 BT的临床症状和病理变化第16页
    1.7 疫苗的研究第16-18页
    1.8 预防措施第18页
    1.9 BTV的常用鉴定与分离方法第18-22页
        1.9.1 血清学检查方法第18-20页
        1.9.2 病毒分离方法第20页
        1.9.3 核酸探针技术第20-21页
        1.9.4 聚合酶链式反应(PCR技术)第21-22页
2 内蒙古地区BT清学调查第22-37页
    2.1 材料第22-23页
    2.2 实验方法第23-27页
        2.2.1 C-ELISA方法第23-24页
        2.2.2 提取全血RNA第24-25页
        2.2.3 BTV-NS1基因的RT-PCR扩增第25-26页
        2.2.4 巢式PCR扩增第26-27页
    2.3 试验结果第27-35页
        2.3.1 C-ELISA试验结果第27-28页
        2.3.2 血清学调查RT-PCR结果第28页
        2.3.3 内蒙古地区羊BT调查结果(见表5)第28-31页
        2.3.4 不同饲养方式BT感染率调查结果(见表7)第31-32页
        2.3.5 内蒙古地区牛BT感染率调查结果(见表9)第32-35页
    2.4 讨论第35-37页
3 内蒙古呼和浩特地区BTV的初步分离第37-44页
    3.1 材料第37-38页
        3.1.1 生物材料第37页
        3.1.2 主要试剂(见表11)第37页
        3.1.3 设备与耗材(见表12)第37-38页
    3.2 试验方法第38-40页
        3.2.1 鸡胚接种第38页
        3.2.2 技术路线第38-39页
        3.2.3 鸡胚的收获第39页
        3.2.4 鸡胚肝脏的PCR检测第39页
        3.2.5 细胞接种第39-40页
        3.2.6 分离物的鉴定(同3.2.4)第40页
        3.2.7 病毒分离物的保存第40页
    3.3 结果第40-42页
        3.3.1 鸡胚的接种结果第40-41页
        3.3.2 细胞接种结果第41-42页
    3.4 讨论第42-44页
4 BTV的鉴定第44-54页
    4.1 材料第44-45页
        4.1.1 主要试剂(见表13)第44页
        4.1.2 设备和耗材(见表14)第44-45页
    4.2 方法第45-48页
        4.2.1 提取BHK-21细胞培养物RNA(同2.4)第45页
        4.2.2 PCR检测(同2.5)第45页
        4.2.3 巢式PCR产物的回收第45-46页
        4.2.4 NS1基因片段的克隆第46页
        4.2.5 连接第46页
        4.2.6 转化第46-47页
        4.2.7 质粒的提取第47页
        4.2.8 NS1序列与分析第47页
        4.2.9 病毒形态学观察第47-48页
    4.3 结果第48-52页
        4.3.1 RT-PCR结果第48页
        4.3.2 巢式PCR结果第48-49页
        4.3.3 NS1片段的基因克隆结果第49-50页
        4.3.4 NS1序列与分析结果第50-51页
        4.3.5 病毒形态学观察结果第51-52页
    4.4 讨论第52-54页
5 结论第54-55页
致谢第55-56页
参考文献第56-62页
作者简介第62页

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