摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 引言 | 第11-22页 |
1.1 蓝舌病概述 | 第11页 |
1.2 BT流行情况 | 第11-12页 |
1.2.1 国外疫情 | 第11-12页 |
1.2.2 国内疫情 | 第12页 |
1.3 BT的传播以及流行特性 | 第12页 |
1.4 BTV病原学特性 | 第12-15页 |
1.5 BTV的致病机理 | 第15-16页 |
1.6 BT的临床症状和病理变化 | 第16页 |
1.7 疫苗的研究 | 第16-18页 |
1.8 预防措施 | 第18页 |
1.9 BTV的常用鉴定与分离方法 | 第18-22页 |
1.9.1 血清学检查方法 | 第18-20页 |
1.9.2 病毒分离方法 | 第20页 |
1.9.3 核酸探针技术 | 第20-21页 |
1.9.4 聚合酶链式反应(PCR技术) | 第21-22页 |
2 内蒙古地区BT清学调查 | 第22-37页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-27页 |
2.2.1 C-ELISA方法 | 第23-24页 |
2.2.2 提取全血RNA | 第24-25页 |
2.2.3 BTV-NS1基因的RT-PCR扩增 | 第25-26页 |
2.2.4 巢式PCR扩增 | 第26-27页 |
2.3 试验结果 | 第27-35页 |
2.3.1 C-ELISA试验结果 | 第27-28页 |
2.3.2 血清学调查RT-PCR结果 | 第28页 |
2.3.3 内蒙古地区羊BT调查结果(见表5) | 第28-31页 |
2.3.4 不同饲养方式BT感染率调查结果(见表7) | 第31-32页 |
2.3.5 内蒙古地区牛BT感染率调查结果(见表9) | 第32-35页 |
2.4 讨论 | 第35-37页 |
3 内蒙古呼和浩特地区BTV的初步分离 | 第37-44页 |
3.1 材料 | 第37-38页 |
3.1.1 生物材料 | 第37页 |
3.1.2 主要试剂(见表11) | 第37页 |
3.1.3 设备与耗材(见表12) | 第37-38页 |
3.2 试验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 鸡胚接种 | 第38页 |
3.2.2 技术路线 | 第38-39页 |
3.2.3 鸡胚的收获 | 第39页 |
3.2.4 鸡胚肝脏的PCR检测 | 第39页 |
3.2.5 细胞接种 | 第39-40页 |
3.2.6 分离物的鉴定(同3.2.4) | 第40页 |
3.2.7 病毒分离物的保存 | 第40页 |
3.3 结果 | 第40-42页 |
3.3.1 鸡胚的接种结果 | 第40-41页 |
3.3.2 细胞接种结果 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-44页 |
4 BTV的鉴定 | 第44-54页 |
4.1 材料 | 第44-45页 |
4.1.1 主要试剂(见表13) | 第44页 |
4.1.2 设备和耗材(见表14) | 第44-45页 |
4.2 方法 | 第45-48页 |
4.2.1 提取BHK-21细胞培养物RNA(同2.4) | 第45页 |
4.2.2 PCR检测(同2.5) | 第45页 |
4.2.3 巢式PCR产物的回收 | 第45-46页 |
4.2.4 NS1基因片段的克隆 | 第46页 |
4.2.5 连接 | 第46页 |
4.2.6 转化 | 第46-47页 |
4.2.7 质粒的提取 | 第47页 |
4.2.8 NS1序列与分析 | 第47页 |
4.2.9 病毒形态学观察 | 第47-48页 |
4.3 结果 | 第48-52页 |
4.3.1 RT-PCR结果 | 第48页 |
4.3.2 巢式PCR结果 | 第48-49页 |
4.3.3 NS1片段的基因克隆结果 | 第49-50页 |
4.3.4 NS1序列与分析结果 | 第50-51页 |
4.3.5 病毒形态学观察结果 | 第51-52页 |
4.4 讨论 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
作者简介 | 第62页 |