符号说明 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-28页 |
1.1 卵母细胞染色质构型的概念 | 第11页 |
1.2 哺乳动物卵母细胞染色质构型的分类标准 | 第11-13页 |
1.3 卵母细胞染色质构型和基因转录的关系 | 第13页 |
1.4 卵母细胞染色质构型与发育能力的关系 | 第13-14页 |
1.5 卵母细胞组蛋白表观修饰与基因转录的关系 | 第14-22页 |
1.5.1 卵母细胞组蛋白乙酰化与基因转录的关系 | 第15-18页 |
1.5.2 卵母细胞组蛋白甲基化与基因转录的关系 | 第18-20页 |
1.5.3 卵母细胞组蛋白磷酸化与基因转录的关系 | 第20-22页 |
1.6 卵母细胞组蛋白表观修饰与发育能力的关系 | 第22-23页 |
1.7 不同处理与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系 | 第23-25页 |
1.7.1 卵巢保存与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系 | 第23-24页 |
1.7.2 其他处理与卵母细胞染色质构型和发育能力之间的关系 | 第24-25页 |
1.8 细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系 | 第25-27页 |
1.8.1 颗粒细胞凋亡与卵母细胞发育能力关系 | 第25-26页 |
1.8.2 Fas/FasL通路与卵母细胞发育能力的关系 | 第26-27页 |
1.9 本研究的主要内容和目的意义 | 第27-28页 |
2 材料和方法 | 第28-36页 |
2.1 主要试剂及配制 | 第28-29页 |
2.2 实验动物饲养及小鼠超排处理 | 第29页 |
2.3 卵巢保存 | 第29页 |
2.4 18-19日龄小鼠卵母细胞的获取 | 第29页 |
2.5 GV期卵母细胞染色质构型观察 | 第29-30页 |
2.6 活细胞工作站观察异常染色质构型转变过程 | 第30页 |
2.7 小鼠卵丘细胞单层培养 | 第30页 |
2.8 卵母细胞获取和体外成熟 | 第30页 |
2.9 卵母细胞Sr~(2+)激活和胚胎培养 | 第30-31页 |
2.10 卵母细胞核内组蛋白及Fas蛋白免疫荧光染色 | 第31-32页 |
2.11 Hoechst33342荧光染色检测颗粒细胞凋亡 | 第32-33页 |
2.12 Western Blot检测颗粒细胞FasL表达 | 第33-35页 |
2.12.1 western blot试剂及溶液 | 第33页 |
2.12.2 壁颗粒细胞蛋白的提取 | 第33页 |
2.12.3 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-35页 |
2.12.4 抗原抗体的结合及显色 | 第35页 |
2.13 数据分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-51页 |
3.1 不同条件保存卵巢前后卵母细胞染色质构型分类 | 第36-38页 |
3.2 不同条件保存卵巢对卵母细胞染色质构型转变的影响 | 第38页 |
3.3 活细胞工作站下观察卵母细胞异常染色质构型转变的过程 | 第38-40页 |
3.4 不同条件保存卵巢对卵母细胞发育能力的影响 | 第40-41页 |
3.5 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白修饰的影响 | 第41-47页 |
3.5.1 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白乙酰化水平的影响 | 第41-45页 |
3.5.2 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白甲基化水平的影响 | 第45-46页 |
3.5.3 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白磷酸化水平的影响 | 第46-47页 |
3.6 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡、FasL表达水平的影响 | 第47-49页 |
3.6.1 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡的影响 | 第47-49页 |
3.6.2 不同条件保存卵巢对颗粒细胞FasL表达水平的影响 | 第49页 |
3.7 不同条件保存卵巢对卵母细胞Fas表达水平的影响 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-59页 |
4.1 不同条件保存卵巢对卵母细胞染色质构型转变的影响 | 第51-52页 |
4.2 不同条件保存卵巢对卵母细胞发育能力的影响 | 第52-53页 |
4.3 不同条件保存卵巢对卵母细胞组蛋白表观修饰水平的影响 | 第53-56页 |
4.4 不同条件保存卵巢对颗粒细胞凋亡的影响 | 第56-57页 |
4.5 不同条件保存卵巢对颗粒细胞FasL表达水平和卵母细胞Fas表达水平的影响 | 第57-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介以及发表论文 | 第70页 |