| 中文摘要 | 第15-18页 |
| Abstract | 第18-20页 |
| 符号说明 | 第21-23页 |
| 前言 | 第23-32页 |
| 1.黄精 | 第23-25页 |
| 1.1 黄精概况 | 第23页 |
| 1.2 黄精的活性成分 | 第23-24页 |
| 1.2.1 黄精多糖 | 第23页 |
| 1.2.2 甾体皂苷 | 第23-24页 |
| 1.2.3 黄酮类化合物及生物碱 | 第24页 |
| 1.2.4 木脂素类化合物 | 第24页 |
| 1.3 黄精生物活性 | 第24-25页 |
| 1.3.1 增强免疫功能 | 第24页 |
| 1.3.2 降血糖作用 | 第24-25页 |
| 1.3.3 抑菌抗炎 | 第25页 |
| 1.3.4 提高和改善记忆 | 第25页 |
| 2.多糖的概述 | 第25-29页 |
| 2.1 多糖的制备 | 第25-27页 |
| 2.1.1 热水提取法 | 第25-26页 |
| 2.1.2 碱提取法 | 第26页 |
| 2.1.3 酸提取法 | 第26页 |
| 2.1.4 复合酶水提法 | 第26-27页 |
| 2.2 多糖的分离纯化方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 脱蛋白 | 第27页 |
| 2.2.2 脱色 | 第27-28页 |
| 2.2.3 多糖纯化方法 | 第28页 |
| 2.2.4 多糖的定量 | 第28-29页 |
| 2.3 多糖分子量、单糖组成及比例的测定方法 | 第29页 |
| 2.3.1 多糖分子量的测定 | 第29页 |
| 2.3.2 单糖组成及比例的测定 | 第29页 |
| 2.4 多糖的结构分析方法 | 第29页 |
| 3.黄精多糖的研究进展 | 第29-30页 |
| 3.1 黄精多糖的提取方法 | 第29-30页 |
| 3.2 黄精多糖的纯化分离方法 | 第30页 |
| 3.3 黄精多糖的药理研究 | 第30页 |
| 4.本课题的研究意义和主要研究内容 | 第30-32页 |
| 4.1 黄精多糖的研究意义 | 第30-31页 |
| 4.2 主要研究内容 | 第31-32页 |
| 第一章 黄精多糖的提取纯化及结构研究 | 第32-46页 |
| 一.材料与仪器 | 第32-33页 |
| 1.实验材料 | 第32页 |
| 2.实验仪器 | 第32-33页 |
| 二.实验方法 | 第33-37页 |
| 1.黄精多糖的提取 | 第33页 |
| 2.黄精多糖的纯化 | 第33页 |
| 3.黄精多糖含量测定 | 第33-34页 |
| 3.1 试剂的配制 | 第33-34页 |
| 3.2 标准曲线的配制 | 第34页 |
| 3.3 黄精多糖的含量测定 | 第34页 |
| 4.黄精多糖的鉴定 | 第34-35页 |
| 4.1 斐林试剂鉴别法 | 第34页 |
| 4.2 Molisch反应 | 第34-35页 |
| 4.3 沉淀反应 | 第35页 |
| 4.4 双缩脲反应 | 第35页 |
| 4.5 茚三酮反应 | 第35页 |
| 5.离子交换色谱分离黄精多糖 | 第35-36页 |
| 6.柱前衍生化HPLC法测定黄精多糖的单糖组成 | 第36页 |
| 6.1 黄精多糖的水解 | 第36页 |
| 6.2 柱前衍生化反应 | 第36页 |
| 6.3 色谱条件 | 第36页 |
| 7.黄精多糖分子量测定 | 第36页 |
| 8.红外光谱分析 | 第36-37页 |
| 9.NMR分析 | 第37页 |
| 10.黄精多糖体外抗氧化能力评价 | 第37页 |
| 10.1 DPPH法测定 | 第37页 |
| 10.2 ABTS法测定 | 第37页 |
| 三.结果与讨论 | 第37-45页 |
| 1.黄精多糖的收率 | 第37页 |
| 2.质量评价 | 第37-38页 |
| 2.1 鉴定结果 | 第37-38页 |
| 2.2 黄精多糖的含量 | 第38页 |
| 3.黄精多糖的分离纯化 | 第38-39页 |
| 4.黄精多糖的单糖组成 | 第39-40页 |
| 5.黄精多糖分子量测定 | 第40页 |
| 6.红外光谱分析 | 第40-43页 |
| 7.核磁共振分析 | 第43-44页 |
| 7.1 黄精多糖PSP1的核磁共振分析 | 第43页 |
| 7.2 黄精多糖PSP2的核磁共振分析 | 第43页 |
| 7.3 黄精多糖PSP3的核磁共振分析 | 第43页 |
| 7.4 黄精多糖PSP4的核磁共振分析 | 第43-44页 |
| 8.黄精多糖体外抗氧化能力测定 | 第44-45页 |
| 8.1 DPPH自由基清除能力 | 第44页 |
| 8.2 ABTS自由基清除能力 | 第44-45页 |
| 四.小结 | 第45-46页 |
| 第二章 黄精多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究 | 第46-67页 |
| 一.试剂与仪器 | 第46-47页 |
| 1.细胞与药物 | 第46页 |
| 2.实验仪器 | 第46页 |
| 3.实验试剂 | 第46-47页 |
| 二.实验方法 | 第47-54页 |
| 1.细胞复苏、培养与传代 | 第47-48页 |
| 2.MTT法和SRB法检测细胞存活率 | 第48-49页 |
| 2.1 MTT法检测细胞存活率 | 第48页 |
| 2.2 SRB法检测细胞存活率 | 第48-49页 |
| 3.黄精多糖对LDH活性的影响 | 第49页 |
| 4.黄精多糖对细胞形态的影响 | 第49页 |
| 5.中性红法测定RAW264.7细胞的吞噬能力 | 第49-50页 |
| 6.测定细胞上清中NO的含量 | 第50页 |
| 7.测定细胞上清液中TNF-α,IL-6的含量 | 第50页 |
| 8.RT-PCR法测定RAW264.7细胞中TNF-α和IL-6 mRNA的水平 | 第50-52页 |
| 8.1 总RNA提取 | 第50-51页 |
| 8.2 逆转录方法 | 第51页 |
| 8.3 RT-PCR扩增方法 | 第51-52页 |
| 9.Western blot法检测蛋白表达 | 第52-54页 |
| 9.1 细胞中蛋白的提取 | 第52-53页 |
| 9.2 蛋白浓度的测定 | 第53页 |
| 9.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第53-54页 |
| 10.免疫荧光化学法检测NF-κB核转移 | 第54页 |
| 三.结果与讨论 | 第54-65页 |
| 1.MTT法和SRB法测定黄精多糖对细胞存活率的影响 | 第54-55页 |
| 2.黄精多糖对细胞受损的影响 | 第55-56页 |
| 3.黄精多糖对RAW264.7细胞形态的影响 | 第56-58页 |
| 4.黄精多糖对RAW264.7细胞吞噬能力的影响 | 第58-59页 |
| 5.黄精多糖对RAW264.7细胞分泌NO的影响 | 第59-60页 |
| 6.黄精多糖对RAW264.7细胞分泌细胞因子的影响 | 第60-61页 |
| 7.黄精多糖对RAW264.7细胞中TNF-α和IL-6 mRNA水平的影响 | 第61-62页 |
| 8.黄精多糖对RAW264.7细胞中MAPK信号通路的影响 | 第62-64页 |
| 9.黄精多糖对RAW264.7细胞NF-κB核转移的影响 | 第64-65页 |
| 四.小结 | 第65-67页 |
| 第三章 黄精多糖对免疫抑制小鼠的治疗作用研究 | 第67-79页 |
| 一.试剂与仪器 | 第67-68页 |
| 1.药品 | 第67页 |
| 2.试剂 | 第67页 |
| 3.仪器 | 第67页 |
| 4.实验动物 | 第67-68页 |
| 二.实验方法 | 第68-70页 |
| 1.动物分组及给药 | 第68页 |
| 2.小鼠情况观测 | 第68页 |
| 3.小鼠抗炎实验 | 第68-69页 |
| 4.小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能 | 第69页 |
| 5.血液样本采集 | 第69页 |
| 6.免疫器官指数 | 第69页 |
| 7.对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第69-70页 |
| 8.T细胞CD4~+/CD8~+分型 | 第70页 |
| 9.小鼠血清中细胞因子的检测 | 第70页 |
| 三.结果与讨论 | 第70-78页 |
| 1.黄精多糖对小鼠状况的影响 | 第70-71页 |
| 2.黄精多糖对二甲苯所致小鼠耳廓急性炎症的影响 | 第71-72页 |
| 3.黄精多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 | 第72-73页 |
| 4.黄精多糖对小鼠免疫器官指数的影响 | 第73页 |
| 5.黄精多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响 | 第73-74页 |
| 6.黄精多糖对小鼠CD4~+、CD8~+的影响 | 第74-75页 |
| 7.黄精多糖对小鼠细胞因子的影响 | 第75-78页 |
| 四.小结 | 第78-79页 |
| 全文总结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读学位期间发表学术论文目录 | 第87-88页 |
| 附图 化合物核磁共振谱图 | 第88-96页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第96页 |
