| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第6-12页 |
| 绪论 | 第12-24页 |
| 一、茶氨酸的研究背景与现状 | 第12-14页 |
| 二、茶氨酸的理化性质 | 第14-15页 |
| 三、茶氨酸的生理功能及其开发应用前景 | 第15-17页 |
| 四、茶氨酸的化学合成和生物合成 | 第17-19页 |
| 五、原核表达 | 第19-21页 |
| 六、易错PCR | 第21页 |
| 七、响应面试验 | 第21-22页 |
| 八、总结 | 第22-24页 |
| 第一章 试验设计方案 | 第24-28页 |
| 1 试验目的 | 第24页 |
| 2 试验内容 | 第24页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因的克隆研究 | 第24页 |
| ·γ -谷氨酰转肤酶的诱导表达研究 | 第24页 |
| ·易错PCR筛选出γ-谷氨酰胺转肽酶高产基因工程菌株 | 第24页 |
| ·重组γ-谷氨酰转肽酶的诱导表达研究及条件优化 | 第24页 |
| 3 技术路线 | 第24-28页 |
| ·γ -谷氨酰转肽酶基因的克隆 | 第24-26页 |
| ·易错PCR筛选出γ-谷氨酰胺转肽酶高产基因工程菌株 | 第26页 |
| ·重组γ-谷氨酰转肽酶的诱导表达研究及条件优化 | 第26-28页 |
| 第二章 γ-谷氨酰转肽酶基因的克隆 | 第28-52页 |
| ·试验材料 | 第28-29页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·载体 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-39页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因克隆载体的构建 | 第29-33页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因表达载体的构建 | 第33-36页 |
| ·γ-谷氨酰胺转肽酶的表达 | 第36-38页 |
| ·表达产物活性的鉴定 | 第38-39页 |
| ·氨基酸纸层析法测定γ-谷氨酰转肽酶活性 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-49页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因克隆载体的构建 | 第39-41页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因表达载体的构建 | 第41-47页 |
| ·γ-谷氨酰胺转肽酶的表达 | 第47页 |
| ·表达产物活性的鉴定 | 第47-48页 |
| ·氨基酸纸层析法测定γ-谷氨酰转肤酶活性 | 第48-49页 |
| ·本章小结 | 第49-52页 |
| 第三章 易错PCR诱变γ-谷氨酰转肽酶 | 第52-72页 |
| ·试验材料 | 第52-53页 |
| ·菌株 | 第52页 |
| ·载体 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器设备 | 第52-53页 |
| ·试验方法 | 第53-59页 |
| ·γ-谷氨酰胺转肽酶易错PCR体系的选择 | 第53-54页 |
| ·第一轮易错PCR | 第54-56页 |
| ·第二轮易错PCR | 第56-59页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因随机突变库 | 第59页 |
| ·测序 | 第59页 |
| ·易错γ-谷氨酰转肽酶基因诱导表达 | 第59页 |
| ·表达产物活性的鉴定 | 第59页 |
| ·结果与讨论 | 第59-70页 |
| ·γ-谷氨酰胺转肽酶易错PCR体系的选择 | 第59-60页 |
| ·易错PCR第一轮 | 第60-62页 |
| ·易错PCR第二轮 | 第62-65页 |
| ·γ-谷氨酰转肽酶基因随机突变库 | 第65页 |
| ·测序 | 第65-69页 |
| ·易错PCR γ-谷氨酰转肽酶基因诱导表达 | 第69页 |
| ·表达产物活性的鉴定 | 第69-70页 |
| ·本章小结 | 第70-72页 |
| 第四章 响应面优化γ-谷氨酰转肽酶表达条件 | 第72-96页 |
| ·试验材料 | 第72-73页 |
| ·生物材料 | 第72页 |
| ·主要试剂 | 第72页 |
| ·主要试验仪器 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-75页 |
| ·工程菌生长曲线绘制 | 第73页 |
| ·单因素试验 | 第73-75页 |
| ·Plackett-Burman试验 | 第75页 |
| ·最陡爬坡试验 | 第75页 |
| ·Box-Behnken试验 | 第75页 |
| ·结果与讨论 | 第75-93页 |
| ·工程菌生长曲线绘制 | 第75-77页 |
| ·单因素试验 | 第77-84页 |
| ·Plackett-Burman试验设计及结果分析 | 第84-86页 |
| ·最陡爬坡试验 | 第86-87页 |
| ·Plackett-Burman试验设计优化 | 第87-93页 |
| ·本章小结 | 第93-96页 |
| 结论与展望 | 第96-98页 |
| 附录1 符号缩略表 | 第98-99页 |
| 附录2 SDS-PAGE溶液配制 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-106页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第106-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 个人简历 | 第110-112页 |
